网络出版时间：２０２０－１２－１５１６：４９ 网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ．２０２０１２１５．１１２０．０４６．ｈｔｍｌ
◇复方药物药理学◇
五味子－甘草配伍的调血脂作用及对甘油三酯合成途径的影响
王晓艳１，李伟霞１，张 辉１，张明亮１，孟祥乐１，贾文汇２，牛 璐２，王 炎２，唐进法１
（河南中医药大学１．第一附属医院中药临床评价技术河南省工程实验室，河南郑州 ４５００００，２．药学院，河南郑州 ４５００４６）收稿日期：２０２０－０８－０４，修回日期：２０２０－１０－３０
基金项目：国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８１８０３７０２）；河南省中医
药拔尖人才培养项目；河南中医药大学研究生＂科研创新＂类项目（Ｎｏ２０１９ＫＹＣＸ０３８）
作者简介：王晓艳（１９８８－），女，博士，主管药师，研究方向：中药临
床合理用药与脂质代谢，Ｅ ｍａｉｌ：ｘｉａｏｙａｎ＿ｗａｎｇ１９８８＠１２６．ｃｏｍ
；唐进法（１９７４－），男，博士，主任药师，研究方向：中药质量评价与临床合理用药，通讯作者，Ｅ ｍａｉｌ：ａ０５１９＠１６３．ｃｏｍ
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０２１．０１．０２２
文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２１）０１－０１３６－０７中国图书分类号：Ｒ ３３２；Ｒ２８２ ７１；Ｒ２８９ １；Ｒ３４４ ３；Ｒ５８９ ２；Ｒ９７２ ６；Ｒ９７７ ６
摘要：目的 探讨五味子及配伍甘草对正常小鼠血脂及对肝脏ＴＧ合成途径的影响。方法 ＩＣＲ♂小鼠，按体重随机分为４组，即对照组（Ｃ）、五味子组（ＳＦ）、五味子－甘草（ＳＧ）１∶１和１∶１ ５组。Ｃ组灌胃生理盐水，ＳＦ、ＳＧ１∶１和
１∶１ ５组分别灌胃含五味子生药量为３ ９ｇ·ｋｇ－１
的提取
物，共计１０ｄ。生化法检测血清ＴＧ、ＴＣ、ＬＤＬ Ｃ、ＨＤＬ Ｃ水平及ＡＬＴ活性；ＥＬＩＳＡ检测肝脏ＦＡＳ、ＡＣＣ活性和ＧＰＡＴ、ＡＣＯ水平，免疫组化法检测肝脏ＳＲＥＢＰ １ｃ和ＰＰＡＲα蛋白表达。结果 与Ｃ组比，ＳＦ明显升高血清ＴＧ和ＴＣ水平，降低ＨＤＬ水平，病理学
可见较多脂肪空泡，少量炎性细胞浸润，升高ＡＣＣ活性和ＧＰＡＴ水平，上调肝脏ＳＲＥＢＰ １ｃ的表达，下调ＰＰＡＲα的表达。与ＳＦ相比，ＳＧ１∶１明显降低血清ＴＧ水平及ＡＬＴ活性，降低ＧＰＡＴ和ＡＣＯ水平；ＳＧ１∶１和１∶１ ５下调肝脏ＳＲＥＢＰ １ｃ的表达，上调ＰＰＡＲα的表达。结论 大剂量五味子可升高正常小鼠血清ＴＧ和ＴＣ，配伍甘草可调节ＴＧ合成途径相关蛋白而改善升高的血脂。关键词：五味子；甘草；高脂血症；甘油三酯；固醇调控原件结合蛋白 １ｃ；过氧化物酶体增殖物激活受体α
五味子ＳｃｈｉｓａｎｄｒａｅｃｈｉｎｅｎｓｉｓＦｒｕｃｔｕｓ为木兰科植物五味子Ｓ
ｃｈｉｓａｎｄｒａｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（Ｔｕｒｃｚ．）Ｂａｉｌｌ．的干燥成熟果实，习称“北五味子”。因其具有酸、苦、甘、辛、咸等五味而得名，具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心的功效，用于久嗽虚喘、梦遗滑精、遗尿尿频、久泻不止、自汗盗汗、津伤口渴、内热消渴、心悸失
眠［
１］
。课题组前期研究发现，五味子中活性最强的联苯环辛烯类木脂素－五味子素Ｂ（ＳｃｈｉｓａｎｄｒｉｎＢ，
ＳｃｈＢ），一次大剂量（０ １～２ｇ·ｋｇ－１
）给药，在一
定时间内（１２～９６ｈ）与临床高脂血症－脂肪肝－肝损伤的发病过程极为接近，且此过程可被临床常用
降血脂药－非诺贝特所逆转［２－４］。ＳｃｈＢ在人体中
的最佳日剂量尚未确定，药典规定五味子用量２～６ｇ，但有文献研究建议成人五味子剂量为０ ５～１ ５
ｇ，每天两次［５］，相当于ＳｃｈＢ每天２０～６０ｍｇ［６］。临
床上所用五味子剂量较大，远远超出了五味子的推荐用量，相当的ＳｃｈＢ的含量也超出了引起小鼠高脂血症的最低剂量的人的等效剂量（９７３ｍｇ），致使五味子存在诱发高脂血症和脂肪肝的潜在风险。 甘草ＧｌｙｃｙｒｒｈｉｚａｅＲａｄｉｘＥｔＲｈｉｚｏｍａ为豆科植物甘草Ｇ
ｌｙｃｙｒｒｈｉｚａｕｒａｌｅｎｓｉｓＦｉｓｃｈ．、胀果甘草Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉ ｚａｉｎｆｌａｔａＢａｔ．或光果甘草ＧｌｙｃｙｒｒｈｉｚａｇｌａｂｒａＬ．的干燥根和根茎，味甘、性
平，可缓和诸药之偏性，还能缓急止痛，顾护肝脏之气血，有“解毒之王”之称。临床上含五味子的中药方剂，多含甘草，如桂苓五味甘草汤含甘草半升，小青龙汤中甘草三两，养阴益气汤中含甘草１５ｇ，茵陈退黄汤中甘草３ｇ，各方中五味子－甘草配比用量不同。上述方剂临床应用并未发现脂代谢紊乱、诱发高脂血症和脂肪肝现象，或与甘草的“解毒”作用密切相关。
血液中甘油三酯（ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ，ＴＧ）主要有内源性和外源性两个途径，外源性途径是指食物中的脂肪在小肠分解为脂肪酸、甘油二酯和甘油一酯，当这些产物吸收入小肠细胞后合成ＴＧ，并和胆固醇一起
形成乳糜微粒，通过淋巴系统进入血液循环［７］。而
内源性途径则是在肝脏中进行，肝脏会将糖类转化成脂肪酸或从头合成脂肪酸，脂肪酸继而与甘油酯化形成ＴＧ，最后与载脂蛋白Ｂ等脂蛋白装配形成极
低密度脂蛋白，并分泌入血［８］。而固醇调控原件结
合蛋白 １ｃ（ｓｔｅｒｏｌｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｅｌｅｍｅｎｔ ｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ １ｃ，ＳＲＥＢＰ １ｃ）和过氧化物酶体增殖物激活受体α（ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ ａｃｔｉｖｉａｔｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒ α，ＰＰＡＲα）是ＴＧ合成途径中重要的调控因子，通过对其下游
·６
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靶基因的调节，进而影响脂肪酸和ＴＧ的合成。
基于此，本实验拟以五味子和甘草为研究对象，观察大剂量五味子对正常小鼠血脂的影响，同时观察配伍甘草后的血脂变化，以期为五味子临床合理应用提供数据支撑。并针对ＴＧ的合成途径进一步探讨其调脂的作用机制。
１ 材料与方法
１．１ 仪器 Ｎｅｏｆｕｇｅ１６００Ｒ型低温台式高速离心机（上海力申科学仪器有限公司）；ＭｕｌｔｉｓｋａｎＦＣ型酶标仪（赛默飞世尔科技公司）；ＥＣＬＩＰＳＥ８０ｉ型显微镜（日本尼康）；Ｒｍ ２２３５型石蜡切片机（德国莱卡公司）；ＴＬ ８２０型冰冻切片机（湖北泰维科技实业有限公司）；ＥＧ１１５０Ｈ型包埋机（德国莱卡公司）。１．２ 试剂 ＴＧ（批号２０１９０６１５）、总胆固醇（ｔｏｔａｌｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ，ＴＣ，批号２０１９０６１５）、高密度脂蛋白胆固醇（ｈｉｇｈ ｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ，
ＨＤＬ Ｃ，批号２０１９０３１６）、低密度脂蛋白胆固醇（ｌｏｗ ｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏ ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ，ＬＤＬ Ｃ，批号２０１９０３１８）、丙氨酸转氨酶（ａｌａｎｉｎｅａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＡＬＴ，批号２０１９０３２０）试剂盒均购自南京建成生物工程研究所；脂肪酸合成酶（ｆａｔｔｙａｃｉｄｓｙｎｔｈａｓｅ，ＦＡＳ，批号０９１１Ｅ１９）、乙酰辅酶Ａ羧化酶（ａｃｃｔｙｌ ＣＯＡｃａｒｂｏｘｙｌ ａｓｅ，ＡＣＣ，批号０９１１Ｅ１９）、乙酰基辅酶Ａ氧化酶（ａｃｙ ＣｏＡｏｘｉｄａｓｅ，ＡＣＯ，批号０９１１Ｅ１９）、甘油三磷酸酰基转移酶（Ｇｌｙｃｅｒｏｌｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅａｃｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＧＰＡＴ，批号０９１１Ｅ１９）ＥＬＩＳＡ试剂盒均购自上海茁彩生物科技有限公司；ＳＲＥＢＰ １ｃ（货号ａｂ２８４８１）抗体购自ａｂｃａｍ公司；ＰＰＡＲα（货号ＧＢ１１１６３）购自武汉塞维尔生物科技有限公司。
１．３ 药物与其制备 五味子（批号１９０６０１０２，郑州瑞龙制药股份有限公司）；甘草（批号１９０８０１０１，郑州瑞龙制药股份有限公司）；称取五味子及五味子－甘草不同配比（１∶１、１∶１ ５）混合药材适量，粉碎，用５倍量８０％乙醇浸泡０ ５ｈ后，回流提取两次，第一次回流１ ５ｈ，第二次回流２ｈ。提取物过滤得滤液，合并滤液，用旋转蒸发仪回旋至无醇味后浓缩，得五味子醇提物及五味子－甘草不同配比浸膏。其中，五味子组浸膏生药含量为１ ４３ｇ·ｇ－１，五味子－甘草（１∶１）和五味子－甘草（１∶１ ５）浸膏中五味子生药含量分别为０ ４６５和０ ４
２８ｇ·ｇ－１。１．４ 动物分组与给药 ＩＣＲ小鼠，♂，体质量（２２ ４７±０ ６８）ｇ，ＳＰＦ级，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号为ＳＣＸＫ（京）２０１６ ０００６。本实验通过河南中医药大学第一附属医院实验动物伦理委员会批准（批准号ＹＦＹＤＷ２０１９００６）。
ＩＣＲ小鼠分为４组，分别为：正常对照组（Ｃｏｎｔｒｏｌ）、五味子组（ＳｃｈｉｓａｎｄｒａｅｃｈｉｎｅｎｓｉｓＦｒｕｃｔｕｓ，ＳＦ）和五味子－甘草配伍２个配比组（ＳｃｈｉｓａｎｄｒａｅｃｈｉｎｅｎｓｉｓＦｒｕｃｔｕｓ ＧｌｙｃｙｒｒｈｉｚａｅＲａｄｉｘＥｔＲｈｉｚｏｍａ，ＳＧ，１∶１，１∶１ ５），每组１０只。五味子－甘草配伍比例依据桂苓五味甘草汤（１∶１）及养阴益气汤（约１∶１ ５）。给药组均按照五味子药典规定临床等效剂量的５倍量（３ ９ｇ·ｋｇ－１）进行灌胃给药。对照组小鼠灌胃给予等体积的生理盐水，每日灌胃给药１次，连续１０ｄ共给药１０次。
１．５ 生化法检测血脂变化 末次给药８ｈ后，小鼠经眼眶取血，置于ＥＰ管中，室温静置２ｈ后，３５００ｒ·ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎ（４℃），取血清，－８０℃分装冻存。严格按照试剂盒说明书，检测小鼠血清ＴＧ、ＴＣ、ＨＤＬ、ＬＤＬ含量。
１．６ 生化法检测肝功能变化 取出分装冻存的血清至室温，严格按照试剂盒说明书，利用酶标仪检测血清中ＡＬＴ活性。
１．７ 肝脏病理学检查 取血后立即取出肝脏，取同一部位的肝脏组织块约０ ５ｃｍ３，迅速投入１０％的中性福尔马林中充分固定。固定４８ｈ以上的小鼠肝脏组织，制备常规肝脏病理学切片，ＨＥ染色后，观察其病理学变化。
１．８ 酶联免疫吸附法检测肝脏ＦＡＳ、ＡＣＣ酶活性和ＧＰＡＴ、ＡＣＯ水平 各组肝脏组织，用生理盐水经组织匀浆机研磨成组织匀浆，４℃，４０００ｒ·ｍｉｎ－１离心１５ｍｉｎ后，取上清液，采用ＥＬＩＳＡ法，严格按照试剂盒说明书，利用酶标仪对肝脏ＦＡＳ、ＡＣＣ活性和ＧＰＡＴ、ＡＣＯ水平进行检测。
１．９ 免疫组化法检测肝脏受体ＳＲＥＢＰ １ｃ、ＰＰＡＲα蛋白表达 采用免疫组化法检测肝脏组织中ＳＲＥＢＰ １ｃ、ＰＰＡＲα蛋白的表达。切片脱蜡至水，ＰＢＳ冲洗３×５ｍｉｎ。柠檬酸抗原修复５～１０ｍｉｎ，自然冷却。ＰＢＳ浸泡５ｍｉｎ，３次（３×５ｍｉｎ）。３％Ｈ
２
Ｏ
２
封闭内源性过氧化物酶，室温２０ｍｉｎ。ＰＢＳ浸泡５ｍｉｎ，３次。滴加一抗（１∶１００）５
０μＬ／片，４℃过夜。ＰＢＳ浸泡５ｍｉｎ，３次。滴加ＨＲＰ标记二抗５０μＬ／片，３７℃孵育３０ｍｉｎ，ＰＢＳ浸泡５ｍｉｎ，３次。ＤＡＢ显色，显微镜下控制，自来水中止。苏木精复染，梯度酒精（８０％－９５％Ⅰ－９５％Ⅱ－１００％Ⅰ－１００％Ⅱ）脱水，二甲苯（Ｉ和ＩＩ）透明，中性树胶进行封片，置于光学显微镜下进行观察并拍照，ＩｍａｇｅＰｒｏＰｌｕｓ６ ０软件分析平均吸光度值。
１．１０ 统计学方法 采用ＳＰＳＳ２０软件对数据进行统计分析，计量资料多组间比较采用单因素方差分
·
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３
１
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中国药理学通报 ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ ２０２１Ｊａｎ；３７（１）
析（Ｏｎｅ ｗａｙＡＮＯＶＡ），两组间比较用ｔ检验。２ 结果
２．１ 血脂变化 与Ｃｏｎｔｒｏｌ相比，ＳＦ组小鼠血清ＴＧ和ＴＣ水平明显升高（Ｐ＜０ ０５），血清ＨＤＬ水平明显降低（
Ｐ＜０ ０５）。与ＳＦ相比，ＳＧ１∶１可明显降低血清ＴＧ水平（Ｐ＜０ ０５）。见Ｔａｂ１。
２．２ 肝功能变化 与Ｃｏｎｔｒｏｌ组比，ＳＦ组小鼠血清ＡＬＴ活性明显升高，但无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。与ＳＦ组相比，ＳＧ１∶１ ５可明显降低血清ＡＬＴ活性（
Ｐ＜０．０５）。见Ｆｉｇ１
。
Ｆｉｇ１ ＡｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓｅｒｕｍＡＬＴ（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
＃Ｐ＜０．０５ｖｓＳＦｇｒｏｕｐ
２．３ 肝脏组织病理学变化 在光镜下，对照组可见细胞形态规则，肝小叶结构正常，细胞质均匀，肝细胞自中央静脉为中心，呈放射状排列，伸向肝小叶周边部，肝血窦窦间隙清晰；五味子组肝小叶轮廓不清晰，中央静脉周围肝细胞条索少见，肝细胞内出现较多的脂肪空泡，散布在整个胞质中，小叶内有少量炎性细胞浸润；五味子－甘草１∶１组部分肝细胞结构异常，中央静脉周围肝细胞索少见，部分细胞内可见较大的脂肪空泡；五味子－甘草１∶１ ５组肝细胞条索依稀可见，有部分细胞内存在少量的脂肪空泡。见Ｆｉｇ２Ａ－Ｄ。
２．４ 肝脏组织ＦＡＳ、ＡＣＣ活性和ＧＰＡＴ、ＡＣＯ水平变化 与Ｃｏｎｔｒｏｌ组比，ＳＦ组小鼠ＡＣＣ活性和ＧＰＡＴ水平明显升高（Ｐ＜０ ０５，Ｐ＜０ ０１）；ＳＧ１∶１
和ＳＧ１∶１ ５组小鼠ＧＰＡＴ水平明显升高（Ｐ＜０ ０５，Ｐ＜０ ０１）；ＳＧ１∶１和ＳＧ１∶１ ５组小鼠ＡＣＯ水平明显降低（Ｐ＜０ ０１）。与ＳＦ相比，ＳＧ１∶１组ＧＰＡＴ和ＡＣＯ水平明显降低（Ｐ＜０ ０５，Ｐ＜０ ０１）。见Ｔ
ａｂ２
大马士革机场爆炸
北京少儿英语
海上钢琴师中英双字
。Ｆｉｇ２ Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆｌｉｖｅｒ（×２００）（ｎ＝４） Ａ：Ｃｏｎｔｒｏｌ；Ｂ：ＳＦ；Ｃ：ＳＧ（１∶１）；Ｄ：ＳＧ（１∶１．５）预科生是什么意思
２．５ 肝脏组织ＳＲＥＢＰ １ｃ、ＰＰＡＲα蛋白表达变化 ＳＲＥＢＰ １ｃ蛋白阳性表达为棕褐色。ＳＦ小鼠ＳＲＥＢＰ １ｃ颜色较深，图像分析结果表明，蛋白表达
量较对照组明显上调（Ｐ＜０ ０１）。ＳＧ１∶１和１∶１ ５组棕褐色较五味子组浅，图像分析结果表明，ＳＲＥＢＰ １ｃ蛋白表达量较ＳＦ组明显下调（Ｐ＜０ ０５，Ｐ＜０ ０１）。见Ｆｉｇ３。
ＰＰＡＲα蛋白阳性表达为棕褐色。结果可见，Ｃｏｎｔｒｏｌ组小鼠ＰＰＡＲα蛋白表达量较多，ＳＦ组小鼠较对照组阳性表达减少，图像分析结果表明，ＰＰＡＲα蛋白表达明显降低（Ｐ＜０ ０１），ＳＧ１∶１和１∶１ ５组阳性染色较五味子组增多，图像分析结果表明ＰＰＡＲα蛋白表达较ＳＦ组明显增多（Ｐ＜０ ０５，Ｐ＜０ ０１）。见Ｆｉｇ４。３ 讨论
现代研究表明五味子在中枢系统、心血管系统、肾脏和生殖系统等方面应用广泛，具有保护肝脏、抗
氧化、抗肿瘤、抑菌、降血脂和抗炎等作用［９］
honest是什么意思，并有研究表明五味子具有“适应原”样作用［１０］，在中枢系
统具有“双向调节”作用。而作为五味子中含量最
Ｔａｂ１ ＩｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆＳｃｈｉｓａｎｄｒａｅＦｒｕｃｔｕｓａｎｄｃｏｍｐａｔｉｂｌｅｗｉｔｈＧｌｙｃｙｒｒｈｉｚａｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆｓｅｒｕｍ
ＴＧ，ＴＣ，ＨＤＬａｎｄＬＤＬｉｎｎｏｒｍａｌｍｉｃｅ（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
Ｇｒｏｕｐ
ＴＧ／ｍｍｏｌ·Ｌ－１
ＴＣ／ｍｍｏｌ·Ｌ－１
ＨＤＬ／ｍｍｏｌ·Ｌ－
１ＬＤＬ／ｍｍｏｌ·Ｌ－１
Ｃｏｎｔｒｏｌ１．２９±０．３４５．３０±０．４６３．０２±０．５２０．９６±０．４１ＳＦ１．６４±０．０３
６．１８±１．３８ ２．４７±０．５０ ０．９３±０．２６ＳＧ（１∶１）１．１５±０．４４＃
５．１８±０．８６２．７２±０．４２０．７２±０．２９ＳＧ（１∶１．５）
１．３８±０．２７
５．０４±１．０７
２．２２±０．４１
０．７７±０．２４
Ｐ＜０．０５ｖｓｃｏｎｔｒｏｌ；＃Ｐ＜０．０５ｖｓＳＦ
·
８３１·中国药理学通报 ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ ２０２１Ｊａｎ；３７（１）
Ｔａｂ２ ＩｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆＳｃｈｉｓａｎｄｒａｅＦｒｕｃｔｕｓａｎｄｃｏｍｐａｔｉｂｌｅｗｉｔｈＧｌｙｃｙｒｒｈｉｚａｏｎａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ
ｏｆｌｉｖｅｒＡＣＣａｎｄＦＡＳａｎｄＧＰＡＴ，ＡＣＯｌｅｖｅｌｓｉｎｎｏｒｍａｌｍｉｃｅ（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
ＧｒｏｕｐＡＣＣ／ＫＵcoms
·Ｌ－１
ＦＡＳ／Ｕ·Ｌ－１
ＧＰＡＴ／μｇ·Ｌ－１
ＡＣＯ／μｇ·Ｌ－１
Ｃｏｎｔｒｏｌ７．８６±０．５２５９．３１±４．７６
４．４８±０．２９４．７０±０．３３
ＳＦ８．６６±０．９２ ６１．２７±４．８７５．１８±０．４２
４．５３±０．５３
ＳＧ（１∶１）７．９８±０．８３
５７．０７±７．８０４．７９±０．３１
＃
４．０３±０．３２ ＃ＳＧ（１∶１．５）
８．４７±１．０１６１．３３±５．９６
５．４４±０．２８
４．１９±０．３６
Ｐ＜０．０５，
Ｐ＜０．０１ｖｓｃｏｎｔｒｏｌ；＃Ｐ＜０．０５ｖｓＳ
Ｆ
Ｆｉｇ３ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｌｉｖｅｒｔｉｓｓｕｅＳＲＥＢＰ １ｃｐｒｏｔｅｉｎｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙ
ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
（×４００）（珋ｘ±ｓ，ｎ＝４） Ａ：Ｃｏｎｔｒｏｌ；Ｂ：ＳＦ；Ｃ：ＳＧ（１∶１）；Ｄ：ＳＧ（１∶１．５）； Ｐ＜０ ０１ｖｓＣｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ；＃Ｐ＜０ ０５，＃＃Ｐ＜０ ０１ｖｓＳＦｇｒｏｕｐ
高的联苯环辛烯类木脂素，ＳｃｈＢ（５０～２００ｍｇ·
ｋｇ－１）小剂量可降低高胆固醇血症小鼠肝脏ＴＣ和ＴＧ的含量，一次大剂量给药能时间和剂量依赖性的
升高小鼠血ＴＧ含量，并伴随肝ＴＧ含量升高［２－３］
英汉 翻译
，存在“双向调节”作用。前期研究发现，低剂量五味子醇提物可降低高胆固醇血症小鼠血清和肝脏ＴＧ
含量［１１］
，本实验发现高剂量的五味子可升高正常小鼠血ＴＧ和ＴＣ含量，说明五味子在调节血脂方面存在“双向调节”作用。
中药剂量是指临床应用时的分量，它主要指明了每味药的成人一日量。其次指方剂中每味药之间的比较分量，也即相对剂量。准确地掌握用药剂量是确保用药安全、有效的重要因素之一。
由于诸多
Ｆｉｇ４ ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｌｉｖｅｒｔｉｓｓｕｅＰＰＡＲαｐ
ｒｏｔｅｉｎｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（×４００）（珋ｘ±ｓ，ｎ＝４）
Ａ：Ｃｏｎｔｒｏｌ；Ｂ：ＳＦ；Ｃ：ＳＧ（１∶１）；Ｄ：ＳＧ（１∶１．５）；
Ｐ＜０ ０１ｖｓＣｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ；＃Ｐ＜０ ０５，＃＃Ｐ＜０ ０１ｖｓＳＦｇｒｏｕｐ
原因，中药饮片超剂量应用现象越来越普遍，由此直接导致了我国中药资源的大量浪费，并且有研究报道超剂量使用与不良反应的发生存在一定的关联性，进而导致中药饮片的不良反应发生率日益增多。中药的配伍应用是中医用药的主要形式，其作用是综合性的表现，并非指所有组成药物的功效和剂量的简单组合，通过配伍可提高药效、降低毒副作用、适应复杂病情、扩大治疗范围并预防药物性中毒。本实验结果显示，与五味子组比，五味子－甘草１∶１组血清ＴＧ含量明显降低，表明甘草与五味子配伍可明显降低大剂量五味子诱发高甘油三酯血症的风险。
ＨＤＬ和ＬＤＬ是体内运载磷脂和胆固醇最重要的蛋白。ＨＤＬ具有逆向运输胆固醇功能，即将肝外
·９
３１·中国药理学通报 ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ ２０２１Ｊａｎ；３７（１）
组织中过多的胆固醇从外周组织转运到肝脏进行代谢，通过胆汁酸或者直接通过胆汁从肠道排出，以防胆固醇在这些组织中过多地聚集，因此被认为是好的脂蛋白［１２］。ＬＤＬ由ＶＬＤＬ转变而来，能将肝脏中的ＴＣ转移到外周组织（如血管壁），易造成动脉粥样硬化，从而增加了冠心病的危险性，通常被称为坏的脂蛋白［１３］。本实验结果显示，大剂量五味子可明显降低血清ＨＤＬ水平，可能为其升高血清ＴＣ含量的机制之一。
ＳＲＥＢＰ １ｃ和ＰＰＡＲα在ＴＧ合成途径中发挥重要作用［１４］。肝脏中ＳＲＥＢＰ １ｃ作为负责调解脂肪酸和甘油三酯的重要调控蛋白，主要通过调节其下游多种参与脂肪酸和甘油三酯合成酶的靶基因，包括ＡＣＣ、ＦＡＳ、ＧＰＡＴ等的表达来调节肝脏中ＴＧ的合成。ＡＣＣ作为脂肪酸合成的限速酶，与脂肪合成速率密切相关；而ＦＡＳ是内源性脂肪酸合成的关键酶，在机体脂质沉积过程中发挥重要作用［１５］。ＧＰＡＴ是ＴＧ合成的关键限速酶之一，研究报道［１６］，敲除ＧＰＡＴ基因可以减少小鼠肝脏ＴＧ沉积并改善肝脏胰岛素抵抗。本实验结果显示，五味子组小鼠表现为肝脏ＳＲＥＢＰ １ｃ蛋白表达量、ＡＣＣ活性和ＧＰＡＴ水平明显升高，说明五味子增加肝脏中ＴＧ合成的机制可能是通过增强肝脏ＳＲＥＢＰ １ｃ蛋白的表达，并上调肝脏ＡＣＣ活性及ＧＰＡＴ含量。与五味子比，五味子－甘草１∶１组ＧＰＡＴ水平明显降低，说明甘草配伍五味子降低五味子升
高的ＴＧ含量可能与调节ＧＰＡＴ有关。
ＰＰＡＲα作为一类能被过氧化物酶体增殖物激活的核转录因子，主要通过影响脂蛋白及长链脂肪酸的代谢，进而调控脂质代谢，研究表明，ＰＰＡＲα激活后，可直接增加脂肪酸的氧化，减少脂肪的积聚，维持内环境的稳定［１７］，同时可上调其下游基因ＡＣＯ的表达，从而降低ＴＧ的合成水平。ＡＣＯ作为脂肪酸β－氧化反应的关键酶之一，可催化肝脏细胞内脂滴的氧化分解过程［１８］。实验结果发现，五味子组小鼠肝脏ＰＰＡＲα蛋白表达量明显降低，ＡＣＯ水平有降低趋势，五味子－甘草１∶１和１∶１ ５组ＰＰＡＲα蛋白表达量较五味子组明显升高，表明甘草通过上调ＰＰＡＲα蛋白的表达，从而加速脂肪酸的β氧化分解，最终可减少高剂量五味子诱发的ＴＧ合成增加。
综上表明，高剂量的五味子一方面增加ＴＧ的合成速度，其机制可能是增加肝脏中ＳＲＥＢＰ １ｃ的蛋白表达，上调脂肪酸合成过程的限速酶ＡＣＣ活性和ＴＧ合成过程中关键酶ＧＰＡＴ含量；另一方面，降低脂肪酸的β氧化，增加ＴＧ在肝脏中的沉积，其机制可能为下调肝脏ＰＰＡＲα蛋白的表达，降低脂肪酸β 氧化途径的关键酶ＡＣＯ的活性。通过以上两种途径联合增加肝脏中ＴＧ的合成，诱发高脂血症，而甘草配伍五味子后可通过调节ＴＧ合成途径相关蛋白，降低五味子诱发的高脂血症风险。由此说明，临床应用五味子时需对其用药剂量慎重考虑，建议配伍同等剂量的甘草，避免其在血脂方面的“双向调节”作用，为五味子的临床合理应用提供数据支撑。 （致谢：本实验在河南中医药大学第一附属医院中药临床评价技术河南省工程实验室、中药药代动力学实验室开展，感谢各位老师和
同学的帮助。）
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