广东药科大学学报
Journal of Guangdong Pharmaceutical University
Mar.2021,37(2)
收稿日期:2020⁃11⁃20
基金项目:国家大学生创新训练项目(201810573016);广东药科大学大学生“专创融合”项目(19zcrh01)作者简介:王慧婷(1998-),中药学院2016级中药制药本科生,Email:159****************
通信作者:时军(1980-),男,博士,副教授,主要从事中药新剂型及制剂新技术研究,电话:020⁃39352169,Email:shijun8008@
< 。
丹参酮ⅡA 固体分散体的制备、表征及溶出特性
王慧婷1,赵必鑫1,詹燕珊1,郭思旖1,何杰滢1,时军1,2
(1.广东药科大学中药学院,广东广州510006;2.广东省局部精准递药制剂工程技术研究中心,广东广
州510006)
摘要:目的探讨丹参酮ⅡA (TSA )固体分散体制备、表征和体外溶出情况,分析其体外溶出特性。方法利用固体分散技术制备丹参酮ⅡA⁃PVP 固体分散体(TSA⁃PVP SD ),建立TSA 的HPLC 质量分数测定方法,采用显微观察、溶解度实验及体外溶出度测定对TSA⁃PVP SD 进行物相鉴别,采用X 射线粉末衍射(XRD )、差示扫描量热(DSC )及红外光谱研究(FTIR )进行结构鉴定。结果TSA⁃PVP SD 能显著增强TSA 溶解性能及体外溶出度,80min 体外累积溶出率即达到90%以上;物相鉴别结果显示TSA 以非结晶状态均匀分散于PVP 载体中形成固体分散体。结论TSA⁃PVP SD 具有较好的溶出度,溶出适应性较高,为丹参酮ⅡA 制剂研究提供了参考。关键词:丹参酮ⅡA ;固体分散体;溶出度;溶解度中图分类号:R944.9
文献标识码:A
文章编号:2096⁃3653(2021)02⁃0007⁃04
DOI:10.ki.2096⁃3653.2020112002
Preparation,characterization and dissolution characteristics of tanshinone ⅡA solid dispersion
WANG Huiting 1,ZHAO Bixin 1,ZHAN Yanshan 1,GUO Siyi 1,HE Jieying 1,SHI Jun 1,2*海上钢琴师英文台词
(1.School of Traditional Chine Medicine,Guangdong Pharmaceutical University,Guangzhou 510006,China;2.Guangdong
influencedEngineering &Technology Rearch Center of Preci Drug Delivery System,Guangzhou 510006,China )
*
Corresponding author Email:******************。
Abstract:Objective To investigate the preparation and characterization of tanshinone ⅡA (TSN)and its dissolution in vitro ,and to analyze its dissolution characteristics.Methods The solid dispersion technology was ud to prepare tanshinone ⅡA⁃PVP solid dispersion (TSA⁃PVP SD).A method for determination of TSA by high⁃performance liquid chromatography (HPLC)was established.The pha of TSA⁃PVP SD was identified by microscopic obrvation,solubility test and dissolution test in vitro .The structure of TSA⁃PVP SD was identified by X⁃ray powder diffraction (XRD),differential scanning calorimetry (DSC)and infrared spectroscopy (FTIR).Results TSA⁃PVP SD could significantly enhance the solubility and dissolution of TSA in vitro ,and the cumulative dissolution rate in vitro was more than 90%after 80min.The results of pha identification showed that TSA was unif
ormly disperd in PVP carrier in an amorphous state to form solid dispersion.Conclusion Tanshinone ⅡA solid dispersion has good dissolution,higher dissolution adaptability,and it significantly improves the bioavailability,which provides an
effective experimental reference for the study of tanshinone ⅡA preparation.Key words:tanshinone ⅡA;solid dispersion;dissolution;solubility
固体分散是改善难溶性药物溶解度策略之一,药物以分子形态、无定形态或微晶分散于载体材料中,药物分子增加表面自由能,药物粒子分散度
高[1⁃2]。制成固体分散体可减小粒径,改善润湿性,增大孔隙率,减少结块,改善药物的物理状态,显著提高药物溶出度,改善药物的生物利用度[3⁃4]。溶剂
广东药科大学学报第37卷
法是固体分散体制备的常用方法,制备工艺简单,可连续化操作,生产效率高,可实现工业化生产。
丹参是临床常用的活血化瘀中药,具有扩张血管、加快血流、改善微循环、改变血液黏滞性、增加心肌供血量的功效。丹参酮ⅡA(TSA)是丹参的主要有效成分之一,含有醌型结构,易被氧化,参与机体的多种生化反应而具有抗自由基过氧化、抑制人瘢痕成纤维细胞增殖及胶原生成、改善微循环障碍
等多种生理活性,可有效抑制肝、肺、肾、腹膜等纤维化[5⁃6]。TSA脂溶性强,在水中的平衡溶解度仅为
8.10mg/L,采用直接口服给药途径则吸收效率较低,影响药效作用的发挥[7]。本研究应用溶剂法将TSA与聚乙烯吡咯烷酮(PVP)制备为丹参酮ⅡA⁃PVP固体分散体(TSA⁃PVP SD),考察其体外溶解度、溶出特性并进行物相鉴别。
1仪器与材料
Xpert Pro MPD X⁃射线衍射仪(荷兰帕纳科公司);DZF⁃6050真空干燥箱(上海博迅实业有限公司);Milli⁃Q纯水机(美国Millipore公司);SHB⁃3循环水多用真空泵(河南太康教材仪器厂);DSC200F3差示扫描量热仪(德国耐驰仪器制造有限公司);Nicolet Nexus410傅里叶红外光谱仪(赛默飞世尔科技公司);GENEX10~1000μL单道可调节移液器(上海宝予德科学仪器有限公司)。
丹参酮ⅡA原料药(上海源叶生物科技有限公司,批号Y14M10C82864,质量分数≥95%);丹参酮ⅡA对照品(上海源叶生物科技有限公司,批号Y27M19C37812,质量分数≥99%);PVP K30(FLUKA 公司,批号12162⁃100G);色谱甲醇(Merck KGa公司,批号1847607636)。
2方法与结果
2.1TSN⁃PVP SD的制备
精密称取一定质量比的TSA与PVP K30,混合均匀,充分溶解于无水乙醇中,减压回收乙醇,至黏稠状后转移至50℃真空干燥箱内,干燥4h后取出粉碎,过120目筛,即得红色粉末状丹参酮ⅡA⁃PVP 固体分散体(TSA⁃PVP SD)。
2.2TSA的含量测定方法[8]
色谱条件:色谱柱为Cosmosil C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇⁃水(体积比80∶20);流速为1.0mL/min;检测波长为270nm;柱温为30℃;进样量为10μL。在上述条件下进样检测,以TSA峰面积对质量浓度(μg/mL)进行线性回归,得标准曲线A=0.9844C+0.8449,R²=0.9994,表明TSA 质量浓度在1.875~30μg/mL范围内与峰面积的线性关系良好,日内与日间RSD值均小于2%,平均加样回收率为(99.94±1.36)%。
2.3TSA⁃PVP SD的溶解性能
2.3.1溶解度实验分别取TSA、TSA⁃PVP物理混合物(质量比1∶1)及质量比分别为1∶1、1∶2、1∶4、1∶6、1∶8的TSA⁃PVP SD置于20mL(25±1)℃蒸馏水中,150r/min磁力搅拌24h,静置后置离心机内2000r/min 离心3min,过0.22μm滤膜后测定TSA饱和溶解度,结果如图1所示。可见,TSA
原料药完全不溶于水,PVP的加入可明显提高其溶解度,同时TSA⁃PVP SD相较于TSA⁃PVP物理混合物溶解性能更优,且随着TSA⁃PVP SD中PVP比例的增大,其溶解度也逐步增大。
2.3.2体外溶出度测定照《中国药典》2020年版四部通则0931“溶出度与释放度测定法”中桨法测定[9]。溶出介质:0.5%SDS溶液900mL,转速100r/min,水浴温度(37±0.5)℃,投入TSA⁃PVP物理混合物及各比例TSA⁃PVP SD(相当于TSA5mg),样品接触溶出介质后每隔10min取样5mL至240min,过0.22μm 滤膜,同时补足等量溶出介质,照“2.2”项方法测定TSA的含量并计算累积溶出百分率,结果见图2。可见,TSA⁃PVP SD在溶出介质中的溶出度大于物理混合物,且随PVP比例的提高而增大,其中质量比为1∶8的TSA⁃PVP SD的溶出速度最快,80min累积溶出率即达到90%以上。
2.4TSA⁃PVP SD物相鉴别
2.4.1显微观察分别取适量TSA、PVP K30、TSA⁃PVP物理混合物(质量比1∶8,等量递增法混合图1不同质量比的TSA⁃PVP SD的药物饱和溶解度Figure1Saturated solubility of TSA⁃PVP SD in different pro⁃portions
yinghan
饱
和
protection溶
解
度
/
(
μ
g
·
m
L
-
翻跟斗亲亲1
)
T S N
物理
混合
物1∶11∶21∶41∶61∶8
10
8
6
4
2
8
winnie the pooh第2期
王慧婷,等.丹参酮ⅡA 固体分散体的制备、表征及溶出特性
均匀后过120目筛)及TSA⁃PVP SD (质量比1∶8,后续物相鉴别亦采用此比例的固体分散体)于载玻片上,滴加适量石蜡使样品粉末分散均匀并小心盖上盖玻片,光学显微镜下观察各组样品物理形态,结果见图3。可见,TSA 呈不规则长条状的红色结晶样;PVP K30为类球形微粒;TSA⁃PVP 物理混合物中可分别清晰观察到TSA 晶体与PVP 微粒,二者互无影响;TSA⁃PVP SD 呈不规则红色块状微粒,呈无定型态,未见明显TSA 晶体结构,表明TSA 已以非结晶状态均
匀分散于PVP 载体中,形成固体分散体。
2.4.2X 射线粉末衍射(XRD )测量条件:Cu Kα靶石墨单色器衍射束单色比,高压40kV ,电流100mA ,扫描范围设定为5~70°,扫描速度限制为6.5
(°)/min ,分别对TSA 、PVP K30、TSA⁃PVP 物理混合物及TSA⁃PVP SD 进行分析,扫描结果见图4。可
见,TSA 的多个结晶特征衍射峰集中位于5~30°;PVP K30为非结晶化合物,无明显衍射峰;物理混合物中存在TSA 结晶衍射峰,表明TSA 仍以结晶状态
存在其中;TSA⁃PVP SD 的衍射图中绝大部分TSA 的特征衍射峰部分或全部消失,说明TSA 以非结晶状态分散于载体PVP K30中。
2.4.3差示扫描量热(DSC )以空白铝坩埚为参比物,N 2为保护气,流速设定为20mL/min ,扫描范围设定为0~300℃,升温速度控制在10℃/min ,采用DSC 分别对TSA 、PVP K30、TSA⁃PVP 物理混合物及TSA⁃PVP SD 进行分析,扫描结果见图5。可见,TSA
在214.2℃有一吸热峰;PVP K30在254.9℃有一吸收峰;物理混合物同时具有TSA 及PVP K30特征吸热峰,说明其内两种成分仅为简单混合,并未发生晶型改变;与物理混合物相比,TSA⁃PVP SD 中不存在TSA 特征峰,表明TSA 由晶态转变为无定型状态,高度均匀分散于载体PVP K30中。
2.4.4红外光谱研究(FTIR )采用溴化钾(KBr )压片法制备样品,扫描范围设定为300~4000cm -1,分别对TSA 、PVP K30、TSA⁃PVP 物理混合物及TSA⁃PVP SD 进行分析,结果见图6。可见,TSA 在1644cm -1处有一羰基吸收峰,而在TSA⁃PVP SD 该
吸收峰左移至1637cm -1,推测为TSA 中羰基与PVP K30形成了氢键所致;物理混合物红外光谱为TSA
图2不同药物载体比例对TSA⁃PVP SD 中丹参酮ⅡA 溶出
度的影响
Figure 2Effect of different drug carrier ratio on dissolution of
TSA⁃PVP SD
100806040200累积溶出率/%
40
80
120160
200240
物理混合物TSA⁃PVP SD (1∶2)TSA⁃PVP SD (1∶6)
TSA⁃PVP SD (1∶1)
TSA⁃PVP SD (1∶4)TSA⁃PVP SD (1∶8)
t
/min
图3TSA⁃PVP SD 与物理混合物的显微观察图
Figure 3Micrographs of TSA⁃PVP SD and physical mixture
(×100)
A.TSA ;
B.P VP K30;
C.物理混合物;
D.TSA⁃PVP SD 。2520151050×103
10
20
3040
50
60
70
A B C D 强度
2θ/(°)
图4TSA⁃PVP SD 与物理混合物的XRD 图
Figure 4XRD patterns of TSA⁃PVP SD and physical mixture
A.TSA ;
B.PVP K30;
C.物理混合物;
D.TSA⁃PVP SD 。A B
C D 6420
-蓝莓的英文
2
50noi的形容词
100
150
200
250
300
ϕ/m W
T /℃
图5TSA⁃PVP SD 与物理混合物的DSC 图
Figure 5DSC curves of TSA⁃PVP SD and physical mixture
A.TSA ;
B.PVP K30;
C.物理混合物;
D.TSA⁃PVP SD 。9
广东药科大学学报
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与PVP K30的简单叠加,且PVP K30掩盖了TSA 的
部分官能团峰,部分TSA 特征峰强度减弱。
3讨论
固体分散体是由至少两种不同的组分,亲水性基质和亲脂性药物组成的一组固体产物,药物可被分散成无定形颗粒(团簇)或结晶颗粒,可改善水溶性差的药物在药物组合物中的溶解度,并加快溶解速度,提高药物的生物利用度[10]
。TSA 溶解度较小,溶出速率较慢,口服吸收较差,导致生物利用度较低,为了提高TSA 的体外溶出速率满足制剂的设计要求,本研究尝试将TSA 制成固体分散体,以增加其溶解度和溶出速率[11⁃12]。TSA 固体分散体制备过程中,TSA 与载体之间相互作用改变了TSA 的结晶结构,以无定形态存在,使TSA 的饱和溶解度和溶出度均提高[13]
。
cto是什么意思
作为丹参活血化瘀主要有效成分之一,TSA 具有抗感染,抗菌,改善微循环,抗肝、肾、心脏纤维化疾病等多种药理作用[14]。现代药理学研究发现,TSA 能够抑制皮肤纤维化疾病的发生,可能与对人皮肤成纤维细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用
有关[15]
。本文进行丹参酮ⅡA 固体分散体研究,以期提高药物与皮肤和黏膜的亲和力,增加药物透皮效率。
参考文献
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and
induces
apoptosis紧急制动是什么
through
the
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(责任编辑:陈翔)
图6TSA⁃PVP SD 与物理混合物的FIIR 图
Figure 6FTIR Spectra of TSA⁃PVP SD and physical mixture
A.TSA ;
B.PVP K30;
C.物理混合物;
D.TSA⁃PVP SD 。
A
B
C D
400030002000100040003000200010004000300020001000
4000300020001000
σ/cm -1
σ/cm -1σ/cm -1σ/cm -1
10