促进成骨细胞增殖的中药研究进展
[摘要］ 骨质疏松是常见的代谢性骨病, 随社会发展渐成为威胁中老年人和绝经后妇女健康的一种严重疾病，骨质疏松症与成骨细胞和破骨细胞的功能失偶联有关，因此,促进成骨细胞的数量增加和功能提高必将有利于骨的形成。然而西药毒副作用大，治疗不彻底,加快中药治疗骨质疏松研究显得日益重要.近年来，随着中医药研究的不断深入,运用中药诱导成骨细胞增殖的成果获得了肯定,不少学者在细胞分子水平的药理作用方面开展实验研究，为中医治疗骨质疏松提供了分子生物学理论.
razorfish［关键词］ 中药；成骨细胞；增殖；骨质疏松
Rearch progress on the proliferation of osteoblasts of traditional Chine medicine's promotion
[Abstract] Osteoporosis is a common bone dia,prent in the elderly and menopau women。Osteoporosis is related to the loss of osteoblast function，and,osteoblasts is an important function of cells of the bone。It is in favor of bone’s formation by promoting into t
he continuous proliferation of bone cells,differentiation,cell extracellular matrix synthesis and calcium absorption。As for the toxic side effects of Western medicine，inadequate treatment and high price，so,it is necessary to actively studied traditional Chine medicine treatment of osteoporosis.
[Key words］ traditional Chine medicine ; osteoblasts; proliferation； osteoporosis
中药促进成骨细胞增殖的研究主要是从诱导体外培养的成骨细胞增殖着手，按照中药临床单方和复方的用药习惯分别具体的实验，中药中的有效成分,可刺激细胞外基质成分的合成，从而加快细胞外基质重建的速度,促进细胞黏附增殖，其中补肾活血化瘀中药可以提高成骨细胞的增殖率、增加ALP活性，因而促进成骨细胞骨形成功能,研究的也相对比较透彻。另外还从控制成骨细胞的分子生物学机制调控作用的反面研究热忱,具体从细胞基因、细胞信号通路、细胞因子、生长因子、雌激素样作用和对OPG/RANK/RANKL等方面的调控作用研究，保证了骨组织工程学持续深入研究,利于弄明白中药在细胞分子层面上药物具体的作用机制.
1中药血清促进成骨细胞增殖研究
go to go中药血清药理学是指给动物灌胃或人服用一定量的中药单方或复方制剂,一定时间后采集血液，分离血清，用此血清进行体外实验的一种实验方法[1］中药血清药理学方法客观地模拟了药物与机体相互作用过程,使实验结果的可信度大大提高。
1.1在中药单方药物研究方面
1.1.1补肾中药对成骨细胞增殖影响
汪建龙［2]通过实验研究枸杞多糖,发现含枸杞多糖的血清再MC3T3—E1成骨细胞的增殖成熟早期、中期、晚期均具有促进作用。李银清等［3］用醇提法提取鹿茸胶原,将鹿茸胶原作用于大鼠成骨细胞，得出鹿茸胶原具有促进大鼠成骨细胞贴壁和增殖的作用。李楠等［4]取24 h内新生SD大鼠头盖骨成骨细胞,用巴戟天多糖及巴戟天水提物药物血清进行体外培养，72h后提取成骨细胞总RNA进行RT—PCR检测核心结合因子almRNA相对表达量，发现巴戟天水提物组与巴戟天多糖组核心结合因子almRNA与对照组相比具有非常显著差异，且巴戟天多糖组非常显著优于巴戟天水提物组。表明巴戟天多糖是巴戟天提高成骨细胞活性的有效成分之一。王威等barely[5]取雄性与雌性Wismr大鼠各12只，按性别随机分为雄性
给药组、雌性给药组、雄性对照组、雌性对照组，每组6只。给药组给予续断水提液灌胃，对照组给予等量生理盐水，灌胃l周后取血，将各组大鼠血清稀释为2.5％、5%和10%，3个浓度分别培养大鼠成骨细胞，采用MrI.11法检测细胞增殖能力。研究发现三种浓度的大鼠的续断含药血清均有刺激成骨细胞增殖的作用,且这种作用在雌性大鼠的血清中表达强于雄性大鼠.
1。1。2活血中药对成骨细胞增殖的影响
活血的药物能改善骨的血流状态，从而是骨的营养增多，物质代谢增强，加速骨基质的合成及骨的矿化活动增强，促进骨细胞的增殖［6］。成骨细胞的数量依靠成骨细胞的分化增殖来决定,大多数研究发现活血中药都有促进成骨细胞增殖的作用。张宁等goole[7］观察发现含药血清组成骨细胞增殖率显著增强，且存在剂量依赖关系,随培养期延长，促进作用持续存在.段冠清等[8］将1日龄SD大鼠分离原代成骨细胞培养后传代，将细胞分为3组,分别进行骨碎补总黄酮含药血清、丙酸睾酮、空白血清进行干预，用RT—PCR法测定成骨细胞雄激素受体（AR)mRNA表达的结果。结果显示,雄激素干预组及骨碎补干预组的ARmRNA表达率差异无统计学意义，得出骨碎补总黄酮可促进ARmRNA表达,可能与其拟雄激素效应有
关，从而可抑制骨吸收和促进骨增殖形成，最终达到治疗雄激素水平下降所致骨质疏松症的目的。张荣华等[9]发现，用活血液的成骨细胞增殖率与药物浓度成剂量依赖关系.范焕琼等［10］从中药丹参中分离出水溶性成分丹酚酸B，用其作用于体外培养的成骨细胞，研究发现丹酚酸B浓度在5×10—8～5×10—6mol·L-1，可刺激成骨细胞分泌ALP，浓度在5×10—7～5×10-6mol·L—1可明显刺激成骨细胞分泌骨钙素，浓度在10—7moltax day·L-1forrest gump时可明显增加成骨细胞骨结节总面积。中药牛膝为治疗骨质疏松方剂中出现频率较高的药物，有学者[11］对牛膝醇提醇物的乙酸乙酯萃取物进行提取、分离、纯化，发现脱皮甾酮是牛膝中促成骨样细胞增殖的活性成分之一.卢建华等［12]通过红曲含药血清诱导体外培养的骨髓基质细胞向成骨细胞分化，表明了含红曲血清可以呈剂量依赖性地促进骨髓基质细胞向成骨细胞分化、增殖。saipan
1.1。3补气中药对成骨细胞增殖影响
郭海玲等［13]驯观察黄芪注射液对体外培养的新生大鼠颅盖骨成骨细胞增殖及分泌I型胶原能力的影响。结果显示，与对照组比较,各体积分数的黄芪注射液均能促进成骨细胞的增殖，其中含体积分数15%和10%的黄芪注射液培养的成骨细胞I型胶原的表达量明显高于对
照组。得出黄芪可以促进体外培养的成骨细胞增殖和分泌I型胶原的能力,但具有一定的量效趋势。
1.2在中药复方药物研究方面
1。2.1传统补肾方剂对成骨细胞增殖的影响
鞠大宏等公费研究生［14］通过观察左归丸含药血清对成骨细胞骨保护素(OPG)、核因子kB受体激活因子配体(RANKL）mRNA表达的影响,探讨其治疗骨质疏松症的作用机制。得出在大鼠去势状态下，左归丸含药血清一方面直接抑制RANKL的分泌，使破骨细胞活性降低；另一方面促进成骨细胞分泌OPG，使之与RANKL的结合增多，使破骨细胞活性降低,从而达到治疗骨质疏松的目的结论。孙晖等［15]将六味地黄丸主要血中移行成分以适当浓度添加到大鼠成骨细胞培养液中,用MTT法测定细胞的增殖速度,结果表明，六味地黄丸主要血中移行成分莫诺苷、獐牙菜苷、马钱子苷的混合物各剂量组均明显表现出对大鼠成骨细胞的促增殖作用，初步确定六味地黄丸主要血中移行成分莫诺苷、獐牙菜苷、马钱子苷是其治疗骨质疏松的药效物质基础。
1。2.2 新研发方剂对成骨细胞增殖的影响
新苗等[16］刮分别用益骨汤(由补骨脂、骨碎补、生地黄、仙灵脾、怀山药、丹参等组成)高、中、低剂量组，A—D3对照组，及生理盐水空白对照组,制备动物含药血清对SD大鼠成骨细胞进行体外培养，发现前4组比较无显著性差异，与空白对照组比较细胞增殖分化与ALP影响具有显著差异。赵可伟等[17]用中药骨康颗粒（由补骨脂、炙淫羊藿、肉苁蓉、熟地黄、白芍、黄芪、菟丝子、丹参、当归、大枣组成)含药学清对成骨细胞进行体外培养,用酶联免疫检测培养上清液中胰岛素样生长因子I的含量,得出骨康用药达到一定程度时，在促进成骨细胞生成胰岛素生长因子I方面的能力与雌二醇一致，从一个方面说明骨康颗粒可以作为雌激素的替代品治疗骨质疏松.
1.3健脾中药对成骨细胞增殖影响
依据《黄帝内经》“谷人气满，淖泽注于骨”的理论，从补脾人手，通过补脾促进吸收功能以加强骨对钙的吸收,并通过脾的运化使钙沉积于骨。邹本贵等[18］用参归促钙灵灌胃大鼠,实验发现参归促钙灵联合葡萄糖酸钙、雌激素联合葡萄 糖酸钙能显著增加VV、SV，降
比利 克里斯托
低VV—0S、SV-OS,表明参归促钙灵联合葡萄糖酸钙、雌激素联合葡萄糖酸钙阻止去势鼠的骨丢失是通过增加VV，减少骨小梁间隙，增加骨量，使骨的矿化功能趋于正常来实现的。参归促钙灵组、雌激素组与模型组比较，OBI明显增加，说明成骨活跃，加之OCI明显降低，说明参归促钙灵联合葡萄糖酸钙、雌激素联合葡萄糖酸钙 既能抑制骨吸收，又能刺激成骨细胞产生更多的骨基质，使骨代谢转为正平衡，使丢失的骨量得到一定程度的恢复，从而增加成骨细胞的增殖率.
