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es, Chine Academy of Sciences, Shanghai, China Coadministration of huperzine A and ligustrazine phosphate effectively revers scopolamine-induce damnesia in rats School of Pharmacy, East China University of Science and Technology, Shanghai 20XX年37, PRChina Effects of Microgravity Modeled by Large Gradient High Magnetic Field on the Osteogenic Initiation of Human Menchymal Stem Cells CCR4-NOT deadenylates RISC-associated mRNA in human cells State Key Laboratory of Molecular Biology, Institute of Biochemistry and Cell Biology Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chine Academy of Science shanghai,china
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主要内容1 2
Real-time qPCR的基本概念 的基本概念 Real-time qPCR的定量原理 的定量原理 Real-time qPCR的检测方法 的检测方法 Real-time qPCR的解析方法 的解析方法
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PCR: PCR:基本原理Denaturation: 94 C 96°C °基本要素: 基本要素: Template Primers DNA polymera dNTP, N=A,G,C or T
Annealing: 50 C 65°C °
Extension: 70 C 75°C °
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PCR: PCR:基本原理S形曲线,具有平台效应 形曲线, 形曲线
理想的 理想的PCR反应: 反应: 理想的 反应 N=N0*2n 实际的 实际的PCR反应: 反应: 实际的 反应 N=N0* (1+E)n N0:初始模板量 N:第n次循环后的产物量 : 次循环后的产物量 n:扩增反应的循环次数 : E:扩增效率 :
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与普通PCR的对比 与普通PCR的对比 PCR传统PCR检测 检测 传统 同一个样本进行96次重复 同一个样本进行96次重复 96 传统PCR检测 检测 传统
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传统PCR--终点检测: 传统PCR--终点检测: PCR--终点检测
PCR--起点检测: --起点检测 Real time PCR--起点检测:
-- 终点产物量经过PCR放大的DNA量 -- 起点量是样本中起始的DNA量 终点产物量经过PCR放大的DNA量 起点量是样本中起始的DNA量 PCR放大的DNA DNA 生成了500 个拷贝” 加入了500个拷贝” -- “生成了500,0000,0000个拷贝” -- “加入了500个拷贝” 生成了500,0000,0000个拷贝 加入了500个拷贝 不恒定, 具有重现性, -- 不恒定,误差大 -- 具有重现性,误差小Company name