PH1498 Western Blot一抗二抗去除液实验使用方法与步骤

更新时间:2023-07-20 23:23:15 阅读: 评论:0

PH1498|Western Blot一抗二抗去除液(中性)
世界名著小说>mazeWestern Blot Stripping Buffer(Neutral)
my favourite asonCatalog No:PH1498Size:☐250mL Store at4℃
去除液简介
Western Blot一抗二抗去除液(Stripping buffer)可以充分去除结合在印迹膜上的一抗和二抗,使同一张膜可进行多次抗体检测,无需反复电泳和转膜,节省样品和时间,适用于使用NC或PVDF膜进行Wester
n Blot检测时条件的优化或同一样品不同蛋白的检测。
本品经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用3次,每次大约只需15-30min,并且在室温条件下就可以进行。
托福红宝书本类型Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合,同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。
april是几月份
试剂保存
4℃保存,一年有效,如长期不用请放置-20℃保存。
使用参考
1.在完成Western化学发光检测后,用蒸馏水或TBST缓冲液漂洗5-10min。
2.弃蒸馏水,加入适量的Western一抗二抗去除液(中性),至少需把膜完全覆盖。在摇床上室温缓慢漂洗25min左右(漂洗时间应根据不同的目的蛋白来调整:比如内参抗体等表达量较高的蛋白,可以延长漂洗时间至30min)。
3.弃Western一抗二抗去除液,用蒸馏水或TBST缓冲液洗膜3次,每次10min,室温振摇。
4.剥脱后的膜加入封闭液进行封闭,进行下一轮的WB实验。
注意事项
1、用辣根过氧化物酶(HRP),任何一次封闭(blocking)都应当使用5%脱脂牛奶,如果使用碱性磷酸酯酶,任何一次封闭都应当使用酪蛋白(cain)。
2、本Western一抗二抗去除液仅适用于PVDF膜。用于硝酸纤维素膜时会导致转移到膜上的蛋白有非常显著的损失。落伍的英文怎么写
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keep up3、使用ECL等类似的化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测,例如DAB,NBT/BCIP,不适用于本试剂。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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孵育内参抗体GAPDH后用ECL发光液曝光20s。用本试剂剥脱25min后孵育内参抗体β-actin,ECL发光液曝光20s
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