旷场实验

检查使用情况登记表

行为学使用者违反的条例违反的条例违反的条例登记人及时间

注明：登记时写清楚违反了上述规定中哪一条（共八条）。达到三次不予使用。

EthovisionXT8操作手册

1.双击桌面图标“EthovisionXT8”；按标签接通实验的摄像头通路，并接通摄像头电源。

2.建立新的实验文件：

Createanewexperiment——newtemplateexperiment——applyapre-definedtemplate

——选择livetracking；选择摄像头通路（点击source—右下角editttings—选择摄像头）

——ok——选择动物种类——选择实验类型，如下

实验Numberofarenas

morriswatermaze水迷宫1

openfield，rectangleopenfield，rectangle4（2x2）

elevatedplusmazeelevatedplusmaze高架十字迷宫1

noarenatemplate悬尾强迫游泳以及黑白箱1

——选择动物标记中心点；选择动物颜色——记录速率recommended（mou25，rat15）——name，

文件夹放置在data（E:）。

mentttings：

注意units：实验中所用单位，一般cm、s、deg，不用更改。

ist:

Addtrials：openfield一个trial四只动物；watermaze四个trial一只动物；余一个trial一只

动物；

Addvariable：增加动物变量参数。

ettings

Grabimagefromcamera——grab——先定义每只动物的整个活动区，再定义区内分组——标定尺寸。

（水迷宫定义arena，platform，qunrants；openfield可定义arena4个、每个group又可定义四周、

四角、中央区；悬尾定义水面上、水面下；）（水迷宫必须在水放好、平台位置摆好、强迫游泳的水放

好、玻璃缸位置放好后，才能grab定义分区；如果改变需要重新grab。）

ontrolttings（模式软件打开默认）：

基本模式：Rulebegin——condition（duration≥1s）——action（starttrack）——condition

（afteradelayof试验时间）——action（stoptrack）——ruleend（start-stoptrial）；

水迷宫模式：Rulebegin——action（starttrack）——onplatform10s（inzone）并timecondition

≥2min——operater第一项——action（stoptrack）——ruleend（start-stoptrial）。

ion

依次选择：dynamicsubtraction；model-badXT5（默认勿动）；subject颜色；检测动物；即开始

实验。

edtrials

双击trail1——playback播放，观察路径——右侧窗口栏可更改标记中心点、path、filter时

间。

isprofiles（主要参数，仅供参考）

黑白箱：distancemoved、velocity、inzone（各区时间）；

Watermaze：distancemoved、velocity、inzone（inquandrants）、movement等

Openfield：distancemoved、velocity、movement、inzone等

强迫游泳：notmovement

悬尾：

is：自动计算结果

：数据结果与图片

12.清洁：做完实验一定要记得清洁，清洁完自己先检查下，保证没有脏水、没有排泄物、没有垫料、没

有气味。最后喷杀虫剂关灯离开。

附：

Watermaze实验方案（仅供参考，请根据自己实验查文献）：

Morris水迷宫（Morriswatermaze,MWM）实验是一种强迫实验动物（大鼠、小鼠）游泳，学习寻找隐藏

在水中平台的一种实验，Morris水迷宫视频分析系统主要用于测试实验动物对空间位置感和方向感（空间

定位）的学习记忆能力，被广泛应用于学习记忆、老年痴呆、海马/外海马研究、智力与衰老、新药开发/

筛选/评价、药理学、毒理学、预防医学、神经生物学、动物心理学及行为生物学等多个学科的科学研究

和计算机辅助教学等领域，在世界上已经得到广泛地认可，是医学院校开展行为学研究尤其是学习与记忆

研究的首选经典实验。实验中注意：1.水温恒定（25-30℃）2、季节影响大。

【实验方案】

1、morris泳池注水，放置逃生平台（水面下约1cm，某象限正中央），小鼠小泳池，大鼠大泳池。

2、根据实验需要，用奶粉将泳池水变成白色，鼠头部染成黑色，实验关灯关门。实验中必须对动物动作

轻柔。实验池上我已经用红色标签纸标明四个象限、四个放鼠的位置。请不要随意移动大鼠池子的位

置。实验前可以打开暖气保证房间温度；实验每天结束后请打开冷气（尤其夏天，冬天是情况定），以

免味道发散；实验彻底结束后，池子放水到最后，必须得人工用拖把抹布弄干，务必保证人离开时，

池子是干的、干净的，否则可能生锈。

3、实验方案：

定位航行（固定逃生平台）

1）、第一天（获得性训练）：将动物（大鼠或小鼠）头朝池壁在象限弧度1/2处轻柔放入水中（入水

即开始实验），放入位置随机取四个象限起始位置之一。记录动物找到水下平台的时间（s）。在训练中，

如果这个时间超过60s，则引导动物到平台。让动物在平台上停留10s.每只动物入水一次，将动物移开、

擦干，必要时将动物（尤其是大鼠）放在150W的白炽灯下烤5min，放回笼内（可以在走廊烘干做过trial

的鼠）。每只动物两次入水时间间隔15-20min。每只动物每天训练4次（即四个象限），可一个象限做完一

批动物后，再开始下个象限。如此,连续训练4天。系统自动记录逃避潜伏期（入水至登陆平台的时间）。

2）、第五天（探查训练probetrial）：获得性训练结束后的第二天（即24h后），将平台撤除，开始

60s的探查训练。将动物由原先平台象限的对侧放入水中。记录动物在目标象限（原先放置平台的象限）

所花的时间和进入该象限的次数，以此作为空间记忆的检测指标.（第一天让动物知道有平台存在，只分

析第二天至第六天的数据）。也有文献每次入水训练2min，可根据实验选择。

定位航行（移动逃生平台第一种方案）——考查学习记忆的灵活性、工作记忆

3）、测定动物的工作记忆（workingmemory-spatialreversal）。探查训练结束后的第二天，开始

维持4天的对位训练。将平台放在原先平台所在象限的对侧象限，方法与获得性训练相同。每天训练4次。

每次记录找到平台的时间和游泳距离以及游泳速度，也可观察在原先平台象限的轨迹数据。

4）、测定动物的工作记忆的探查训练（workingmemory-spatialreversal）：接下来的一天，将平台

撤除，开始60s的探查训练。将动物由原先平台象限的对侧放入水中。记录动物在目标象限（原先放置平

台的象限）所花的时间和进入该象限的次数。

定位航行（移动逃生平台第二种方案）——考查学习记忆的灵活性、工作记忆

每天变换平台的象限（剩余三个），每只动物从2个或2个以上的象限放入水中训练，一个

象限训练一天，一共三天。

注意：固定逃生平台为最基础训练，推荐使用。移动逃生平台使用渐渐普遍。

黑白箱

黑白箱实验系统利用动物避暗特性（趋黑箱）和探索特性（趋白箱）进行动物行为起源、精神药理学、

行为毒物学研究。啮齿类动物天生具有不喜欢明亮照明区域和自发探索新环境的倾向，使得黑白箱成为易

于使用的测试仪器，无需事先训练动物。黑白箱试验有助于预测抗焦虑类药物或促焦虑生成药物对小鼠或

大鼠行为的影响。已表明，与无焦虑特质的动物相比，焦虑动物会迅速转移到更黑的一面，并且极少离开

黑暗的一面。因此，更多时间在明亮端时，表示忧虑减轻。

【实验方案】：无需训练，直接放入白笼，开始记录5min。推荐：稳定性实验可连续做三天后统计结果，

退行性实验课相应延长天数。每只动物做完必须清理现场以免影响下次测验。

Openfield

观察实验动物在新异环境中的自主行为、探究行为与紧张度。

旷场实验（openfieldtest)是评价实验动物在新异环境中自主行为、探究行为与紧张度的一种方法。

以实验动物在新奇环境之中某些行为的发生频率和持续时间等，反应实验动物在陌生环境中的自主行为与

探究行为，以尿便次数反应其紧张度。

【实验方法与步骤】

实验在安静的环境下进行。将动物轻柔放入箱内底面中心，同时进行摄像和计时。观察15min（观察

时间可根据实验拟定）后停止摄像。清洗方箱内壁及底面，以免上次动物余留的信息（如动物的大、小便、

气味）影响下次测试结果。更换动物，继续实验。为了保证数据的可靠性，实验可连续进行三天（每天同

一时段）。

【观察指标】

根据实验选择，如总位移、速度、在某区域如中央区、四周、四角区内的位移、速度、时间等，动的

时间，不动的时间等等，具体分析。

高架十字迷宫

高架十字迷宫(Highplusmaze）是利用动物对新异环境的探究特性和对高悬敞开臂的恐惧形

成矛盾冲突行为来考察动物的焦虑状态。高架十字迷宫具有一对开臂和一对闭臂，啮齿类动物由于

嗜暗性会倾向于在闭臂中活动，但出于好奇心和探究性又会在开臂中活动，在面对新奇刺激时，动

物同时产生探究的冲动与恐惧，这就造成了探究与回避的冲突行为，从而产生焦虑心理。而抗焦虑

药物能明显增加进入开臂的次数与时间，十字迷宫距离地面较高，相当于人站在峭壁上，使实验对

象产生恐惧和不安心理。高架十字迷宫被广泛应用于新药开发/筛选/评价、药理学、毒理学、预防

医学、神经生物学、动物心理学及行为生物学等多个学科的科学-研究和计算机辅助教学等领域，

是开展行为学研究尤其是焦虑抑郁研究的经典实验。

【实验方法】

实验开始时将小鼠从中央格面向开放臂放入迷宫，记录5分钟内的活动情况。观察指标包括：

开放臂进入次数(必须有两只前瓜进入臂内)，开放臂停留时间，闭合臂进入次数，闭合臂停留时间、

探出头次数时间。。计算开放臂停留时间比例，开放臂进入次数比例，高架十字迷宫中总进入次数。

实验完成后将小鼠取出，将两臂清理干净，喷洒酒精除去气味。进入开放臂次数及停留时间与大鼠

的焦虑情绪成负相关，进入开放臂次数越少，停留时间越短，说明老鼠的焦虑情绪越严重。为了保

证数据的可靠性，实验可连续进行三天（每天同一时段）。

强迫游泳

强迫游泳实验系统主要用于抗抑郁、镇静以及止痛类药物的研究。该仪器适用于大鼠、小鼠或其他实

验室动物，强迫游泳实验通过将实验动物置于一个局限的环境中（如水中），动物在该环境中拼命挣扎试

图逃跑又无法逃脱，从而提供了一个无可回避的压迫环境，一段时间的实验后，动物即表现出典型的“不

动状态”，反映了一种被称之为“行为绝望状态”，强迫游泳实验记录处于该环境的动物产生绝望的不动

状态过程中的一系列参数。强迫游泳分析系统对实验过程录像并对图像跟踪分析，结果数据自动输出到PC

机，可对实验过程进行分析并可打印实验报告。可广泛用于大、中专医科院校、科研单位进行实验教学以

及抗抑郁类药物的研究工作。实验中注意：1.水温恒定（25-30℃）2、水深恒定（大鼠17-33cm，小鼠约

10cm）3、季节影响大

实验中可将强迫游泳中的行为分成4类:游泳(动物在水中四处游动)、攀爬(动物前爪划动水面，

碰触缸壁)、潜水(动物整个身体沉于水下)和不动(动物四肢不动漂浮于水面，仅头部露出水面呼

吸)。实验进行6min，主要观察最后4min中的不动时间。文献未报道数据需要重复三天。

悬尾实验

【实验方法】：实验进行6min，主要观察最后4min中的不动时间。文献未报道数据需要重复三天。

主要观察不动时间。

【实验中注意】：

1.探测动物时，确定no、center、tail三点监测的位置正确（tail在上、no在下）

2.绑尾巴时余留的线头要短，以免小鼠顺着线头爬上去；绑尾巴要绑在尾巴远侧三分之一处位置，

以免结松掉。勿使用活结。

所有行为学注意事项

（1）动物在24h内有其活动周期，故每次实验应选择在同一时间段内完成。

（2）实验应在隔音，光强度和温、湿度适宜且保持一致的行为实验室内进行，实验中动作轻柔。

（3）两次实验之间清洗实验设备，以免上次动物余留信息影响下次实验结果。

（4）所有实验做完都必须将现场清理干净，包括动物排泄物、气味、水等。