一种抑制麦角菌的酶酸复合制剂及其应用的制作方法
1.本发明属于饲料添加剂技术领域，具体涉及一种抑制麦角菌的酶酸复合制剂及其应用。
背景技术：
2.饲料原料常见的霉菌毒素来源有：曲霉菌属(aspergillus，主要分泌黄曲霉毒素等)、青霉菌属(penicillium，主要分泌赭曲霉毒素、桔霉素等)、镰刀菌属(fusarium，主要分泌呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、t-2毒素等)和麦角菌属(主要分泌麦角毒素)等。霉菌的大量繁殖会引起饲料发生霉变，这不仅会使饲料的适口性降低，而且还会影响畜禽的采食量，同时由于霉菌的生长和繁殖是通过饲料中的营养成分来供给，因此霉变还会降低饲料的营养价值。另外，霉菌在代谢过程中产生霉菌毒素，而霉菌毒素在畜禽采食后不仅会影响畜禽的免疫机能，高剂量的霉菌毒素还会导致畜禽发生中毒现象。据统计，有66％以上的饲料原料至少存在1种霉菌毒素污染，35％的饲料原料存在2种以上霉菌毒素污染，而玉米粕、豆粕及麸皮等霉菌毒素的含量是整粒谷物含量的30～500倍，几乎所有的花生粕都存在霉菌毒素污染，饲料霉变严重危害饲料业及畜牧业。
3.为此，急需开发能够抑制饲料原料中有害霉菌的绿产品，以提高饲料产品的安全性，减少公共危害。
技术实现要素：
4.本发明的目的是克服饲料霉变严重危害饲料业及畜牧业的问题。
5.为此，本发明提供了一种抑制麦角菌的酶酸复合制剂，包括：6-8份葡萄糖氧化酶、2-4份乳酸制剂和0-2份载体。
6.具体的，上述葡萄糖氧化酶的酶活为8000u/g。
7.具体的，上述乳酸制剂中乳酸的质量浓度为20％-25％。
8.具体的，上述载体为淀粉。
9.本发明还提供了一种抑制饲料中麦角菌生长繁殖的方法，包括以下步骤：将上述的酶酸复合制剂加入到生理盐水中，摇床提取后离心取上清液，得到酶酸复合制剂溶液，将所述酶酸复合制剂溶液加入到饲料中混匀。
10.具体的，以饲料质量计，上述酶酸复合制剂溶液的添加量为0.08％-1.6％。
11.与现有技术相比，本发明具有以下优点和有益效果：
12.本发明提供的这种抑制麦角菌的酶酸复合制剂可显著抑制麦角菌的生长繁殖，将其作为添加剂加入饲料中，能够从源头抑制麦角菌，有效去除饲料中麦角毒素的累积，避免霉菌毒素的危害。
13.以下将结合附图对本发明做进一步详细说明。
附图说明
14.图1是本发明实施例4中不同试验组麦角菌生长情况；a、试验组1；b、试验组2、c、试验组3；d、试验组4；e、试验组5；f、试验组6；g、阳性对照；h、阴性对照。
15.图2是本发明实施例4中不同对照组麦角菌生长情况；a、对照组1；b、对照组2；c、对照组3；d、对照组4。
具体实施方式
16.下面将结合实施例对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。尽管已经详细描述了本发明的代表性实施例，但是本发明所属技术领域的普通技术人员将理解，在不脱离本发明范围的情况下可以对本发明进行各种修改和改变。因此，本发明的范围不应局限于实施方案，而应由所附权利要求及其等同物来限定。
17.下面通过具体实施例对本发明的抑制麦角菌的酶酸复合制剂的效果进行研究。
18.实施例1：
19.本实施例提供了一种抑制麦角菌的酶酸复合制剂，其通过以下方法制备：
20.取葡萄糖氧化酶7份，乳酸制剂3份，淀粉1份，混合后得到酶酸复合制剂。酶酸复合制剂中葡萄糖氧化酶的酶活为8000u/g，乳酸制剂中乳酸的质量浓度为25％。
21.实施例2：
22.本实施例提供了一种抑制麦角菌的酶酸复合制剂，其通过以下方法制备：
23.取葡萄糖氧化酶6份，乳酸制剂4份，淀粉2份，混合后得到酶酸复合制剂。酶酸复合制剂中葡萄糖氧化酶的酶活为8000u/g，乳酸制剂中乳酸的质量浓度为25％。
24.实施例3：
25.本实施例提供了一种抑制麦角菌的酶酸复合制剂，其通过以下方法制备：
26.取葡萄糖氧化酶8份，乳酸制剂2份，混合后得到酶酸复合制剂。酶酸复合制剂中葡萄糖氧化酶的酶活为8000u/g，乳酸制剂中乳酸的质量浓度为20％。
27.实施例4：
28.本实施例研究了酶酸复合制剂对麦角菌的抑制作用，具体步骤如下。
29.(1)配制培养基
30.pda培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g，蒸馏水补足至1000ml。
31.ypd液体培养基：1％酵母膏，2％蛋白胨，2％葡萄糖。
32.(2)实验试剂配制
33.制备酶酸复合制剂溶液：称取1g实施例1提供的酶酸复合制剂，加入99ml灭菌的生理盐水，于摇床提取30min，离心取上清，再用灭菌生理盐水稀释至不同浓度，备用。
34.制备麦角菌菌悬液的：将分离于黑麦的麦角菌接种于pda斜面上，置于25℃培养72h，从斜面洗脱菌液备用。
35.制备葡萄糖氧化酶溶液：称取1g酶活为8000u/g的葡萄糖氧化酶，加入99ml灭菌的生理盐水，于摇床提取30min，离心取上清，再用灭菌生理盐水稀释至不同浓度，备用。
36.制备乳酸溶液：称取1g乳酸制剂，加入99ml灭菌的生理盐水，于摇床提取30min，离心取上清，再用灭菌生理盐水稀释至不同浓度，备用。
37.(3)摇瓶混菌
38.取8个摇瓶作为阴性对照组、阳性对照组和试验组1-6，每个摇瓶中分装50ml的ypd培养基，各组中酶酸复合制剂溶液和麦角菌菌悬液的添加量如下，其中酸酶复合制剂的浓度为相对于ypd培养基体积的体积浓度。
39.阳性对照：加入2ml的麦角菌菌悬液；
40.阴性对照：加入2ml经煮沸5分钟灭活的麦角菌菌悬液；
41.试验组1：加入2ml的麦角菌菌悬液和浓度为0.08％的酶酸复合制剂溶液；
42.试验组2：加入2ml的麦角菌菌悬液和浓度为0.16％的酶酸复合制剂溶液；
43.试验组3：加入2ml的麦角菌菌悬液和浓度为0.32％的酶酸复合制剂溶液；
44.试验组4：加入2ml的麦角菌菌悬液和浓度为0.48％的酶酸复合制剂溶液；
45.试验组5：加入2ml的麦角菌菌悬液和浓度为0.64％的酶酸复合制剂溶液；
46.试验组6：加入2ml的麦角菌菌悬液和浓度为1.6％的酶酸复合制剂溶液；
47.对照组1：加入2ml的麦角菌菌悬液和浓度为0.08％的葡萄糖氧化酶溶液；
48.对照组2：加入2ml的麦角菌菌悬液和浓度为1.6％的葡萄糖氧化酶溶液；
49.对照组3：入2ml的麦角菌菌悬液和浓度为0.08％的乳酸溶液；
50.对照组4：加入2ml的麦角菌菌悬液和浓度为1.6％的乳酸溶液。
51.将各组均置于25℃摇床培养72h，观察麦角菌的生长情况，结果如图1-2所示。阳性对照组和对照组1-4中麦角菌生长旺盛，成团块状；试验组1-6基本同阴性对照一样未见麦角菌生长，瓶中漂浮的菌体为取样时加入的菌体本身。检测各试验组和对照组对麦角菌dsm715抑菌率，结果如表1所示。
52.表1抑菌率检测结果
[0053] 抑菌率试验组1100％试验组2100％试验组3100％试验组4100％试验组5100％试验组6100％对照组10对照组20对照组30对照组40
[0054]
由表1和图1可见，添加有本发明提供的酶酸复合制剂的6个试验组对麦角菌的生长抑制效果显著，实际使用时，产品的添加量建议为0.08％及以上。
[0055]
以上例举仅仅是对本发明的举例说明，并不构成对本发明的保护范围的限制，凡是与本发明相同或相似的设计均属于本发明的保护范围之内。
