细菌总RNA快速抽提试剂盒
产品编号：SK8625/SK8626
包装规格：50次/100次
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试剂盒组成
组分 SK8625，50次 SK8626，100次
Buffer Rlysis-B 50 ml 100 ml
DEPC-treated ddH2O 30 ml 60 ml
操作手册1份1份
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保存方法及注意事项
试剂盒于常温运输，4°C保存。有效期见包装。
产品介绍
本试剂盒是生工生物工程（上海）有限公司最新研制成功的一种细菌总RNA快速抽提试剂盒。因为细菌RNA半衰期很短，RNA很容易发生降解。针对这一难题，本试剂盒采用溶菌酶与裂解液Buffer Rlysis-B共同作用，快速裂解样品，再通过氯仿抽提、无水乙醇沉淀等步骤，可获得浓度高、完整性好的RNA。适合于从各种来源的细菌（革兰氏阳性或阴性菌等）培养液中快速提取RNA。
使用本试剂盒，从1 ml对数生长期的细菌菌液中提取5~15 µg总RNA，可直接用于RT-PCR、Northern Blot、斑点杂交等实验。
本产品具有以下特点：
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1. 操作简单，全过程可在40分钟内完成。
2. 完整性好，纯化的RNA几乎不会发生降解。
3. 纯度高，OD260/280一般为2.0。
试剂准备
自备试剂：无水乙醇、75%乙醇、溶菌酶、氯仿等。
标准抽提步骤
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4. 取1 ml对数生长期的细菌，8,000 rpm 4°C离心1 min，彻底弃掉培养基，加100 µl溶菌酶，振荡混匀。（G-菌使用的溶
菌酶浓度为400 µg/ml，室温酶解3~5分钟；G+菌使用的溶菌酶浓度为3 mg/ml，室温酶解5~10分钟。）
random org✓收集菌体后可用500 µl DEPC-treated ddH2O漂洗一次，10,000 rpm离心1分钟，弃上清，进一步去除残留的培养基。
5. 立即加入900 µl Buffer Rlysis-B震荡混匀，室温放置3 min。
6. 向裂解样品中加入200 µl 氯仿，充分混匀。12,000 rpm 4°C离心5 min，取上清。
7. 向上清液中加入1/3 体积无水乙醇，混匀，室温放置3 min，12,000 rpm 4°C离心5 min，小心倒掉上清。
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✓离心后，在离心管底部，可能无肉眼可见的沉淀产生，属正常现象，请继续以下操作。
8. 用700 µl的75%乙醇（请用DEPC-treated ddH2O配制）洗涤沉淀，12,000 rpm 4°C离心3 min, 小心倒掉上清。
财务岗位竞聘演讲稿范文9. 重复步骤5一次。
10. 室温倒置10 min，尽可能使离心管中残留的乙醇彻底挥发。加入30-50 µl的DEPC-treated ddH2O溶解沉淀，立即使用或
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美国联邦法规-70°C长期保存。
headphones✓如果残留的乙醇有挂壁现象，倒掉液体后再短暂离心，将残液用移液器吸出。然后开盖室温放置5~10分钟至残留的乙
醇完全挥发。
吸取残液时注意不要将RNA沉淀取出，避免RNA损失。
