标准操作规程（SOP）
戴安HPLC标准操作规程(SOP)
⼀、准备⼯作：
1、泵：
A、流动相：
①、流动相是否充⾜：(主要是有机相或者是单⼀通道的缓冲盐体系)，⼀般应在所预计
中秋节快乐 英文的消耗量之上加150ml，以保证仪器运⾏过程中不会出现流动相短缺；
②、流动相是否新鲜：(主要是⾼纯⽔及缓冲盐流动相)，⼀般情况下⼀次制得的纯⽔或
缓冲盐流动相应在连续的24⼩时内使⽤完，如未使⽤完也应弃去不⽤，并重新配制新鲜的流动相。特殊情况⾄少应重新过滤并脱⽓。
B、柱塞清洗液：清洗液是否新鲜及匹配：对于常规的流动相(⼀般指不含盐或离⼦对等6年级数学补习
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luke bryan添加剂的流动相)，配制50%甲醇作为清洗液，在连续不超过4天⼯作的情况下可以两周⼀换；若超过4天，则⼀周⼀换。对于含盐或其它添加剂的流动相，配制5%甲醇(或⾼纯⽔)作为清洗液，在连续使⽤时，应每⽇更换；中间如有较长时间不⽤，则应改为50%甲醇作为保存液，并在下次使⽤时，根据所使⽤的流动相配制适宜的清洗液。
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*：若泵超过半个⽉以上不⽤，应将柱塞清洗溶剂管(蠕动泵下压部分)抽出，再下次使⽤时放回原位置，以保证清洗管道的正常使⽤。
C、溶剂管道：
①、管道中的⽓泡：在泵长期不⽤时，由于脱⽓机停⽌⼯作，流动相会重新溶剂环境中
的⽓体，⽽产⽣的⽓泡会对柱、泵及检测器产⽣不同程度的影响，因此要求在停泵后重新使⽤时应先观察A、B、C、D四溶剂管道进⽐例阀部分是否存在⽓泡，如⽆，在泵启动后等待5分钟后(脱⽓机⾃动脱⽓)，再启动泵流速；若有，则选择相应的通道(按泵⾯板上的相应字母并保持约3秒钟)，打开PURGE阀后，按⾯板上的PURGE键进⾏流动相⾃动脱⽓(可选择再次按键关闭，或等待5分钟后仪器⾃动停⽌)，完成后先关闭PURGE 阀，再启动泵流速。
②、流动相快速替换：由于流动相通道有限，当在同⼀个通道中更换流动相时，应⾸先
打开PURGE阀，再按泵⾯板上的PURGE键进⾏快速溶剂替换(流动为6ml/min，持续5分钟)，完成后再关闭PURGE阀，按要求进⾏系统的过渡或平衡。
2、⾃动进样器：
A、进样针排⽓：当⾃动进样器⾮连续使⽤时(间隔⼀天或以上)应在仪器启动前(尤其是
泵)先进⾏进样针排⽓。打开Chromeleon主程序后，点出Files，选择Browr，打开后，点击Dionex Temp.，选择Panle中的Dionex_LC，在右边的窗⼝中双击ASI100.pan⽂件打开后，点菜单Control拉⾄最低下点击，在Connect变绿后，选⼿Wash,ttings更改Wash V olue为250、Dispen为50后，在R、B盘中放置甲醇，G盘中放置异丙醇，按Prime进⾏针排⽓，完成后即可。(对于⾯板中有设置的⽤户直接在⾃动进样器设置窗⼝中按针排⽓(Syringe Prime)即可。
B、进样针清洗：当连续使⽤中需要更换样品类型或流动相粘度较⼤时，应在每次进样
完成后进⾏针清洗。在Program编辑查看时，在结束时间命令前加WASH命令；如选择单瓶进样，则在进样完成后，按⾃动进样器选项中的Wash键进⾏清洗。
3、柱温箱：柱温箱应在打开电源且柱连接好后，及时设置为⽅法要求的温度。
4、检测器：为减少灯能量浪费，检测器应在样品准备完成后或基本完成时，且仪器系
统按要求流动相及流速平衡⾄少30分钟以上后打开，在完成⾃检20分钟以后⽅可开始样品的分析。
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⼆、仪器平衡：blue fox
1、泵：应以完成准备⼯作后，以0.2ml/min的步进速度(每个平衡点保持0.5分钟以上时间)进⾏流速的增加，在达到0.6ml/min 以上的流速时进⾏等度流动相⽐例或梯度流动相初始平衡⽐例调整，待压⼒稳定后平衡30分钟以上时间⽅可进样样品的分析。当⽐例调整幅度⼤于40%的变化时，应进⾏过渡(选择两步或两步以上调整后达到需要的⽐例)。
2、检测器：常规情况，设定⽅法要求的波长并调整检测器显⽰范围为-5～100mV，查看基线20分钟以上，基线基本平直即可开始样品分析。
3、柱温箱：在⽅法要求使⽤柱温箱时，应在仪器电源打开后，及时将柱温箱温度设置到预定值并启动。
4、进样器：⼿动进样在系统平衡过程中应扳⾄Inject位置，以保证系统充分平衡。
三、样品⽅法的编辑与运⾏：
1、新⽅法编辑及运⾏：
2、⼰有⽅法的运⾏：
四、数据分析⽅法：
1、数据的选择：在资源管理中(点击Browr图标进⼊，如下图；或在仪器控制⾯板中选择Files----Browr进⼊)
找到数据保存（所要查看数据的Sequence）的位置，双击打开第⼀个对照品数据，即进⼊数据查看窗⼝，点击参⽐峰（⼀般为⽐主成分峰⼩但⼤于其它杂质峰做为参⽐峰，或主成分峰）查看并记录“Area”值，做为最⼩峰⾯积的设定参考。
2、数据分析(流程图)：
六年级上册英语单词>端午节用英语怎么说五、数据报告的编辑与数据备份：
1、选择报告模板：
在数据查看窗⼝中，打开“View”菜单，选择“Printer Layout”即进⼊报告界⾯，根据结果需要选择合适的报告模板，如下：“Intergratio n” 单⼀样品的标准报告
“Calibration(Curr.P)” 单标准校正曲线报告
“Peak Analysis” 峰分析报告
“Calibration(Batch)” 混标的校正曲线报告
“Summary” 数据统计分析报告
2、报告模板的编辑：
在报告界⾯下，打开“Edit”菜单，选择“Layout”打开报告布局编辑功能；
A、标题及⽅法信息：双击报告标题或⽅法信息部分对内容进⾏更改或替换（双击后会出现可更换内容的对话框，根据对话框中信息选择需要替换或更改的信息）。
B、报告结果内容：双击结果部分标题对相关信息进⾏更改或替换；如果需要增加则在表下部的空⽩区右键，根据需要选
择“Inrt”插⼊表格或信息。
C、谱图：双击谱图，在弹出的窗⼝中对相关信息及内容项进⾏修改和编辑；“Overlay 为谱图的叠加，当选择后点Add进⾏谱图的增加，选择过程注意检测通道的选择”；“Comprasion为谱图的对⽐效果，Offt部分为谱图间距。”
3、数据的备份与输出：
韩语班A、数据的备份：在资源管理器中选择需要备份的⽂件源（根⽬录、⽂件夹、Sequence、或相应的样品数据），打开“File”菜单，选择“Export/Backup中的Backup”，在弹出窗⼝中选择数据保存的⽬标位置，点“Start”开始数据备份，最后点“Finish”完成。
B、数据的输出：变⾊龙软件提供数据⽂件以“PDF、ASCII、EXECL、TXT、CMB”等⽂件形式输出，以满⾜不同的需要。选择相就的数据⽂件（Sequence），打开“File”菜单，选择“Batch Report”项，在弹出窗⼝中选择报告⽅法，去除“Print out”标识，点击“Export”，在弹出窗⼝中选择⽂件所需的⽂件类型及所需输出的报告类型后下⼀步，确定输出⽂件保存位置后“OK”，完成。
C、数据的恢复：在备份⽂件的⽂件夹中双击备份⽂件在弹出窗⼝中选择恢复⽂件的⽬录后按“Start”进⾏恢复。或在主程序中打开“File”菜单，选择“Restore/Import中的Restore”，在弹出窗⼝中同法操作即可。
六、关机及注意事项：
1、关机：样品分析完成后，应⾸先关闭检测器的灯，以减少灯能量的损失；其次，根据流动相的组成选择纯甲醇或在5%甲醇⽔溶液除盐后以纯甲醇进⾏清洗（连续使⽤情况下每⽇⾄少清洗30分钟以上时间，⾮连续使⽤应增长清洗时间，具体以相关的样品为参考；含盐流动相⾄少以5%甲醇⽔溶液清洗45分钟以上后，逐步改换到纯甲醇清洗）；再者，选择⾃动进样器清洗或以先纯⽔后甲醇的⽅式⽤专⽤接头对⼿动进样阀在Load位进⾏清洗，完成后扳⾄Inject位⽤清洗液充填管道；上述⼯作完成后再将柱温箱关闭或降⾄室温。
2、注意事项：
A、新柱⼦活化时最好断开检测器管道直接排除清洗液；
B、⼀次开灯相当于30⼩时灯寿命，因此建议尽可能将样品集中分析；遇有样品分散的情况，且间隔时间不超过8⼩时，建议不要关灯；
C、仪器运⾏过程中尽是避免再仪器上使⽤USB设备；
D、对于电⼦追踪记录中的错误信息⼀定要及时分析原因并排除；
E、软件运⾏过程中不可将加密狗拔下；
F、注意计算机的防毒；
G、单独Sequence中的样品尽量不超过200，过多会相起系统内存紧张；
H、对样品的仪器⽅法（Program）更新后，应及时对“Program”⽂件夹中储存的⽅法进⾏同步更新；
I、不要对同⼀样品打开多个窗⼝，否则会引起数据读写错误；
J、样品数据应定期进⾏备份，以减少系统问题造成的数据安全影响。
