242 Acta Nutrimenta Sinica,Jun.,2010, V ol.32 No.3 酪蛋白肽对小鼠抗氧化酶作用的研究
陈东平，牟光庆
(大连工业大学 生物与食品工程学院，大连 116034)
【摘 要】目的研究不同分子量范围酪蛋白肽对小鼠肝脏组织中抗氧化酶活性的影响。方法将48只雌雄各半的昆明种小鼠，平均分成肽分子量大于3ku、1k~3ku、小于1ku和对照四个组。样品组每天灌胃10mg/ml多肽溶液0.2ml，对照组灌胃蒸馏水。各组随机选取6只，分别灌胃15d和30d，断颈处死后取其脾脏和肝脏进行抗氧化指标测定。结果 酪蛋白肽能够使小鼠肝脏组织中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和超氧化物歧化酶（SOD）活性增强，使丙二醛（MDA）含量下降，且灌胃15d与30d时抗氧化酶活性差异显著。结论酪蛋白肽可增强小鼠抗氧化性作用，肽分子量1ku以下对小鼠抗氧化酶系作用显著。[营养学报，2010，32（3）：242－244]
关键词：酪蛋白肽；GSH-P X；SOD ；MDA
中图分类号：文献标识码：A 文章编号：0512-7955(2010)-03-0242-03 EFFECTS OF CASEIN PEPTIDES ON ANTIOXIDATIVE ENZYMES IN MICE
CHEN Dong-ping, MU Guang-qing
（School of Biology and Food Engineering, Dalian Polytechnic University, Dalian 116034 China）
孩子成绩差怎么办【Abstract】Objective To study the antioxidant effects of cain peptides with different molecular weights on liver tissue in mice. Methods Forty-eight mice were divided into four groups, and fed ig cain peptides in different molecular weights, <1ku, 1-3ku, >3ku and distilled water as control. Results Cain peptides could improve the antioxidation ability of the mice, as to increa glutathione peroxida (GSH-Px) and superoxide dismuta (SOD) activities of liver tissue, and reduce malondialdehyde (MDA). The antioxidant enzymes activities after giving cain peptides for 30d and 15d were significantly different. Conclusions Cain peptides can enhance the antioxidation of the mice and especially more effect with the molecular weight <1000u. [ACTA NUTRIMENTA SINICA, 2010,32(3)：242－244]
Key words：cain peptides; GSH–Px; SOD; MDA
牛乳酪蛋白因含有丰富的必需氨基酸，成为婴幼儿和幼畜主要的优质蛋白源[1]。乳蛋白的肽链分子中存在多种生物活性片段，它们在母体蛋白质中没有活性，经过特定水解后能够游离出来，并在人体内表现出不同的生物活性，包括具有镇静与安神作用的类吗啡肽、抗高血压肽、免疫调节肽、促进钙铁
吸收的酪蛋白磷酸肽（cain phosphopeptides）、抗血栓肽、糖巨肽、酪蛋白巨肽和抗菌肽等[2-3]。
自从Harman提出自由基理论以来，人们认识到氧化产生的自由基与人的衰老和很多疾病有关。因此抗氧化剂不仅用于食品的抗氧化，而且作为功能因子用于保健食品的开发[4]。由于食品安全和抗氧化剂安全问题，天然抗氧化剂越来越受到人们的关注。做为天然活性肽，抗氧化肽具有较强抗氧化活性和很高安全性，在食品等领域己展现出极好的应用前景。
研究表明，乳蛋白肽具有一定的抗氧化能力。有学者采用微生物酶水解酪蛋白酸钙制备CCP，显示出清除超氧自由基、DPPH、羟自由基活性。Xiong等[5]对乳清蛋白水解物抗氧化肽的结构与功能相关性研究表明，水解物中肽的分子量及组成决定了蛋白水解物的抗氧化能力。胡文琴等[6]通过体外试验发现，不同的酪蛋白酶解物都有抗脂质过氧化作用。而对于活性肽抗氧化能力的体内试验很少，本实验就不同分子量范围的酪蛋白肽对小鼠抗氧化性能进行了研究。
收稿日期 2009-09-10
基金项目 国家863项目(No.2008AA10Z311-2)及大连工业大学创新基金资助项目（No.2008024）
作者简介 陈东平(1984-)，女，硕士研究生；E-mail:；通讯作者：牟光庆；E-mail：
营养学报2010年第32卷第3期 243
1 材 料 与 方 法
1.1受试物
酪蛋白肽由本实验室自制。
1.2 试验动物
大连医科大学实验动物中心提供的昆明种小鼠48只，雌雄各半，体重20±2g。
1.3 主要仪器、器材与试剂
722型光栅分光光度计（山东高密彩虹分析仪器公司）；DK-S22型电热恒温水浴锅（上海精宏实验设备公司）；T-SOD测试盒、GSH-P X测试盒、MDA测试盒（南京建成生物研究所）。
1.4 分组及饲喂方法
48只雌雄各半的昆明种小鼠，平均分成4组：对照组：样品组按酪蛋白肽分子量分3组,Ⅰ组：分子量大于3ku，Ⅱ组：分子量1k～3ku，Ⅲ组：分子量小于1ku。样品组每天灌胃10 mg/ml多肽溶液0.2ml，对
照组灌胃蒸馏水0.2 ml，自由饮食。各组随机选取6只，分别灌胃15 d和30 d，断颈处死后取脾脏和肝脏进行抗氧化指标测定。
1.5 指标测定
1.5.1脏器指数（脏器/体重）：每组小鼠于末次灌胃禁食24h后，断颈处死，取脾脏称重(湿重)[7]。
1.5.2 GSH-Px：采用比色法：GSH-Px活力用酶促反应中还原型谷胱甘肽消耗的速度表示，每毫克蛋白质每分钟扣除非酶反应的作用，使反应体系中GSH浓度降低1 μmol/L为一个酶活力单位。 1.5.3 T-SOD：采用羟胺法：体内通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子自由基(•_
2
O)，后者氧化羟胺形成亚硝酸盐，在显色剂的作用下呈现紫红色。当被测样品中含SOD时，则对超氧阴离子自由基有专一性的抑制作用，使形成的亚硝酸盐减少，比色时测定管的吸光度值低于对照管的吸光度值，通过公式计算可求出被测样品中的SOD活力。
1.5.4 MDA：采用TBA法测定。MDA的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度，间接地反映出细胞损伤的程度。过氧化脂质降解产物中的MDA可与硫代巴比妥酸（TBA）缩合，形成红色产物，在532nm处有最大吸收峰。
1.6 统计学方法
采用SPSS 11.0统计软件，用x±s表示，样本间比较采用t检验。 2 结 果
2.1 酪蛋白肽对小鼠脾脏指数的影响（表1）
Table 1 Effects of cain peptides on spleen index of
mice (n=6，x±S)
Spleen index(mg/g)
Group
15d 30d Control 1.26±0.14 0.42±0.23
Ⅰ 1.10±0.23 0.45±0.25a
Ⅱ 1.01±0.38 0.48±0.29b
Ⅲ 1.21±0.51 0.53±0.30 b
a：P＜0.05；b：P＜0.01 compared with control
饲喂酪蛋白肽15d时对小鼠脾脏影响效果不
明显，30d时脾脏指数有所增加。与对照组比，
Ⅰ组影响显著（P＜0.05）；Ⅱ、Ⅲ组影响达到非
常显著水平（P＜0.01）。脾脏是小鼠重要的免疫
器官之一，脾脏指数的增长，可间接表明酪蛋白
肽具有促进非特异性免疫功能的作用。研究认为，
免疫与抗氧化存在着相关性，二者相辅相成[8,9]。
2.2 酪蛋白肽对小鼠肝脏GSH-Px活性的影响
Table 2 Effects of cain peptides on GSH-Px in liver
of mice (n=6，x±S)
ebigear
GSH-P X(U/ml)
Groupelectricity
15d 30d Control 148.71±22.10 230.45±92.43
Ⅰ 171.80±38.19 a 233.46±91.20 a
materialⅡ 185.15±46.44 a 238.58±82.14 b
七年级英语复习资料Ⅲ 198.87±48.60 b 246.67±86.09 b
a：P＜0.05；b：P＜0.01 compared with control
GSH-Px是体内抗氧化酶之一，可起到保护细
胞膜结构和功能完整的作用。从表2可见，酪蛋白
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肽可以提高小鼠肝脏组织中GSH-Px活力。与对照
组相比，饲喂15d时Ⅰ、Ⅱ组GSH–Px活力提高显
著（P＜0.05），Ⅲ组达到非常显著水平（P＜0.01）。
饲喂30d时Ⅰ组GGSH-Px活力提高显著（P＜0.05），
Ⅱ、Ⅲ组达到非常显著水平（P＜0.01）。
2.3 酪蛋白肽对小鼠肝脏T-SOD活性影响(表3)
Table 3 Effects of cain peptide on T-SOD in liver of
mice (n=6，x±S)
T-SOD(U/ml)
Group
15d 30d Control 287.10±98.95 287.05±47.32 Ⅰ 291.93±95.37 292.13±45.37
Ⅱ 295.26±56.25 a 297.24±59.82 b
Ⅲ 297.10±98.90b 314.07±99.60 b
a：P＜0.05；b：P＜0.01 compared with control
SOD对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重
要的作用，它能清除O2·保护细胞免受损伤。从表
3可以看出，与对照组相比，15 d时Ⅲ组对SOD活
力有非常显著影响（P＜0.01），30 d时Ⅱ组及其
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Ⅲ组对其有非常显著影响（P ＜0.01）。 2.4 酪蛋白肽对小鼠MDA 的影响（表4）
Table 4 Effects of cain peptide on MDA in liver of
mice (n =6，x ±S ) MDA(nmol/mg prot) Group 15d 30d Control 5.41±3.75 5.47±2.30 Ⅰ 4.67±2.98 4.97±2.40 a
Ⅱ 4.53±3.28 a 4.81±2.84 a
Ⅲ 4.28±3.02 b 4.74±2.72 b a ：P ＜0.05；b ：P ＜0.01 compared with control
与对照组比，饲喂小鼠15d，Ⅰ组效果不显著，Ⅱ组达到显著效果（P ＜0.05），Ⅲ组差异十分显著（P ＜0.01）。饲喂小鼠30d，Ⅰ组和Ⅱ组
差异显著（P ＜0.05）
，Ⅲ组差异十分显著（P ＜0.01）。
3 讨 论
3.1 酪蛋白肽对小鼠脾脏指数的影响
从表1可见，30 d 时与对照组比，脾脏指数最高，增加了26.19%，表明酪蛋白肽有促进非特异性免疫功能作用，间接说明了其抗氧化效果。 3.2 酪蛋白肽对小鼠肝脏GSH –Px活性的影响
GSH–Px是机体内广泛存在的一种重要的催化过氧化氢分解的酶。它特异的催化还原型谷胱甘肽（GSH）对过氧化氢的还原反应，可以起到保护细胞膜结构和功能完整的作用。
3.3 酪蛋白肽对小鼠肝脏T-SOD活性影响
从表3看出，饲喂相同剂量酪蛋白肽，在不同时间对小鼠肝脏SOD均有作用效果。SOD对超氧阴离子自由基有专一性抑制作用，使机体内由于黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生的超氧自由基
氧化羟胺形成的亚硝酸盐减少。Chen等研究[11,12]
发现合成小肽亮氨酸-组氨酸（Leu-His），组氨 酸-组氨酸（His-His）和组氨酸–组氨酸–脯氨酸（His-His-Pro）具有清除活性氧的作用，因此，推测样品组可能含有这样组分的小肽。 3.4 酪蛋白肽对小鼠MDA 的影响
MDA 是机体通过酶系统与非酶系统产生氧自
由基，后者攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸（PUFA），引发脂质过氧化作用，形成脂质过氧化
物。MDA 可以间接反映出机体脂质过氧化的程度。丁晓雯等[10]
报道的小分子肽具有较强的抗氧化
作用结果一致。徐力等[13]
研究证明，链长为2-6个氨基酸残基的多肽，具有蛋白质大分子不可比拟的抗氧化活性。抗氧化活性的高低与这些多肽的组成和浓度成正相关。
[参 考 文 献]
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