断面染色试验显微分析
苏珊娜·布拉奇(Susanna Bracci)
1.分类
belline断面染色试验显微分析(cross-ction microanalysis using staining tests)是一种样品断面处置技术,是采用可改变样品颜色的物质或可导致样品发生荧光反应的物质对样品进行染色。原始样品在染色后会发生永久性的改变,因此这是一种侵入式技术。
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2.说明
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海贼王主题曲下载将断面样品置于光学显微镜下,在可见光反射模式下,通过调整物镜以不同的放大倍数进行观察。再使用一组滤光片(通常装在方形滤光片固定架中),将光源从可见光(VIS)切换为紫外线(UV),即可令选定波长激发的材料高亮显示,并对其进行定位。
滤光片通常为三件套:①激发滤光片,把激发光限定到可激发样品中特定标记物的波长;②发光滤光片,只允许荧光团发射的光中指定波长的部分通过,用于控制图像质量;③二向色镜,可反射激发波段的光,并允许发射波段的光通过。
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在染色试验中,要向断面内加入一种物质。当它与特定材料发生反应后,可以观察到颜色变化或荧光反应。前一种情况,可比较染色前后的可见光图像,观察颜色变化来获取信息。这种染色法一般用于无机材料(颜料粉)。在加入荧光基团的情况下,则观察荧光反应来
获取信息。这种情况下必须根据所用的荧光基团为显微镜选配适当的滤光片。
3.应用
改变物质颜色的化学染色法主要用于无机材料(即颜料粉)。这种情况下,会引发一种特殊的化学反应,导致生成一种颜色不同的新化合物。例如,在用乙酸和碘化钾溶液处置含铅基颜料粉(铅白或铅丹)的颜料层时,会形成新的亮黄色化合物碘化铅(PbI2 ),从而改变含铅颜料层的颜色。化学染色也可用于定位有机物质,可利用染色结果辨识物质的化学类别:蛋白质、脂类或碳水化合物。而对于蛋白质鉴定,现在已经开发出了更专门的,基于免疫荧光法(immunofluorescence,IMF)或化学发光法(chemiluminescence,CL)的检测技术。IMF是基于抗原(样本中的蛋白质)与抗体间特异反应的方法。如果用荧光基团标记抗体,抗体与抗原反应后,就可以在含有抗原的材料部位观察到荧光反应。
4.局限性
这种技术的主要局限性在于受检材料可能已发生降解或含有污染物。另外,受检材料也有可能发生非特异性反应(即试剂可能被非特异性吸收)。IMF和CL是高选择性的检测方法,这可能是它们的优点(可检测特定蛋白质),但在靶标完全未知的情况下也有可能成为缺点,因为抗体的选择可能是误导性的[例如,不同来源的蛋白(如鸡或鸭)就需要用不同的抗体来区分]。
5.补充技术
显微傅里叶变换红外光谱法、显微拉曼光谱法、扫描电镜与能量色散光谱联用法,以及气相色谱-质谱法。
6.技术规范与注意事项
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—断面样品制备
中英文翻译机—使用的材料
—放大倍率
—用于观察荧光的滤光片
—染色程序说明(物质、溶液浓度、接触时间等)
7.技术简史
见紫外/可见光断面显微镜法。
8.文献gravity
包含此项技术研究成果的科研论著范围甚广,因此下面仅列出与此技术在文化遗产领域应用相关的一般性著作:
[1] Sciutto G., L.S.Dolci, M.Guardigli, M.Zangheri,
S.Prati, R.Mazzeo, A.Roda, ‘Single and MultiplexedImmunoassays for the Chemiluminescent Imaging Detection of Animal Glues in Historical Paint Cross- ctions’,Analytical and Bioanalytical Chemistry, 405 (2-3),
pp.933-940.(2013)
[2] Palmieri M., M.Vagnini, L.Pitzurra, B.G.Brunetti, L.Cartechini, ‘Identification of Animal Glue and Hen-eggYolk in Paintings by u of Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA)’, Analytical and Bioanalytical Chemistry,405 (19), pp 6365-6371.(2013)
[3] Sandu I., S.Schafer, D.Magrini, S.Bracci, C.A Roque, ‘Cross-ction and Staining-Bad Techniques forInvestigating Organic Materials in Painted and Polychrome Works of Art: A Review’, Microscopy and Micraanalyzes,18 (4), pp.860-875.(2012)
[4] Sciutto G., L.S.Dolci, A.Buragina, S.Prati,
M.Guardigli, R.Mazzeo, A.Roda, ‘Development of a MultiplexedChemiluminescent Immunochemical Imaging Technique for the Simultaneous Localization of Different Proteins inPainting Micro Cross-ctions’, Analytical and Bioanalytical Chemistry 399, pp.2889-2897.(2011)
[5] Cartechini L., M.Vagnini, M.Palmieri, L.Pitzurra, T.Mello, J.Mazurek, G.Chiari, ‘Immunodetection of Proteinsin Ancient Paint Media’,, Accounts of Chemical Rearch 43 (6), pp.867-876.(2010)
[6] Brunetti B., L.Cartechini, R.Mazzeo, S.Prati,
G.Sciutto, A.Sgamellotti, E.Vagnini, ‘Immunological Tests:Immunofluorescence (IMF) and Chemiluminescence (CL) Microscopes’ (Eds.Daniela Pinna, Monica Galeotti, RoccoMazzeo), Scientific Examination for the Investigation of Paintings, pp.168-172.(2009)
装修学校哪家好[7] Mazzeo R., ‘Spot and Staining Tests’, (Eds.Daniela Pinna, Monica Galeotti, Rocco Mazzeo) Scie
ntificExamination for the Investigation of Paintings, pp.193-196.(2009)
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[8] Vagnini M., L.Pitzurra, L.Cartechini, C.Miliani,
B.G.Brunetti, A.Sgamellotti, ‘Identification of Proteins inPainting Cross-ctions by Immunofluorescence Microscopy’, Analytical and Bioanalytical Chemistry, 392
(1-2),pp.57-64.(2008)
[9] Heginbotham A, V.Millay, M.Quick, ‘The U of Immunofluorescence Microscopy and Enzyme-LinkedImmunosorbent Assay as Complementary Techniques for Protein Identification in Artists’ Materials’, Journal ofthe American Institute for Conrvation, 45 (2), pp.89-105.(2006)
[10] Messinger, J.M., ‘Ultraviolet-fluorescence Microscopy of Paint Cross-ctions’, Journal of the