首页 > 英语园地

各种酶切位点的保护碱基

更新时间:2023-05-20 13:37:12 阅读：评论：0

各种酶切位点的保护碱基

酶不同，所需要的酶切位点的保护碱基的数量也不同。一般情况下，在酶切位点以外多出 3个

碱基即可满足几乎所有限制酶的酶切要求。在资料上查不到的，我们一般都随便加3个碱基做保护。

寡核昔酸近末端位点的酶切

（Cleavage Clo to the End of DNA Fragments

（oligonucleotides）

为了解不同内切酶对识别位点以外最少保护碱基数目的要求， NEB采用了一系列含识别序列的

短双链寡核昔酸作为酶切底物进行实验。实验结果对于确定双酶切顺序将会有帮助（比如在多接头上切割位点很接近时），或者当切割位点靠近 nepaDNA末端时也很有用。在本表中

没有列出的酶，则通

常需在识别位点两端至少加上 6个保护碱基，以确保酶切反应的进行。

实验方法：用Y[32P]ATP在T4多聚核甘酸激酶的作用下标记 0.1 A 260单位的寡核昔酸。取1 Q

角斗怎么读

已标记了的寡核昔酸与20单位的内切酶，在20°C条件下分别反应2小时和20小时。反应缓冲液含70 mM Tris-HCI （pH 7.6） , 10 mM MgCI 2,5 mM DTT S适量的 NaCI 或 KCI （视酶的具体要求而定）。20%得到的反义词是什么的 PAGE （ 7M尿素）凝胶电泳分析，经放射自显影确定酶切百分率。

本实验采用自连接的寡核昔酸作为对照。若底物有较长的回文结构，切割效率则可能因为出现

发夹结构而降低。

1酶	寡核昔酸序列	链长	切割率％
1酶	寡核昔酸序列	链长	2 hr	20 hr
Acc I	G GTCGACC	8	0	0
	CG GTCGAC CG	10	0	0
	CCG GTCGAC CGG	12	0	0
Afl III	CACATGTG	8	0	0
	CCACATGT GG	10	>90	>90
	CCC ACATGT GGG	12	>90	>90
Asc I	GGCGCGCC	8	>90	>90
	AGGCGCGCCT	10	>90	>90
	TTGGCGCGCC AA	12	>90	2012美国总统辩论>90
n Ava I	CCCCGGGG	8	50	>90
	CC CCCGGG GG	10	>90	>90

TCC CCCGGG GGA

12 >90 >90

scotlandcarrot的音标bit it

BamH 1	CGGATCC G	8	10	25
	CG GGATCC CG	10	>90	>90
	CGC GGATCC GCG	12	>90	>90
、Bgl II	CAGATCTG	8	0	0
	GAAGATCT TC	10	75	>90
	GGA AGATCT TCC	12	25	中英翻译网>90
■ BssH II	GGCGCGCC	8	0	0
	AG GCGCGC CT	10	0	0
	TTG GCGCGC CAA	12	50	>90
BstE II	G GGT(A/T)ACC C	9	0	10
BstXI	AACTGCAGAA CCAATGCATTGG	22	0	0
	AAAACTGCAG CCAATGCATTGG AA	24	25	50
	CTGCAGAA CCAATGCATTGG ATGCAT	27	25	>90
Clal	CATCGATG	8	0	0
	GATCGATC	8	0	0
	CC ATCGAT GG	10	>90	>90
	CCC ATCGAT GGG	12	50	50
j — EcoR 1	G GAATTCC	8	>90	>90
j — EcoR 1	CG GAATTC CG	10	>90	>90
	gogodancerCCG GAATTC CGG	12	>90	>90
	南京平面设计培训

本文发布于:2023-05-20 13:37:12，感谢您对本站的认可！

本文链接：https://www.wtabcd.cn/fanwen/fan/78/707917.html

上一篇：微电子学专业词汇

下一篇：priority_queue函数

标签：保护碱基实验位点切割确定反应

留言与评论（共有 0 条评论）