广东化工2021年第2期· 154 · 第48卷总第436期酒精消毒洗手液中乙醇含量测定方法的验证
谭小玲*，陈晓霞，杜冠星，武升虎
(珠海伊斯佳科技股份有限公司质控中心，广东珠海519055)
[摘要]目的：验证乙醇消毒免洗洗手液的乙醇含量检测方法的适用性。方法：依据《消毒技术规范》(2002年版)建立乙醇气相检测方法，并依据GB/T 27417-2017 《合格评定化学分析方法确认和验证指南》对各参数进行验证，依据JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》进行不确定度评定，结果：线性范围、方法定量限、正确度、精密度均在检测允许范围内。结论：现有的检测条件满足乙醇检测方法要求，提高检测人员操作稳定性有利于降低测量不确定度。
[关键词]方法验证；乙醇；消毒洗手液；定量限；不确定度
[中图分类号]O65 [文献标识码]A [文章编号]1007-1865(2021)02-0154-03
Verification of Determination Method of Ethanol Content for Alcohol Disinfectant
Hand Sanitizer
Tan Xiaoling*, Chen Xiaoxia, Du Guanxing, Wu Shenghu
(Quality Control Center Easycare (Zhuhai) Technology Co., Ltd., Zhuhai 519055, China) Abstract: Objective: To verify the applicability of the ethanol content detection method of alcohol hand sanitizer. Methods: The determining method of ethanol was established by GC according to Technical Standard For disinfection(2002 )，and the parameters was verified according to GB/T 27417-2017 conformity asssment -Guidance on validation and verification of chemical analytical methods , the uncertainty was evaluated according to JJF 1059.1-2012 Evaluation and Expression of Uncertainty in Measurement；Results: The linearity of calibration, limit of quantification, trueness, precision all meets the standard. Conclusion: The existing experimental conditions have met the requirements of ethanol detection method, however, Improving the operation stability of laboratory technicians is helpful to reduce the uncertainty of measurement.
Keywords: verification；ethanol；hand sanitizer；limit of quantification；uncertainty evaluation
新冠肺炎疫情期间，酒精消毒洗手液因携带方便且具有消毒杀菌效果而深受人们喜爱。此类洗手液的主要成分是乙醇，其浓度对消毒杀菌效果起着决定性的作用[1]。因此，生产企业检测部门建立一个适合自己的乙醇含量检测方法，把握好质量控制重要环节，是保障人们生命安全的关键。实验员分别从
回归方程、定量限、准确度、精密度和人员比对几个方面进行验证方法的适用性，并对测量不确定度进行评定，确保结果的准确性。
1 方法验证目的
确保实验室所选用的酒精消毒剂洗手液中乙醇含量测定方法的适宜性[2][3]，确保所出具的报告数据有效、公正和可靠，并满足检测方法的要求。
2 方法依据
2.1 检测依据
《消毒技术规范》(2002年版)
2.2 验证依据
GB/T 27417-2017《合格评定化学分析方法确认和验证指南》JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》cocksucker
3 判断标准
puffy
四年级家长会发言稿
表1 乙醇测定方法验证关键参数
Tab.1 Key parameters for verification of determination method of ethanol content
阿尔法人格验证项目线性范围(相关系数) 定量限/% 正确度(回收率，%) 精密度(重复性RSD，%) 人员比对(RSD，%)
occupation技术参数＞0.999 ＜0.1 95 105
≤3 ≤3
4 检测方法提要[4]
4.1 标准系列溶液配制
以甲醇为溶剂，配制乙醇浓度分别为0.1 %、0.2 %、0.3 %、0.5 %、1.0 %及2.0 %的乙醇标准系列，取1 μL标液进入气相色谱仪测其峰面积，以乙醇峰面积对其含量绘制标准曲线。
4.2 样品配制
以甲醇为溶剂，移取0.5 mL样品至50 mL容量瓶中，稀释定容，过滤后进入气相色谱仪测其峰面积，与标准系列比较而定量。
4.3 色谱条件
DB-WAX UI毛细管色谱柱(30 m×0.32 mm×0.5 μm)；载气(N2)流速：1.0 mL/min；进样量：1 μL；升温程序：60 ℃保持5 min，以40 ℃/min升温到200 ℃，保持5 min。进样方式：分流进样，分流比：50︰1；进样口温度：200 ℃；检测器温度：250 ℃；高纯氢气流量：40 mL/min；高纯空气流量：400 mL/min。
4.4 计算公式
(1)
式中：
X——为样品中乙醇含量，%；
C——为样品测定溶液中乙醇浓度，%；
V1——为样品稀释后定容的体积，mL；
V2——为取样品原液的体积，mL。
5 验证过程
5.1 线性适应性的验证
市场上的免洗手喷雾乙醇含量在60 %~75 %之间，因此不考虑空白。依据标准给定的6个校准点范围0.1 %~2.0 %，每个校准点浓度均独立配制两次用气相色谱仪随机测量，制得浓度-响应值数据表。
用最小二乘法进行拟合来确定直线的斜率和截距，得到标准曲线1次方程为y=52681.033+12596517x，相关系数r=0.999836，校准点范围已覆盖样品浓度的50 %~150 %，满足参数要求。
[收稿日期] 2020-11-24
[作者简介] 谭小玲(1981-)，女，广东人，学士，主要从事油墨涂料、农药保鲜剂、化妆品的化学检测分析工作。*为通讯作者。
2021年第2期广东化工
第48卷总第436期 · 155 ·
表2 乙醇的浓度-响应值数据表
Tab.2 List of relationship between ethanol concentration and peak area
乙醇浓度(V/V)/% 0.0997 0.1994 0.2991 0.4985 0.997 1.994 响应值y11283517 2645003 3738643 6236540 12346102 25088420
响应值y21268028 2606021 3864906 6577706 12831503 25437223
5.2 定量限(LOQ)的验证
本方法选用空白标准偏差法评估LOD法[2]，即配制乙醇浓度为0.1 %的样品独立测试10次，计算标准偏差(s)，并以3倍的标准偏差计为该检出限(LOD)，10倍标准偏差计为定量限(LOQ)。下表为10次空白加标检测结果。
表3 10份空白加标样品的乙醇浓度检测结果
口语一对一英语Tab.3 The results for ethanol concentration of 10 blank experimental samples
浓度/% 0.103006 0.103225 0.100183 0.096400 0.095934 0.104320 0.103646 0.102964 0.099750 0.097374
s/% 0.003197832 LOD/% 0.009593496 LOQ/% 0.031978321
由此看来，该检测方法定量限小于0.1 %，满足参数要求。
5.3 正确度的验证vibe x
通过乙醇浓度为0.1 %、1.0 %和2.0 %的加标样品检测所得到的回收率来评估测量结果的偏倚。
accra表4 加标样品乙醇含量回收率数据
Tab.4 The recovery rate of ethanol content in spiked sample
序号 1 2 3 4 5 6 7 回收率1/% 101.6 102.2 102.0 102.0 101.9 102.3 102.6 回收率2/% 100.1 99.72 97.09 100.5 101.0 103.0 101.9 回收率3/% 102.1 97.46 98.75 99.56 99.18 99.57 99.31 回收率范围/% 97.09~103.0
平均回收率/% 100.7
数据表明，三个浓度加标样品检测的回收率均在95 %~105 %范围内，满足参数要求。
5.4 精密度的验证5.4.1 仪器重复性
通过对校准曲线中6个梯度的标准溶液分别重复测定12次，计算溶液浓度的平均值、标准偏差和相对标准偏差。
表5 仪器重复检测数据列表
Tab.5 List of the data repeated by the instrument
溶液浓度/% 0.1 0.2 0.3 0.5 1.0 2.0
1 0.0997 0.1975 0.3024 0.5018 1.0045 2.0601
2 0.0998 0.1971 0.3017 0.504
3 1.0047 2.0588
3 0.1010 0.1971 0.3000 0.5013 1.0009 2.0614
4 0.1011 0.1978 0.3017 0.5052 1.0083 2.0550
5 0.1010 0.1981 0.2989 0.5037 1.0053 2.0639
6 0.1010 0.1970 0.3024 0.5029 1.0099 2.0603
7 0.1009 0.1981 0.3024 0.5037 1.0025 2.0668
8 0.1010 0.1980 0.3000 0.5031 1.0010 2.0583
9 0.1012 0.1978 0.2994 0.5044 1.0038 2.0576
10 0.1011 0.1979 0.3021 0.5016 1.0076 2.0679
11 0.1010 0.1966 0.3024 0.5031 1.0014 2.0577
12 0.1011 0.1978 0.3012 0.5026 1.0079 2.0628
平均值/% 0.101 0.198 0.301 0.503 1.005 2.061 标准偏差/% 0.0005083 0.0004979 0.0012960 0.0011950 0.0030683 0.0038704 相对标准偏差/% 0.50 0.25 0.43 0.24 0.31 0.19
5.4.2 方法重复性
通过2个乙醇含量不同的加标样品重复测定10次，计算溶液浓度的平均值、标准偏差和相对标准偏差。
表6 加标样品乙醇浓度列表
Tab.6 List of ethanol concentration of spiked samples
1 2 3 4 5 平均值/% 标准偏差/% 相对标准偏差/%
样品1浓度/% 0.2017 0.2023 0.2021 0.2023 0.2020
0.2024 0.0009312 0.46 0.2029 0.2048 0.2016 0.2019 0.2028
样品2浓度/% 0.8045 0.8056 0.8067 0.8045 0.8083
0.8060 0.0015885 0.20 0.8051 0.8066 0.8035 0.8077 0.8074
广东化工2021年第2期· 156 · 第48卷总第436期
5.4.3 人员比对(再现性)[5]
两名实验员在同一个实验室，用相同设备对同一个洗手液样品重复测试6次，按4.2处理检测得到12组稀释溶液浓度结果的相对标准偏差为1.18 %。
从设备的重复性到人员的重复性实验得到的数据可知，相对标准偏差在0.19 %~1.18 %范围内，达到参数要求。
5.5 测量不确定度评定[6]
引入一个数值等于1的重复性系数ƒrep ，其相对标准不确定度u rel(ƒrep)等于在重复性条件下重复测量某个量X所得到的一组观测值的相对标准不确定度u rel( X)。用以合并评定了各种随机影响引入的不确定度分量。由检测结果的计算公式4.4得到完整评定不确定度的测量模型应写成如下形式：
(2) 5.5.1 样品检测
取酒精消毒洗手液按4.2方法进行两次平行检测，仪器峰面积平均值、稀释液乙醇浓度平均值及最终乙醇含量的平均值分别为9417290、0.7434 %和74.34 %。
5.5.2 测量重复性的相对标准不确定度
对一个样品进行12组平行检测，预评估重复性标准差为s(X)=0.86336 %，RSD=0.01175010，由此消毒洗手液两次独立检测的算术平均值相对标准不确定度即为测量的重复系数ƒrep 的相对不确定度u(ƒrep)，计算公式如下：
5.5.3 标准溶液浓度的标准不确定度
由校准曲线引入的不确定度分量
依据5.1数据、结果以及曲线方程，计算由标准曲线引入的标准不确定度：
标准溶液浓度的合成相对标准不确定度
从拟合校准曲线u r(C s)1=0.013499、乙醇标准对照品纯度u r(C s)2=0.000579088、量具刻度准确性u r(C s)3=0.006531973、溶液体积的温度变化u r(C s)4=0.02748187分量考虑，计算标准溶液浓度的相对标准不确定度。
5.5.4 取样体积引入标准不确定度
样品使用1.0 mL A级移液管量取，最大允差±0.008 mL，假定三角分布，相对标准不确定度为0.006531973。
5.5.5 样品稀释定容体积引入标准不确定度
稀释液转移至50 mL A级容量瓶内定容，最大允差±0.05 mL，假定三角分布，相对标准不确定度为0.000408248。
5.5.6 合成标准不确定度
5.5.7 扩展不确定度
取包含因子k=2，扩展不确定度为：
6 结论
(1)经过实践证明，《消毒技术规范》(2002年版)中乙醇含量气相色谱检测方法适用于酒精消毒洗手液的检测，可满足生产企业质量检测的需要。
(2)用气相色谱法平行两次测定消毒洗手液中乙醇含量，取平均值报告结果时，74.34 %的扩展不确定度U(X)=0.06 %，包含因子k=2。
(3)数据显示，对不确定度贡献最大的分量来自标准溶液浓度和测量重复性，而精密度评价中，仪器的
重复性远优于人员操作的重复性，所以提高检测人员移液、定容操作的稳定性可大大降低实验室的测量不确定度。
参考文献
[1]刘扬．浅析乙醇的浓度与时效时间对手部卫生消毒杀菌的影响[J]．中学生数理化(学习研究)，2019(1)：90．
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[5]食品中二氧化硫的测定方法适用性验证_马培培[J]．轻工业手工业．2020(4)．105-107．
[6]国家质量监督检验检疫总局．JJF1059.1-2012，测量不确定度评定与表示[S]．北京：中国质检出版社，2013：4-13．
(本文文献格式：谭小玲，陈晓霞，杜冠星，等．酒精消毒洗手液中乙醇含量测定方法的验证[J]．广东化工，2021，48(2)：154-156)
(上接第146页)
工作。外部温度不宜过高，也不宜过低，外部温度的变化会使得制作压力容器的金属材料的韧性发生一定的变化，进而增加耐压试验的风险。因此必须要根据压力容器的制作材料来进行标准化的温度控制。就比如碳钢与低合金钢制作的压力容器，在进行液压试验的过程中，就要求液体温度要保持在15 ℃以上，如果是在较为寒冷的地区或者是寒冷的季节来进行液压试验，在保持室外温度的同时，也要注意随时的监测和加热内部的介质，保证试验的顺利完成。[6]但是在进行温度控制的过程中，要注意升温后的介质在灌充到压力容器内部之后，不可以立刻进行容器运转，要放置一段时间后再进行加压操作，使压力容器的容器壁能够有一个温度适应的过程，从而减少试验中存在的风险问题。
3.4 严格进行耐压试验的流程管控
流程管控是进行压力容器耐压试验质量控制的重中之重。流程管控主要就是对操作顺序和间隔时间进行相应的管理和控制。就比如在进行液压试验的过程中，在灌充液体之前，要先排空容器中的空气，并且保证容器内壁的干燥。在充入液体之后，达到标准试验压力值要停留30分钟，在精确的时间间隔之后，在进降压作操作，并且要达到标准压力参数的80 %，之后再进行焊接接头以及连接部位的检查。若检查不存在问题则重复上述操作继续进行检验。在这个过程中，各环节以及操作间隔时间的把控十分关键，要求试验人员严格的按照规范来执行，从而更准确的发现实验中存在的隐患问题，并且针对问题进行技术交流。
4 结语
要做好压力容器检验中耐压试验的质量控制，就要从资料审核、安全检测、温度以及流程控制等多个方面入手，制定完备的耐压试验方案，切实提升耐压试验的安全性和有效性，为压力容器设备的使用奠定重要基础。
参考文献
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失败者英文
[6]刘振洋．压力试验在压力容器检验中的质量控制[J]．科技资讯，2011(11)：40．
(本文文献格式：李传禧．压力容器检验中耐压试验的质量控制探讨[J]．广东化工，2021，48(2)：146)
