WATERS 2695仪器操作简明流程
2695分离单元使用操作:
1)开机自检
打开电源开关,仪器开始自检(4-5min),待屏幕上方出现“Idle”字样表示自检成功。
2)脱气(Degas)
按面板右下方“Menu/Status”键进入“Status(1)”界面,移动光标
至“Degasr Mode”,按Enter选择“On”,打开在线脱气。
3)设定柱温(可选项)
在“Status(1)”界面,移动光标至“Col Htr Set”,输入目标温按Enter即可。(可在工作站方法中设置)
4)Prime Seal Wash(清洗柱塞杆)
按“Menu/Status”键回到“Menu”界面,按下排功能键“Diag”,然后再按下排功能键“Prime Seal Wsh”,“Start”,冲洗1~2min后,“HALT”,“CLOSE”。
5)Wet Prime
在“Status(1)”界面中“Composition”下,选择将用到的溶剂通道为“100%”,按液晶屏幕右下角“Direct Function”键,移动光标选择“2 Wet Prime”,“OK”,流速及时间可使用默认值,也可自行设定(如:5ml/min,3min),“OK”即可。
将每一个会用到的溶剂通道按照上述操作一次。
6)Purge Injector(注射器排气泡及清洗)
进入“Direct Function”界面后,选择“3 Purge Injector”,“OK”,默认数值为6,“OK”。
7)Prime Needle Wash(清洗注射针)
进入“Diagnostics”界面,按下排功能键之“Prime Ndl Wsh”,“Start”,默认30秒钟,“Clo”,即可返回“Diagnostics”界面。
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注:以上4)-7)为溶剂系统前处理过程,建议每天开机后依次进行。若发现注射器中有气泡,则可重复6)直至排除。如果流动相中含有盐类,则实验结束后必须用水清洗柱塞杆(即操作4))。
bricks8)平衡柱子
在“Status(1)”界面上,按流动相比例设定各通道溶剂比例后,再Wet Prime操作一次,然后设置流速,平衡色谱柱30-60min。
cheap的反义词9)放置样品
拉开样品转盘舱门,将盛有待测样品溶液的样品瓶放入转盘中,记下样品瓶号,关上舱门。
经典英语电影10)检测样品
打开工作站,设置仪器方法、方法组、自动进样序列等,监视基线、检测样品。
11)分析处理数据、打印报告
12)清洗注射器、针、柱塞杆
参见上述4)、7)。
13)清洗色谱柱
用水冲洗柱子40-60min(视柱子规格不同,流速通常1ml/min);然后用甲醇或乙腈冲洗柱子40min(流速1ml/min)。
14)关机
关掉电源开关。
1、检测器波长范围:190-700nm
2、可以进行紫外扫描(scan),参考媒体播放
3、清洗柱塞杆的溶剂可以用水,或5%-10%甲醇(抑菌)
4、清洗针的溶剂可以根据样品溶解性选择,如甲醇,或异丙醇-水(1:1)
5、清洗柱塞杆操作“prime al wash”“start”后,看有溶液流出,持续一段时间后,按下“HALT”,“CLOSE” 冲洗1-2min即可,1次。可以每天开机后进行,或结束实验时进行。流动相中有盐,结束实验时一定要清洗。仪器不自动进行。
6、每次仪器打开后,会自动进行的操作有:①start up diagnostics; ②waters alliance perations module, rev2.03,initializing;③initializing needle & syringe; ④initializing carouls; ⑤initializing solvent system; ⑥idle (在屏幕上有显示)
7、实验结束后要purge injector”,1次即可,包括了“purge sample loop”。
8、在线脱气机打开后,开始时运行加速,使压力很快降到1.0psi以下,然后维持在0.5psi左右。
9、怀疑管路堵塞可卸下单向阀、在线过滤器进行清洗。单向阀安装注意方向。
10、
本仪器配置注射器体积250ul,样品环100ul。可在“CONFIG”中查看。
11、样品环体积可换;但同时注射器体积也应匹配。注射器体积有25、100、250、2500等。
12、在检测器中“DIAG”中可以查看“sample energy”、“reference energy”等参数,了解紫外灯的使用情况。
13、检测器要经常用“SHIFT m滤膜过滤过的甲醇冲洗15min-30min即可达到清洗目的。m+3”来校正波长,保证其准确性。每1-2周检查1次。先清洗检测池。清洗检测池可以在线进行,不用卸下;具体操作是,用双向接头替代色谱柱,流速设置为1ml/min,用0.45
14、2台仪器可以共用一个工作站(工作站升级为多系统);但2台仪器不能同时用一个项目采集样品。
15、基线平衡后纵坐标可达到小数点后第4位(很平稳)。
16、可单针自动进样,也可以成组进样;成组进样需要编辑样品组方法(包括瓶号、样品名、进样体积、进样次数、功能、方法组/报告方法、下一针延迟等)。样品组方法可保存、调用。(ctrl +D可以用于列复制是“下同”之意。)
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17、样品组方法里的“功能”一项,有“平衡”及“平衡色谱柱”两个选项,其功能不同;若仪器方法选用梯度,用“平衡色谱柱”可以在进样前运行梯度来平衡柱子;而如果选用“平衡”则只是按照初始梯度条件等度平衡柱子。(当然,如果是用等度的流动相条件,则两者没有区别)
18、编辑仪器方法时注意:
1)2695“通用”标签下,“单次输送体积”数值根据流动相流速不同有别:流速<0.3时,选25;流速在0.3-1.0时,选50;流速>1.0时,选100。“针头深度”除样品瓶选用内插管时设为2,其余均用默认值0。
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2)“脱气”标签下,“脱气模式”选择“开”即可。
19、注射器中的气泡快速有效排除方法:可以小心的卸下注射器抽吸甲醇排除气泡后,注射器中保留少量溶剂,做“purge injector”小心安装上,再做几次“purge injector”观察没有气泡即可。
其他方法,如WATERS 工程师讲可以在“purge injector”开始后、注射器杆向上时,拧掉下
边螺丝,上下抽推排除气泡。溶剂用甲醇较好;不用同时拧掉上方注射器。
标志位>cousin的音标20、检测器开机自检结束时有时会提示“calibration differs.521nm”,这是仪器自检后提示与上一次自检结果有出入,原因很多,可能是检测池中有小气泡,检测池污染,也可能是流路中溶剂有变动。分析原因,清洗检测池,排气泡,或者请工程师帮助。
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21、要注意样品瓶中死体积大小,防止供试液体积不足,针头吸不到。