Wyatt多角度激光光散射凝胶色谱联用系统操作规程
（Wyatt GPC/SEC –MALS）
10月3日一试验前准备
1 溶剂准备
水相体系准备：超纯水或配制其它盐溶液~ 1L，并使用0.22um滤膜过滤(必须含0.02%NaN3抑菌剂)。
有机相体系准备：HPLC级溶剂；建议使用0.22um滤膜过滤（进口试剂视具体情况而定）。
2 样品准备
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浓度配制（定量环100uL）：
分子量~1000kda：0.5 - 1mg/mL；分子量~100kda：1 - 2mg/mL；豆腐圆子怎么做
分子量~10kda：3 - 5mg/mL；分子量~5kda：5 - 10mg/mL。平稳的反义词
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3 检查仪器电路连接
检查仪器电源线是否连接，电源开关、交换机（适用于信号连接通过网线的情形）是否打开。
二仪器系统开机及平衡操作
1 分别依次打开泵、柱温箱(设定温度)、进样系统（手动/自动进样器）、示差或紫外检测器、粘度检测器、多角度激光光散射检测器电源及计算机。待仪器正常开机后，打开工作站Astra软件。
2 开启泵，使用超纯水purge泵~5min；关闭purge阀。冲洗系统。待系统平衡完毕，使用最新配制的流动相冲洗系统。（注：有机体系：直接使用流动相冲洗系统）
3 将其流速调至0.1mL/min（若接入粘度检测器，必须待粘度检测器进入工作界面才能开启泵的流速，且IP &DP 处于purge on）；
若系统中未接入GPC/SEC柱，可直接将流速调至0.1 – 1.0mL/min冲洗系统（无粘度检测器），示差检测器purge阀必须处于“Purge On”状态。
若系统中已接入GPC/SEC柱，则必须以0.1ml/min的起始流速，每1－2分钟提高0.1ml的速度，将流速调整至0.4 – 0.5 mL/min，充分平衡系统；
（注：为了使系统充分平衡，建议提前一天冲洗和平衡系统；第二天开始试验（水相系统）。对于有机相体系，一般平衡时间在3 －12h）。
三试验操作及数据采集与处理
1 待系统充分平衡。逐步调整流速至试验流速；调节示差检测器的Purge阀处于处于“Purge Off”状态；待信号稳定后，归零（Zero）；粘度计（Visco Star）的操作方法见附件。待基线稳定。
2 在Astra软件中调用相应的试验模板（推荐使用安装工程师创建的
Template/Method）；点击Experiment- Run（此时，软件出现“waiting for……对话框”）；
（注：单针进样调用模板的基本操作如下：
File – New – Experiment from Template/Method – My Templates/methods；选择相应试验Tempalte/method。
自动进样器进样调用模板的基本操作如下：
File – New – sample t Template/blank quence – My Templates/method；选择相应试验Template/method。）
3 进样，并将进样阀由load转至inject状态。将已配制样品，通过进样系统进样。（注：样品必须使用0.22um或0.45膜过滤或离心处理。样品尽可能使用流动相配制）。
4 数据采集。一旦进样系统进样。Astra软件自动开始采集数据；当数据采集完毕；软件根据事先设定时间运行至停止。也可采用手动停止的方式：Experiment – Stop。
5 数据保存。待数据采集完毕。依次点击File – ；命名文件。
6 数据处理。其流程为：
Balines – peaks – dn/dc输入（且normali）–查看report。
注：（若该Template/Method中，已使用< 50kDa标准样品（例如BSA、dextran）在该体系下normalize，则不需要重复进行该操作）。
7 查看report。
四关机操作
1 关闭激光检测器、紫外检测器；调节示差检测器、粘度检测器purge阀处于“On”状态。充分冲洗系统；水相体系：使用流动相充分冲洗系统；待系统处于平衡状态；逐步降低流速至零；流动相更换为0.05%NaN3冲洗柱子至少50mL（一根柱子），然后摘下柱子，拧堵头，收起，备用；
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贴春联的时间2系统保存液：使用超纯水冲洗系统（一般3 –12h）。最后使用10 –50%甲醇或乙醇水溶液冲洗系统（不能冲洗GPC柱子）。
3 关闭所有仪器电源开关。
注意事项
1对于样品处理、溶解要严格按照要求
2 样品和溶剂都要严格过滤
设计岗位职责
3 示差结构特殊，不要忘记打开PURGE冲洗
4 替换溶剂要注意溶剂之间的互溶性。
5 泵流速升降一定要慢，否则会造成柱子的损坏。柱子为耗材，不再保修范围之内
6 做单机实验最好选择进口滤头，国产滤头易破，会造成管路堵塞。
