岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程
一、开机前准备
1、流动相 按照标准要求配制流动相，需使用色谱纯试剂，有机相和纯水不用过滤，可直接超声脱气后使用。无机盐溶液流动相必须使用溶剂过滤器过滤，根据溶液不同选择不同的滤膜（有机相/水相），过滤后超声脱气使用。脱气时需盖上瓶盖，但不拧紧。有机相流动相脱气必须在通风橱或高温室操作。将配制好的流动相接入液相色谱仪的流路。一般纯有机相接入A泵，纯水接入D泵，无机盐溶液接入B泵。注意观察洗液瓶是否还有洗针水，洗针水为1：1甲醇水。
催乳手法2、色谱柱 按标准要求选择色谱柱，一般为C18柱，苯并芘有专用柱，糖类分析用氨基柱。色谱柱安装：色谱柱上有箭头，按流路方向安装，根据所要使用的检测器在色谱柱的出口端接上不同接头。红孩儿传奇
二、开机
1、打开 泵→自动进样器→柱温箱→检测器→控制器→电脑软件Labsolution。点击自动进样
张飞是怎么死的器上Purge键，使自动进样器进入自动清洗状态，25分钟自动停止。双击选择适用的检测器，SPDA为二极管阵列检测器，RF为荧光检测器，ELSD为蒸发光散射检测器。标准要求使用紫外检测器或者二极管阵列检测器的均选择二极管阵列检测器，此检测器为最常用检测器，一般项目均使用此检测器。要求使用示差折光检测器或者蒸发光散射检测器的均选用蒸发光散射检测器，本实验室应用主要为葡萄糖、蔗糖、果糖、麦芽糖、乳糖、三氯蔗糖，使用该检测器需打开气体，气体为氮气或空气，需使用99.999%纯度以上。荧光检测器本实验室主要用于黄曲霉毒素B族和G族、苯并芘的检测。
2、新建方法文件
文件→新建方法文件 将等度洗脱修改为低压梯度，最高柱压由10MPa改为20MPa，设置柱流速为1ml/min，根据标准要求选择光源，检测波长小于350nm打开D2灯，350nm以上打开W灯。设置完成后点击“下载”。
流路排气 根据选择的流路进行排气，所需要使用的每个流路均需排气。以选择A、B流路为例，逆时针旋转打开排气阀，将B、C、D泵流量设为0，点击“下载”，然后在泵上点击Purge键，显示屏上显示“Purge line”，进入A泵排气阶段。等待3分钟左右，带显示屏上显
示流速和柱压后，A泵排气完成。在电脑上将B泵流量设为100%，其他流路均为0，点击“下载”，然后在泵上点击Purge键，进入B泵排气阶段。等待排气完成后，顺时针旋转关闭排气阀。流路排气完成。
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根据标准要求设置柱温箱温度，点击柱温箱上“FUC”，然后点击“ENTER”,将温度修改为所需温度，再点击“ENTER”,最后点击两次“CE”,柱温设置完成。
按标准要求在电脑上设置流动相配比，保存方法文件，点击“下载”。方法文件建立完成。
3、开泵 开泵有两种方法，①点击软件上“开泵”键。②点击泵上PUMP键。开泵后流动相按照设定比例进入色谱柱。注意观察泵显示屏上的柱压，柱压不能超过20MPa，且需处于恒定值。
4、开泵后将鼠标放到色谱图上点击右键，设置所需波长。点击“绘图”（仅二极管阵列检测器需执行这一步操作）→ALL，观察基线稳定性，基线平滑后才可进行进样操作。放大基线，基线在±1范围内波动可认为基线平滑。
四、批处理分析
点击软件左边框中“批处理分析”，首先设置数据需要保存的文件夹。建立批处理文件时需设置样品瓶号、样品名称、方法文件、数据文件名。样品品号根据所放进样瓶的位置设置，样品名称根据自身需要设置，设置完成后将所有样品名称复制粘贴到数据文件名一栏。方法文件点击框中小箭头，选择出前面建立的方法文件。
柱冲洗 柱冲洗一般选用有机相和纯水混合冲洗，有机相一般为甲醇或者乙腈。若实验使用的流动相为有机相+纯水，可以使用50%的甲醇水等度洗脱。若实验使用的流动相为无机盐溶液，需执行梯度洗脱，先使用大比例的水相冲洗，例如90%的甲醇水、乙腈水，然后调整增加有机相比例，至50%以下。最后将柱流速降低至0.1ml/min，可不关机。需先建立一个柱冲洗方法文件，可设置柱流速为0.8ml/min，最大柱压为20MPa，光源设置为“OFF”，根据需要设置梯度洗脱程序。
批处理分析最后一栏进样瓶号设置为“-1”，方法文件选择建立好的柱冲洗程序。待观察到基线平滑后点击“批处理分析开始”。
五、网红图片头像标准曲线建立
什么皆图画打开色谱图数据，点击右边框“编辑”，按标准要求修改至所需波长，点击“视图”。记录色谱图上目标峰保留时间。点击左边框“向导”，选择外标法，设置级数、单位，按照保留时间勾选目标峰，输入峰名称，浓度级数，最后点击“完成”。点击左边框“应用到方法”，点击“完成”。打开刚刚建立的标准曲线，将不同浓度数据拖入到相应的浓度级数。观察标准曲线线性，一般需达到0.999以上。
白菜炒肉的做法>柳生新阴流蒸发光散射检测器的标准曲线不是一次函数，在建立标准曲线的时候需选择指数函数。
打开数据，点击“文件”→“加载方法参数”，选择刚刚建立的标准曲线，可以使用标准曲线计算未知样品浓度。
