CRISPR-Cas12a：揭⽰DNA的切割特性aussie
ani difranco
导读：尽管存在⼀些潜在的安全风险和⼀定的伦理之争，CRISPR/Cas9系统出于其相对精准和⾼效，已开始被应⽤于临床的研究。同时，科学家开始将CRISPR系统引⼊核酸快速检测领域，期望为现有的临床诊断技术带来突破。今天，赛业⼩编为您推荐“CRISPR-Cas12a：揭⽰DNA的切割特性”，详情如下：
CRIPSR/Cas12a切割单链DNA的⽰意图（A）和三元复合物的结构模拟图（B）
中国科学院分⼦植物科学卓越创新中⼼/植物⽣理⽣态研究所赵国屏研究组的最新研究成果，以CRISPR-Cas12a has both cis- and trans-cleavage activities on single-stranded DNA（《Cas12a兼具顺式和反式单链DNA切割活性》）为题，在线发表在Cell Rearch上。论⽂深⼊系统地研究了Cas12a对于靶标单链DNA和⾮靶标单链DNA的切割特性。
作为⽣命的基本遗传物质，DNA的精准编辑和快速检测⼀直以来受到⾼度重视。近年来，随着CRISPR/Cas9系统的发现和开发，⼈们对基因治疗重新燃起了新希望；尽管存在⼀些潜在的安全风险和⼀定的伦理之争，CRISPR/Cas9系统出于其相对精准和⾼效，已开始被应⽤于临床的研究。同时，科学家开始将CRISPR系统引⼊核酸快速检测领域，期望为现有的临床诊断技术带来突破。
suggestion研究发现Cas12a在靶标ssDNA的第22位附近特异切割DNA（称为cis切割），并且该切割⾏为不需要PA
M序列的辅助。同时，研究还发现，⼀旦Cas12a与crRNA以及靶标DNA形成三元复合体后，该复合物就会显⽰出很强的“乱切”活性，并将体系中任意单链DNA切成碎⽚（称为trans切割）。借助质谱分析，研究⼈员发现Cas12a将ssDNA切成2-4nt 的⽚段。根据⼀系列点突变的实验结果，研究证明了Cas12a的cis和trans切割活性均和其RuvC⼝袋（‘RuvC pocket’）相关，并据此提出了Cas12a切割ssDNA的分⼦模型。该研究成果有望为DNA临床诊断提供新的研究思路。amf
近年来，赵国屏研究组聚焦于合成⽣物学使能技术的开发和应⽤，开发了多项DNA编辑和检测的⽅法，并积极推动这些⽅法⽤于临床研究。研究⼯作得到了中科院战略性先导科技专项（“⼈⼯染⾊体构建与稳定遗传的技术⽅法”）、中科院青年创新促进会和国家⾃然科学基⾦委员会的资助。atbelt
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CRISPR-Cas12a has both cis- and trans-cleavage activities on single-stranded DNA
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