Agilent 1200(四元泵)高效液相色谱仪的标准操作规程
（美国安捷伦公司）
一、 准备工作
1． 更换纯净水，冲洗色谱柱的纯净水需每天更换，以免长菌。各溶剂瓶需明确标明瓶内所装液体。
2． 打开液相色谱仪柱温箱，按照色谱柱上标示的方向，连接试验所需色谱柱，连接色谱柱时切勿装反。十二生肖时间
3． 依次打开色谱仪各模块电源，待各模块自检完成后，双击“HPLC联机” 图标，化学工作站自动与1200 LC通讯，进入工作站。
4． 将要使用的各通道上的滤头放入已经0.45um滤膜过滤、脱气（约10分钟）的水相或流动相中，点击“Methood and Run Control”界面中的“启动”图标，操作界面被激活，由灰色变为绿色；同时调出检测样品所需的方法。
5． 打开Purge阀，点击泵图标，在Setup pump选项中设置流速和比例来排气泡。若使用A、B两通道，则应分别以5ml/min的流速、100%中学生作文大全的比例各排液5min。（脱气机的内腔体积一般为12ml，故排液时间要长，以便能保证各通道管路中充满检测样品所需的水相和有机相）purge结束后，将泵的流速调为0，旋紧purge阀（切勿在5ml/min流速时旋紧purge阀）。将流速设为1ml/min，以10%的甲醇水（或乙腈水），冲洗色谱柱30min。
6． 点击泵的图标，改变所需通道（已purge完）的比例，已达到检测样品所需的流动相条件，平衡色谱柱。同时按各溶剂瓶中液体的真实体积，设定溶剂瓶体积。
二、 数据采集
1． 点击左上角样品瓶图标，选择样品信息，更改文件保存路径、样品名称、样品位置等信息按要求填写，确认无误后点击确定。
2． 点击自动进样器图标，选择设置进样器，设定进样体积。选择进样方式，一般选择洗针进样方式，洗针瓶位置一般设为样品托盘的第91位，洗针液体一般为50%的甲醇水溶液。
3． 点击检测器图标，更改自己所需的检测波长，参比波长（如无需参比波长请关闭），打开紫外灯。如为DAD检测器时，光谱信息储存请选择全部，以便为图谱处理时提供所需依据。
4． 待基线平稳，点击平衡使基线回零，仪器显示Ready后，点击进样开始按钮，自动进样器吸入样品溶液打入色谱仪。
三、 数据分析天天向上打一成语
1． 点击H“PLC脱机”图标中进入脱机工作站，在左下方选择数据分析。点击左上角文件菜单栏，从菜单中选择调用信号，选中您的数据文件名，点击确定。
2． 谱图优化：从图形菜单中选择信号选项，从范围中选择满量程或自定义量程及合适的显示时间，在量程中选择各自满量程或者全部使用相同量程，进行调整，反复进行，直到图的比例合适为止。点击确定。
3． 积分：从积分菜单中选择积分事件选项，选择合适的斜率、峰宽、最小峰面积、最小峰高。从积分菜单中选择积分选项，则数据初积分。如积分结果不理想，则修改相应的积
分参数直到满意为止；并将积分参数记录在记录本中，以备日后查询方便。积分时如有空白系统峰请扣掉空白系统峰。
4． 打印报告：从报告菜单中选择设定报告选项，进入画面。在定量结果框中定量选择“百分比”，基于选择“峰面积”，排列方式选择“信号”；根据需要在报告格式里选择自己需要的报告模版；在输出报告框中勾选“屏幕”，“文件”文件类型中勾选“PDF”，点击打印报告。则打印生成PDF格式的电子版报告。若勾选打印机，点击打印机图标，则直接输出到打印机，打印成文件。
试验员四、 关机：
1. 试验结束后，先关闭紫外灯，当流动相中有缓冲盐时，需用10%的甲醇水（或乙腈水）冲洗系统40min，然后用100%甲醇（或乙腈）冲洗背酸30min。
2. 冲洗系统结束后，点击“off”退出色谱工作站，系统会提示是否关闭泵，检测器，柱温箱等，点击确定。然后依次关闭泵、检测器和脱气机的电源开关；最后关闭电脑。
备注 : a.流动相水相为混合液体或者含有缓冲盐时必须经关于爱0.45um的滤膜过滤，脱气。水相
为纯净水时，不用过滤。单一色谱纯有机相时，不用过滤。
b.当仪器长时间不用时应将溶剂过滤头泡在稀硝酸中。
c.当打开Purge阀以5.0ml/min的流速purge时，压力>10bar时，应更换过滤白头。
种植药材 d.当某一管路长时间为水相时，可与有机相管路互换（时间一般以一周为宜），防止管路长时间使用水相，管路长菌。
e.在更换流动相或者等待样品的过程中切勿将流速长时间降到0，以免系统中有盐析出。
f.若样品对光照比较敏感时，则需点击自动进样器图标，选择照明开关，将自动进样器模块中的照明关闭。
g.反相和正相体系互换时，需先将保存好的反相色谱柱用两通换下，用甲醇以2ml/min的流速冲洗色谱系统约30min，再用异丙醇以2ml/min搞笑对白的流速清洗约30min，然后方可换上正相色谱柱和正相流动相体系。正相和反相体系互换时，清洗系统顺序相反。
