擎科T5SuperPCRMix菌落PCR实例
TA克隆菌落PCR
使⽤T5 Super PCR Mix(Colony) ，对转化⼦插⼊⽚段⼤⼩扩增，验证阳性率。
【样品】转化感受态E.coli(DH5α)后⽣长过夜（不超过16⼩时）的平板上菌落
【克隆载体】擎科(Tsingke)pClone007 Simple Vector(TSV-007S)
【⽚段⼤⼩】5 kb
【引物】
M13-47: CGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGAC
M13-48: AGCGGATAACAATTTCACACAGGA
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【体系】
2×T5 Super PCR Mix(Colony) 10µl
方便面能干吃吗
第一红人M13-47(10µM) 1µl
M13-48(10µM) 1µl
垂头丧气的拼音
菌落模板微量暮江吟的吟是什么意思
ddH2O 补⾜⾄20µl
【热循环条件】
98 3min
98 10s
57 10s 30个循环
72 50s
何藩摄影作品72 2min
【结果】
T5 Mix Colony
sabo
“M”：DNA Marker,DL5000(TSJ012-100/500)“-”：阴性对照；“1-15”：挑取的15个菌落。
【数据来源】
中国科学院微⽣物研究所杨⽼师
【来⾃⽼师的评语】
以前我们也⽤过其他公司的PCR mix做菌落PCR，但是容易受到菌落⽣长状况，挑取菌量多少的影响，扩增结果很不稳定。擎科这款产品是专门的菌P mix，扩增迅速，产量也⾼，操作简便，扩增成功率很⾼，菌P鉴定⼀次成功。
【Tips】
1. 使⽤⽆菌的⽛签或移液吸头挑取痕量（可辨挑到即可），过量菌体或带⼊培养基会影响扩增效率。
2. ⾮新鲜平板菌落（如4放置数天）可能因⼲燥⽽难以挑取，应以⾁眼可见，确认为宜。
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