glu

血糖（GLU）方法学验证

验证时间：验证次数：验证人员：

一检测系统信息：

项目：血糖（GLU）

仪器名称：

仪器型号：

试剂及厂商：

检测方法：葡萄糖氧化酶法(GOD-PAP法)

二厂商的相关参数：

需验证参数厂家参数验证结果

分析灵敏度0.3mmol/L沿用厂家参数

分析测量范围0.3-25已验证

临床报告范围0.3-50已验证

参考区间3.1-6.2已验证

其他

参阅说明书版本批内精密度批间精密度

平均值标准差变易系数平均值标准差变易系数

厂家参数正常值

异常值

验证结果正常值

异常值

三验证过程

1．准确度（Accuracy）：

目的：通过检测数据与赋值材料数据的对比，得到实验室检测数据的偏倚，从而评价和验证

实验室检测结果的准确性。

评价方法：参加卫生部临检中心或和重庆市临检中心组织的室间质评，或者分析厂商提供的

已赋值的参考材料或质控品，检测结果参照厂商的说明，还可以分析多个实验室（10个以

上）参与质量控制过程所用的参考材料，检测结果与同行间的均值比较。本实验室已参加室

间质评的项目一律用回报结果作为评价指标，没有参加的项目通过室间比对来评价其准确

度。

最近一次参加的卫生部室间质评：

测定日期统计日期回报日期

校准物PT平均成绩平均VIS

各编号样本测定情况：（mmol/L）

样本编号我室测定

结果

靶值PT允许

范围

PT得分与靶值

偏倚

VIS允许

范围

VIS得分

201011

201012

201013

201014

201015

2．精密度（Precision）：

2．1批间精密度：

目的：考察候选方法的随机误差

方法：选择室内质控作为衡量批间精密度的依据。选择具有医学决定水平的正常及异常

质控品每天按照常规标本的方法一样测定，测定结果在遵照厂商参数不出控的前提下利用前

3个20天测定的数据逐步累积最终得出最适均值、标准差。以此作为判断今后该批号质控数

据是否在控的依据。

质控来源：大部分为厂家配套正常/异常值质控品。个别项目异常值采用留样复查的方

法来衡量是否符合临床检测精密度允许范围。

浓度一：

月份123单位

测定例数

均值

标准差

变易系数

浓度二：

月份123单位

测定例数

均值

标准差

变易系数

2．2批内精密度：

目的：考察候选方法的随机误差

方法：选择具有医学决定水平的高低值标本在相当短的时间内，按规定的操作方法，在

较短得时间内及稳定的条件下各作20次重复测定。计算其X、S与CV。

标本来源：除个别项目采用病人标本外其他项目均采用高低值配套质控品

浓度单位测定时间

低值标本来源

高值标本来源

测定结果：

测定次数血糖

正常值异常值

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

20

平均值

SD

CV%

试剂说明书上正常值CV%:0.9%

试剂说明书上异常值CV%:0.7%

1/4最大允许误差:2.5%

结果判断方式：正、异常值CV至少小于1/4最大允许误差。

测定评价：批内测定低、高值CV值分别为0.6%、0.7%，均小于1/4最大允许误差，可判定该

项目批内精密度结果为“通过”。

3．线性范围（Linearityrange）：

目的：在确定某项目检测上限的同时检测其检测上下限是否呈线性关系,从而保证该浓度范

围检测结果的准确性。对于高浓度样本可以用重做功能予以确定，或用0.9%的生理盐水手工

直接稀释后上机测定，两种方法稀释效果差异经统计学验证无明显差异。（具体操作可详见

“稀释效果的对比”）

罗氏说明书给出血糖（GLU）线性范围（Linearityrange）为0.11-25.0mmol/L。

过程描述：a）以100ul以一个体积单位，将高值标本与0.9%NaCl以4：1、3：2、2：3、1：

4的体积比例混合，分别上机按高到低、低到高各重复测定2次，记录结果。

b）线性统计：以直接测定结果计算得出的相应浓度为X，以通过稀释测定结果为Y，回归方

法学统计，得到a、b及r值。

c）结果判断：若b在0.97-1.03范围内，若a接近于0，则可直接判断线性。范围在实验已

涉及浓度；若b不在0.97-1.03范围内，a较大，舍去高值或低值组数据，另做回归统计，

直至缩小的分析范围其回归方程的a和b的判断符合要求，则该范围为线性范围。

结论：标本状态良好无干扰的情况下血糖（GLU）的测定结果在0.11-25.0mmol/L范围内呈

线性。

4．临床可报告范围（Clinicalreportablerange，CRR）：

目的：分析各稀释浓度的线性关系，确定最高稀释倍数。从而确保高值样本报告的准确度。

验证方法：罗氏公司血糖（GLU）说明书上不仅给出了在MODULARP上的AMR，同时给出了经

稀释后重复测定可达到的延伸范围，我们将此范围作为该项目的临床可报范围，同时延伸范

围高限值与线性范围高限值的比值作为最大稀释倍数。

此倍数稀释超限高值标本测定值与预期值的偏差，以1/4CLIA’88总允许误差范围为

判断限。

项目名称可测定线性范围临床可报上限是否通过验证实际稀释倍数

血糖

0.3-250.3-50

是

3

90%AMR-140%AMR

初拟稀释倍数

22.5-353

稀释倍数的应用浓度为超出线性范围且低于临床可报上限浓度之间的高值标本，为了减少稀

释引起的误差及降低高值标本寻求的难度，这里将稀释标本浓度限制在90%AMR-140%AMR。

过程描述：a）测定标本为2010室间质评线性验证标本,同一时间内平行上机测定两次,测定

结果分别为27.69mmol/L,27.76mmol/L,平均值为27.73mmol/L(此结果为MODULARP

AMR100.9%上限),按照初拟倍数将此标本直接稀释3倍后平行上机测定2次,结果分别为

9.23mmol/L,9.23mmol/L,乘以稀释倍数后取平均值为27.69mmol/L。

b）本次实验预期值为27.73mmol/L，实测值为27.69mmol/L。测定值与预期值的偏差为0.14%，

小于1/4CLIA’88总允许误差2.5%。可判定为“通过”。

5.分析灵敏度(AnalyticalSensitivity)：

验证方法：厂商通常给定的分析灵敏度为检测低限LLD，即样品单次检测可以达到的非

空白检测响应量对应的分析物量。通过反复测定空白样品，均值（X）加上三倍标准差（SD）

则为LLD。验证检测低限时，重复至少20个数据，若不超过3个点大于LLD，则此LLD得到

验证。

分析灵敏度仅对那些在接近0的低值有临床意义的项目有必要进行确定。该项目勿需进

行分析灵敏度的验证，直接引用罗氏说明书上给定的0.11mmol/L。

6.干扰物质(InterferingSubstances)：

胆红素：胆红素低于376.2μmol/L无明显干扰；

溶血：血红蛋白低于8.5g/L无明显干扰；

脂血:甘油三酯低于3.42mmol/L无明显干扰,但是脂血混浊的浊度和甘油三酯间相关性

很差。

7．参考区间（Referenceintervals）：

过程描述：待检标本需满足检测前质量控制要求（见下），收集20例健康人血清标本

及时检测，要求其年龄，性别等均匀分布，对参考范围进行验证，只允许5%的数据超过所验

证的参考范围，否则需建立参考范围。

血糖（GLU）检测前质量控制要求：

健康状况调查表筛选合格候选个体，筛查要求详见《健康状况调查表—男性》，《健康状、

况调查表—女性》。

离心沉淀（大约3000*g下5分钟）不能澄清的脂血标本勿用。

不超过冷藏温度（2-8。C）72小时的标本。

氟化物或碘乙酸盐处理血浆：室温稳定24小时.收集后的标本应该尽快检测,或者在半

小时内与细胞进行分离并保存于2-8℃。检测前离心去除沉淀。

调查表显示有服用VitC者血清标本勿用。

项目血糖浓度单位MMOL/L测定日期

试剂批号有效期

仪器测定分布例

数

1-10男性

11-20女性

是否在控在控

测定结果见下表：

样本序列号样本条码号测定结果样本序列号样本条码号测定结果

111

212

313

414

515

616

717

818

919

1020

统计方式：

R=测定结果在参考范围内的例数/总测定例数≥95%即合格

罗氏说明书提供参考范围GLU：3.05-6.38mmol/L。

结果：本实验测定正常人结果在厂家提供的参考范围的比率R≥95%。

结论：厂家提供的血糖（GLU）参考范围为3.05-6.38mmol/L是可用的。

总结:本室血糖（GLU）项目准确度、精密度、线性范围、临床可报告范围、分析灵敏度、

干扰物质、参考区间验证结果均可接受，可用于临床标本检测。

（注：本次方法学验证所涉及到的实验数据原始记录见《方法验证原始记录》。）

验证人：审核人：

日期：日期：