实现其细胞毒性、抗病毒、免疫调节等生物学功能。TNFR存在于多种正常细胞及肿瘤细胞表面， TNF-α通过与靶细胞膜上肿瘤坏死因子受体（tumornecrosifactorreceptorTNFR结合。有TNFR1和TNFR2两种亚型，由于TNFR1胞内区含死亡结构域，溶细胞活性上起主要作用。Lyu等[1]用scFv23/TNF免疫因子促使SKBR-3-LPTNF天然耐药）细胞表面TNFR1过表达，可提高HER-2/neu过表达的SKBR-3-LP细胞对TNF敏感性。当TNF-α三聚体与靶细胞膜上TNFR1胞外区结合，PA DDTNFR1assocideathdomainprotein抑制蛋白被释放，PA DD与TNFR1死亡结构域结合，形成TNFR1/PA DD复合体，该复合体招募一系列相关蛋白，引发不同的下游信号通路，促使肿瘤细胞程序性凋亡。 2.1.1 诱导经典和非经典Caspas依赖型细胞凋亡 wiper将FA DD招募到TNFR1/PA DD复合体， TNFR1/PA DD复合体通过其死亡结构域和FA DDFaassocideathdomainprotein死亡结构域结合。FA DD蛋白N端死亡效应结构域(DED可以激活Caspa-8属于ICE/CED3半胱氨酸蛋白酶家族）从而激活Caspa-3通过级联放大反应，引起DNA 断裂和细胞凋亡形态学改变，诱导细胞凋亡。Chosa等[2]发现用TNF-α预处理HSG细胞，促使Fa受体表达增加，激活Caspas促进HSG细胞凋亡。TNF-α可通过诱导凋亡启动子如凋亡前体蛋白BidBax表达，激活Caspa-8引起级联放大反应，从而诱导肿瘤细胞凋亡。同时TNF-α也可诱导非经典的Caspas依赖型细胞凋亡，即改变肿瘤细胞质中线粒体的通透性，释放细胞色素C分泌ROS通过调节凋亡和抗凋亡因子，诱导肿瘤细胞死亡。 2.1.2 招募PA F2激活NF-κB和JNK信号通路 PA F2TNFRassocifactor2可以与PA DDN端结合, 当TNF结合TNFR1后。被招募到TNFR1/PA DD复合体上，从而活化下游一系列蛋白激酶，激活NF-κB和JNK信号通路。NF-κB核转录调节因子，最为常见的研究最多是p50/p65静息时NF-κB与抑制性蛋白ⅠκB家族结合(NIK以非活性的形式存在于胞浆中，激活后入核内，特异性地识别结合DNA 发挥其转录调节因子功能，促进细胞增殖。但是NF-κB活化后期，ⅠκB激酶活性下调使新合成的ⅠκBα得以积累进入核内与NF-κB结合，使NF-κB从DNA 上解离下来，促使NF-κB重新返回到细胞质中，从而确保NF-κB活化过程适时终止。ⅠκB高表达同时可促进Caspa-8和Caspa-3分泌，衰减FLIPSCaspa-8抑制剂）表达，阻止NF-κB核移位，增强TNF-α诱导细胞凋亡。Chang等[3]研究表明TNF-α介导的JNK信号通路加速抗凋亡蛋白c-FLIPCaspa-8抑制剂）转归，抑制NF-κB抗凋亡作用，促进细胞对TNF-α的敏感性。rick james 讲话紧张通过Tyr185和Thr183自身磷酸化，激活MA PK促分裂原活化蛋白激酶）从而激活JNK信号通路。ASK1MA PKKK家族成员，静息状态下，ASK1和抑制蛋白Trx结合，Trx能清除活性氧自由基。当TNF-α刺激细胞后, JNKc-JunN-terminkinas属于MA PK促分裂原活化蛋白激酶）家族。当PA F2被招募到TNFR1/PA DD复合体上。细胞内产生ROSROS使得抑制蛋白Trx改变构象，ASK1从ASK1/Trx复合体脱离，Thr-845自身磷酸化下ASK1被激活，从而激活MA PKK4和MA PKK36激活JNK最终激活JNK信号通路。JNK活性状态的延伸物jBIDBID蛋白水解的片段）能诱导线粒体释放Smac随后Smac能把Caspa-8抑制因子C-IA P1从TNF-R1复合体上释放，降低对Caspa-8抑制，从而促进细胞凋亡的发生。Chang研究表明TNF-α介导的JNK信号通路，可加速抗凋亡蛋白c-FLIPCaspa-8抑制剂）转归，依赖JNK-介导的磷酸化和E3泛素连接酶Itch使c-FLIP发生特异性遍在蛋白化，诱导c-FLIP蛋白酶体降解，从而促进TNF-α诱导细胞凋亡的发生。Wang等[4]用抗TNF-α和FasL抗体可以降低pXprotienX依赖性的JNK信号通路的激活，导致TNF-α诱导细胞凋亡能力下降约70% 2.1.3 招募RIP诱导细胞凋亡 河北英语培训C端具有死亡结构域， RIP一个蛋白激酶。属于Ser/Thr激酶家族，TNFR1/PA DD复合物下游信号的组成部分，RIP被招募到TNFR1/PA DD复合体上，可以与含有死亡区域的接续分子RA IDD相联接，使Caspa-2聚集于RIP通过级联放大反应，引起细胞程序性凋亡。Devin[5]以Rip-/-鼠成纤维细胞研究表明TNF-α激活MA PK细胞外联结信号激酶(ERKp38JNK信号通路，RIP必需的Hur[6]提出RIPⅠκB激酶上游调控分子对于DNA 损伤是必要的同时RIP可以聚集神经酰胺。TNF-α引起细胞程序性死亡之前细胞内神经酰胺水平渐增，如L929NIH3T3细胞。TNF-α与TNFR作用早期，中性鞘磷脂酶(nSMa水解神经鞘磷脂(SM生成神经酰胺(CHCH可以激活蛋白激酶介导细胞凋亡。Sawada等[7]研究表明TNF-α通过激活nSMa和SMa刺激神经酰胺形成，诱导人神经胶质瘤细胞（p53野生型）凋亡。 2.2 增强宿主免疫功能 TNF-α以一种细胞与细胞接触的方式发挥细胞免疫作用。TNF-α能诱导单核巨噬细胞系统的前体细胞分化， 细胞免疫方面。扩大单核—巨噬细胞对肿瘤细胞的ADCC效应；也可促进骨髓基质细胞产生CSF特别是GM-CSF可促使骨髓释放中性粒细胞，刺激细胞脱颗粒和分泌髓过氧化物酶，提高中性粒细胞的吞噬能力；TNF-α可促使某些细胞表达MHC英国东伦敦大学Ⅰ类分子、细胞间黏附分子，协同IFN-γ诱导MHCⅡ类分子的表达，启动T细胞介导的细胞免疫，增强T细胞(尤其CTLNK细胞、淋巴因子激活性杀伤细胞(LA K及肿瘤浸润淋巴细胞(TIL细胞毒活性。Ebert[8]最近研究发现表皮Vδ1+γδT细胞通过诱导大量TNF-α、IFN-γ和CCR8配体CCL1分泌，使其具有产生细胞内穿孔素，显示对黑色素瘤细胞很强的细胞毒活性。 TNF-α能诱导B淋巴细胞的增生和分化， 体液免疫方面。产生肿瘤特异性抗体，从而产生抗体介导的体液免疫抗瘤效应；同时TNF-α能诱导B淋巴细胞分泌细胞因子激活巨噬细胞、自然杀伤细胞、树突状细胞，并协同刺激T细胞增殖从而参与免疫调节。张梅等[9]带有骨髓瘤个体基因型DC疫苗诱导抗骨髓瘤效应体外研究，表明TNF-α促使DC前体细胞分化为成熟DC带有Id个体基因型）成熟DC可以促进自体T淋巴细胞增殖，激活未致敏T淋巴细胞成为肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞，诱导有效的抗肿瘤免疫效应。 日耳曼语族导致血管功能紊乱 2．3 作用肿瘤血管内皮细胞。 2.3.1 肿瘤血管的高渗透性 必须依赖TNF-α的功能。mTNF-α可能具有选择性地增强VEGF上调血管渗透性的功能， 肿瘤血管的高渗透性依赖于内皮细胞过度表达的mTNF-α和可溶性VEGF血管内皮生长因子(vascularendotheligrowthfactorVEGF介导体内血管内皮高渗透性的病理生理过程。而对其诱导血管生成的作用无影响，sTNF-α在体内通过细胞骨架重排和胞内通道建立，破坏肿瘤血管内皮细胞的屏障功能，导致肿瘤血管的高渗透性，使化疗药物能更好地到达肿瘤局部，提高化疗药物疗效，降低化疗药物的剂量及毒副反应。国内有学者报道TNF-α可以降低内皮细胞膜钙黏蛋白的表达和激活MA PK活性，从而增加血管内皮细胞的通透性。Kuroda[10]研究发现，RGD-V29TNF-α突变型）较野生型TNF-α可能具有更高的选择性破坏肿瘤脉管系统活性。Ohtani[11]研究发现CPA 代谢产物4-HC可以提高TNF-α诱导DNA 断裂，激活Caspa-3通过线粒体依赖途径，提高脉管上皮细胞对TNF-α诱导细胞凋亡的敏感性，从而提高肿瘤血管渗透性。Koss[12]研究发现TNF-α激活蛋白激酶C和p38使ERM磷酸化，磷酸化ERM可调节与肺相关的微血管内皮细胞通透性。 air curtain2.3.2 肿瘤血管血栓形成 损伤血管外基质， Owen等[13]发现TNF-α和PA Fplatelet-activfactor可适当诱导细胞表面组织蛋白酶GcathepsinG改变内皮和上皮细胞屏障。促进血栓形成。Nishigaki[14]将MethA肉瘤移植于小鼠体内，移植后第7天开始静脉注射重组人TNF-α（rhTNF-α）发现在肿瘤组织新生的血管内生成了纤维蛋白样物质，该类物质的生成加强了体内促凝血系统的作用，加速血栓形成，导致循环障碍，影响肿瘤组织血供。Lang[15]研究发现TNF-α诱导肾小球膜细胞分泌组织因子（tissufactorTF可诱导血栓形成；同时还发现经TNF-α作用后，肿瘤细胞内初级及次级溶酶体数目增多，得出rhTNF-α在体内的抗瘤机制是选择性阻碍肿瘤组织新生的毛细血管血供，最后导致肿瘤细胞自溶、肿瘤出血性坏死、消退或消失。Lans[16]提出高剂量TNF-α可导致肿瘤出血性坏死，内皮单核细胞活化多肽-medicine怎么读Ⅱ（EMA P-Ⅱ）表达既可以增加肿瘤细胞表面TNFR1表达，活体内增加肿瘤对TNF-α敏感性；又可以上调组织因子mRNA 水平，促血栓形成，影响肿瘤组织血供，认为高剂量TNF-α可导致肿瘤组织出血性坏死。 油泵工作原理2.3.3 抗新生血管生成作用 具有抗血管生成活性。Patterson等发现TNF-α可以阻断人内皮细胞VEGF诱导的DNA 合成， TNF-α可以选择性地抑制肿瘤血管上皮细胞。也可以下调VEGF受体的表达，发挥抗血管生成活性。有研究表明TNF-α对不超过9天的新生血管组织抑制更强烈，联合其它药物能在分子水平上抑制整合素的活性，从而引发肿瘤血管内皮细胞的解体和凋亡。国外研究发现Tumstatin45-132-TNF具有tumstatin45-132和TNF-α活性）可有效减弱HepG2肿瘤生长，缩小肿瘤尺寸，减少CD31阳性脉管系统，亦有资料表明TNF-α可以部分上调ADA MTS14ADA MTS具有抗血管生成活性。 3 TNF-α可以提高抗肿瘤药物的疗效 发现TNF-α/DOX联合使用， Cao等[17]以多药耐药细胞株MCF-7/A dr为研究对象。可抑制MCF-7/A dr细胞核内的RelA /p65活性，降低细胞内抗凋亡基因mRNA 水平，同时可抑制抗凋亡因子p21活性，有效诱导Caspa-8分泌，从而提高MCF-7/A dr多药耐药细胞的细胞毒效应，因此提出TNF-α/DOX可作为一种新的有效的治疗肿瘤耐药策略。Wan[18]研究发现TNF-α通过NF-κB亚单位p65途径，诱导Upa基因表达，提高5′-FUDR对鼠类乳腺癌细胞EMT6细胞毒性。Ando等[19]以非小细胞肺癌亲代细胞系PC-9吉非替尼获得性耐药细胞系PC-9/ZD-2001PC-9/ZD-2001返祖细胞PC-9/ZD-2001-R为研究对象，发现PC-9/ZD-2001对TNF-α敏感性最强，可能机制是EGFR表达水平下降、ⅠκB降解减少、凋亡抑制蛋白C-IA P1和C-IA P2不表达，得出TNF-α可能对一部分吉非替尼获得性耐药的NSCLC有效。Sacchi[20]研究发现低剂量NGR-TNFTNF-α衍生物）可以定向传递至肿瘤脉管系统，通过不同机制增加顺铂、紫杉醇、吉西他滨抗肿瘤效果，而不增加毒性，具体机制不明，需进一步研究。周清华等[21]以注射用重组改构人肿瘤坏死因子联合化疗药物治疗非小细胞肺癌的多中心Ⅲ期临床试验研究结果表明，rmhTNF联合化疗药物治疗人非小细胞肺癌的疗效显著优于单纯化疗，rmhTNF能明显提高化疗药物的敏感性，改善晚期肺癌患者的生活质量，临床应用安全、有效、不良反应轻微，一种治疗人非小细胞肺癌的新型基因工程药物。 | 
