《细胞工程》 知识点总结
一、细胞工程（Cell Engineering）：在体外对生物的细胞进行生长与分化的调控、遗传重组与改良，使其生产出人类所需要的产品。包括：细胞培养、细胞融合、细胞器移植、核质移植、染色体移植、转基因等产品：生物的组织、器官、个体；抗体、多肽药物、蛋白质、酶； 天然药物、色素、香精；等
二、生物工程包括：发酵工程、酶工程、细胞工程、基因工程、蛋白质工程。
三、1996年Dolly羊的克隆是通过核移植技术，最后在体内生长、分化、发育而成的。
四、植物组织培养：在人工培养基上无菌培养整株植物或植物的器官、组织、细胞或原生质体。又称为无菌培养（aptic culture）、离体培养（in vitro culture）。
五、植物组织培养的类型：
1、植株培养（Plant Culture）：在容器（玻璃瓶、透明塑料瓶等）中无菌培养完整的植株。
vika
植株来源：由种子无菌萌发而来；通过植物器官、组织、细胞再生而来。在快速繁殖中，后期的成苗和壮苗阶段属于植株培养。（一般时间较短）
2、胚培养（Embryo Culture）：无菌培养植物的成熟胚或未成熟胚，使其形成正常的植株。
目的：促进胚的提早萌发，缩短育苗时间；
克服远源杂种胚的夭折，以获得新的育种材料；
在科学研究中，用胚培养所得到的幼苗作为其它试验的材料。
赵普 翻译3、器官培养（Organ Culture）：无菌培养植物的根、茎、叶、芽、花、果等器官，使其增殖或形成其它的组织或器官等。
4、组织培养（Tissue Culture）：指无菌培养植物各种组织（如分生组织、形成层、木质部、韧皮部、皮层、薄壁组织、胚乳等），或由外植体分化形成的愈伤组织（callus），使其增殖或者分化。 注：Callus（愈伤组织）：具有旺盛分裂能力，但没有组织和器官分化
的细胞群。
5、花药与花粉培养：无菌培养植物的花药（带花粉）或花粉，形成单倍体植株。
补充：有效的育种辅助手段：单倍体植株获得以后，通过染色体加倍，即得到可以稳定遗传的纯和二倍体，缩短植物育种年限。
6、细胞培养：（Cell Culture）：无菌培养植物的单细胞或小细胞团。
细胞培养可用于：植物克隆；
细胞系的诱变和变异体的筛选；
生产有用化合物（uful chemicals）。
7、原生质体培养（Protoplast Culture）：将无细胞壁的原生质体培养成愈伤组织或植株。（注：由于无细胞壁的障碍，原生质体是实现远源植物间大规模遗传物质重组的良好体系。）
六、植物组织培养简史
1838年：Schwann 和Schleiden在细胞学说基础上提出了细胞全能性（totipotency）假说：一个高等生物（动物和植物）身上所有的体细胞(somatic cells)均来自一个共同的细胞——合子(受精卵）；在适当的条件下，一个体细胞应能像合子一样具有发育成一个完整个体的能力。
细胞全能性假说是开展植物组织培养研究的理论基础；验证细胞全能性假说是开展植物组织培养研究的动力。
哈布兰特：植物组织培养研究第一人；1902年，德国植物学家Haberlandt根据Schwann和Schleiden创立的细胞学说提出了细胞全能型（totipotency）理论。
1934年，美国植物生理学家White由培养番茄根建立了第一个活跃生长的无性繁殖系。
1937年，White研配了综合培养基（White培养基），并发现了B族维生素和生长素。
1952年，Morel和Martin首次证实，通过茎尖分生组织离体培养，可以由已受病毒侵染的大丽花中获得无病毒植株。
1958-1959年，Reinert和Steward分别报道，在胡萝卜素愈伤组织培养中形成了体细胞胚，该实验第一次证明了植物细胞的全能性。
1962年，Murashige和Skook发表了著名的植物组织培养基——MS培养基。
1967年，Bourgin和Nitsh等通过花粉粒培养获得烟草单倍体植株。
七、植物组织培养技术的应用
1、植物科学研究的有效手段；
2、快速繁育植物的优良品种；
3、挽救和保存植物的优良品种，挽救濒危植物资源；
4、在植物性状改良上的应用
胚培养可克服远源杂交不孕的困难；
儿童科普知识花药（花粉）培养可大大缩短育种年限；
原生质体融合技术可克服有性杂交不亲和，创造远源杂种、甚至新的物种；
单细胞培养技术可用于突变体的筛选；
植物转基因技术为人们定向、快速改良植物性状、培育新品种提供了方便（但植物转基因必须依赖于植物组织培养技术<植物离体再生技术>）。
5、生产有用物质（uful chemicals）
八、植物组织培养技术的优点
1、不受气候、季节和地理位置的影响；
2、不受病虫害的影响；
3、植物生长发育过程容易调控，容易根据市场需求调节生产；
4、效率高、质量好。
九、植物组织培养的设施
1、试剂与设备
化学试剂（用于配制培养基）
groove无机试剂：硝酸钾、硝酸铵、硝酸钙、硫酸钾、硫酸镁、硫酸铵、硫酸铜、硫酸亚铁、磷酸氢二钾、氯化钙、硼酸、钼酸钠等。
有机试剂：维生素(B1、 B6、烟酸、生物素）、氨基酸、糖（碳源）、植物激素、凝固剂以及其它一些物质。
无菌设备
灭菌锅（autoclave）：最常用消毒的工具。
种类多：手提式（如常见的医用消毒锅，体积小）、立式（体积中等）和卧式（有中型和大型）之分；有自热式（带有加热装置）和外热式（无加热装置，需要从外部加热，如煤气、电炉、蒸气等）之分。使用什么样的灭菌锅，要根据植物组织培养的目的和规模而定。
超净工作台（laminar air-flow cabinet）：用于对植物材料进行无菌操作。
超净工作台=空气过滤器，空气经过1-2次粗滤后，最后通过孔径为0.2-0.4μm的滤网。是细胞工程中必不可少的一种设备。超净工作台可以分为双人和单人、单面和双面、水平风和垂直风等类型。
培养室（Culture room）
植物材料需要在一个可控温、控光、洁净的地方进行培养。如规模小，则有1-2个培养箱即可。
培养箱体积小，不占地方，控温、控光条件好，很适合于摸索植物材料的培养条件和科学研究。缺点是空间小、价格昂贵（7000-10000元/台）。
2、培养室所需要的设备
培养架:培养架的设计既要考虑充分利用培养室的空间，也要考虑取放材料方便；
加温/降温设备：空调；
光照和控光设备。分为光培养室和暗培养室除青春痘方法。光培养室常用日光灯照明，并安置控制光照时间的自动开关。
3、培养容器
玻璃容器：如试管、三角瓶、果酱瓶、罐头瓶、饮料瓶等。玻璃瓶耐高温消毒、透明（便于观察），且为惰性物质，对植物材料的生长影响小，是组培中用得最广的容器，但容易破碎。
透明塑料容器：轻巧，不易破碎，但不耐反复高温消毒，而且有些塑料容器在高温消毒时会释放一些有害的物质，影响材料的生长。
容器封口：良好的封口用品要求做到既可以防止污染和容器内水分的过分散失，又要做到透水、透气。棉塞、锡箔纸、耐高温的塑料纸（如培养食用菌的聚丙烯塑料袋）。其中以棉塞是最好。现在也有专用的封口膜和瓶塞。
4、其它仪器和设备
天平：需要1台万分之一的精密分析天平和百分比之一或十分之一的普通天平。
冰箱：用于储藏一些不宜在常温下较长时间放置的药品和试剂，如维生素、氨基酸、激素、微量元素等。
酸度计：植物的生长需要一定的pH值，因此需要对培养基的pH值进行测定、调节。酸度计测定pH值精度高，准确，但比较烦琐。如不是进行要求很高的培养（如单细胞培养、原生质体培养）或进行不同pH值对植物材料生长的影响，可以用pH试纸代替。
蒸馏水器或者去离子水生产装置
酒精灯
解剖刀和镊子
摇床
十、植物组织培养室的设计
植物组织培养工作按内容不同可以分为3个的过程：
1.培养基的准备:包括试剂的配制、容器的洗涤、培养基的制备与消毒等;
2. 植物材料的无菌操作;
新东方韩语>隐晦的意思3.植物材料的培养、观察与分析。
植物组织培养要求无菌，因此，在设计植物组织培养实验室时既要考虑各环节的衔接，又要避免不必要的交叉，特别是商业化组培苗生产，更要特别注意防止污染。最好是三部分工作相互独立。
十一、植物组织培养基
1、培养基的组成
培养基的重要性：
植物材料生长的营养来源；
葡萄用英语怎么说调节植物材料生长与分化的主要途径。
培养基的种类：
共同之处：含有植物生长发育所必须的souffle营养物质和生物活性物质；新年英语祝福语
不同之处：营养物质的浓度不同。
培养基的组分：
水：要求纯净。应用蒸馏水、去离子水、而不用自来水；
无机营养成分：大量元素：
大量元素：C, H, O, N, P, K, Ca, Mg, S；
微量元素：Fe, Cl, Cu, Mo, B, Zn, Mn；
不同培养基的无机盐（特别是大量元素）的浓度差异很大
有机营养：维生素和氨基酸的总成
常用：肌醇、烟酸、维生素B6、维生素B1和甘氨酸等；
其它的维生素：维生素M（叶酸）、维生素B2（核黄素）、泛酸钙等；
其它氨基酸：谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺等；
