肾毒清

本科毕业生论文

论文题目：康肾口服液对水负荷

大鼠模型的影响

姓名：

专业：中药学

年级：2008级

班级：2008级中药本科班

学号：

指导教师：

评定成绩：

2012年05月08日

I

目录

摘要................................................................1

Abstract............................................................2

1前言.............................................................3

2实验材料.........................................................3

2.1实验药品...................................................3

2.2实验动物...................................................4

2.3实验仪器...................................................4

3实验方法.........................................................4

3.1尿量的测定..................................................4

3.2血清钾的测定（比浊法）.....................................5

3.2钠的测定...................................................5

3.3氯化物的测定（手工试剂）...................................6

4实验结果.........................................................6

4.1康肾口服液对水负荷大鼠模型5h尿量的影响结果...............6

4.2康肾口服液对水负荷大鼠模型尿中Na+、K+、Cl-含量的影响结果

................................................................7

5讨论.............................................................8

5.1关于康肾口服液、呋塞米、肾毒清的对比.......................8

5.2传统中药、西药利尿作用的药理研究...........................9

5.3实验指标选择依据..........................................10

5.4对实验结果的讨论..........................................10

6结论............................................................11

7致谢.............................................错误!未定义书签。

参考文献...........................................................12

1

康肾口服液对水负荷大鼠模型的影响

摘要

目的：通过研究康肾口服液对水负荷大鼠模型的影响，来探讨康肾口服液治

疗肾炎的作用特点。方法：筛选合格的大鼠Wistar72只，随机分为6组，分别

灌服大、中、小剂量康肾口服液,尿毒清颗粒混悬液，呋塞米片混悬液（为阳性

对照），同体积的生理盐水（空白对照），连续给药一周，最后给大鼠灌服生理盐

水，30min后灌服相应药物，用代谢笼法每隔一个小时量计一次尿量，并测尿

液中Na+、K+、Cl-的浓度。结果：与空白对照组相比，小剂量康肾口服液组

可显著增加大鼠给药后第一个小时的尿液量（P<0.01），大剂量康肾口服液组可

显著增加大鼠给药后第三个小时的尿液量，中、小剂量康肾口服液组、可显著增

加大鼠5h总尿量。大、中、小剂量康肾口服液组可显著增加尿液中尿氯离子含

量，大、中剂量康肾口服液组可显著增加尿液中尿钠离子含量。结论：康肾口服

液可以增强水负荷大鼠模型的利尿功能，增加钠离子和氯离子的排泄。

关键词：康肾口服液；水负荷；大鼠模型；利尿

2

TheinfluenceofKangrenaloralliquidinratmodelof

waterload

Abstract

Objective:Throughthestudyoftheinfluenceofkangrenaloralliquidwaterinthe

ratmodelofwaterload,toexploretheroleofrenaloralliquidtreatingnephritisand

s:ScreenqualifiedratsWistar72andrandomlydividintosix

groups,namelyirrigationunderlarge,mediumandsmalldosofkangrenaloral

liquid,urinepoisonousclearparticlessuspensionliquid,furomidesuspensionliquid

(asthepositivecontrol),withthevolumeofthephysiologicalsaline(blankcontrol),

continuetomedicinethemaweek,finallyratsirrigationunderphysiologicalsaline,

30minlatertakecorrespondingfillingafterdrug,withthemetabolismofcageevery

hourvolumetermsaurineoutput,andintheurineNa,K,Cls:

comparedwithblank,smalldosofkangrenaloralliquidgroupcansignificantly

increatheurinevolumeafterthetreatmentinthefirsthour(P<0.01),largedos

ofkangrenaloralliquidgroupcansignificantlyincreatheurinevolumeratsafter

thetreatmentofthethirdhour,mediumandsmalldokangkidneysignificantly

boostoforalliquid,,mediumandsmalldosof

kangrenaloralliquidcanbeincreadsignificantlyintheurineofchlorineionin

urine,large,mediumdokangrenaloralliquidcansignificantlyincreaintheurine

sion:kangrenaloralliquidcanstrengthen

waterloadintheratmodelofdiuresisfunction,increasodiumandchlorideions

drainage.

Keywords:kangrenaloralliquid;waterload;ratmodel;diuresis

3

1前言

肾炎是临床常见病，也是部队青年的多发病，如得不到较好治疗，迁延不愈，

导致发生尿毒症。肾炎发病机理是两侧肾脏非化脓性的炎性病变。肾因肾小体受

到损害出现浮肿、高血压、蛋白尿等现象，是肾脏疾病中最常见的一种。目前西

医无特殊治疗，国内多采用中西医结合治疗，其方法诸多，但效果均不理想。

人体肾脏具有强大的代偿能力，发生肾炎以后，可能肾脏已经遭受损伤但人

们却毫无察觉。一定要对肾炎的早期症状有一定的了解，及早发现并有效治疗，

这已经成为肾炎患者治疗的关键。肿是肾炎的首发症状之一，一般是从面部开始，

然后蔓延到下肢。有时眼睑、手脚都会有肿胀感。通过药物的利尿作用，排出因

肾脏病变而无法正常排出的水分，是肾炎病症治疗的重要衡量指标。

康肾口服液由人参、生黄芪、白术、茯苓、淫羊藿、怀山药、地龙、红花、

金樱子、芡实、甘草等组成，方中人参，生黄芪补脾益气，纠正人体气虚状态，

白术茯苓健脾祛湿，淫羊藿助肾阳，怀山药滋补肾阴，地龙、红花活血祛瘀，佐

助其祛湿功效，金樱子、芡实收敛固精，上述诸药合用，共同调理肾脏阴阳平衡，

祛除水湿，扶持人体正气。：“康肾口服液”为解放军163医院非标制剂，该制

剂是从临床治疗急性肾炎的中药方剂中筛选出来的，应用于肾炎的治疗，有较好

的疗效。

2实验材料

2.1实验药品

康肾口服液，由人参、生黄芪、白术、茯苓、淫羊藿、怀山药、地龙、红花、

金樱子、芡实、甘草等组成，具有益气温阳，固本涩精，活血通络之功，用于慢

性肾炎、肾病综合征、阳痿早泄等作用，由解放军第371医院制剂室提供，批号

4

20110425；尿毒清颗粒，康辰药业（内蒙古）有限责任公司生产，批号20110114；

呋塞米，天津力生制药股份有限公司生产，批号1101008；氯化钠注射液，河南

太龙药业股份有限公司生产，批号11082465；血清钾测试盒，南京建成生物工

程研究所生产，批号20120104；氯化物测定试剂盒，南京建成生物工程研究所

生产，批号20120104；钠测定试剂盒，南京建成生物工程研究所生产，批号

20120104。

2.2实验动物

大鼠，清洁级，Wistar，河北省动物实验中心提供，合格证号1112130。

2.3实验仪器

UV－2000紫外可见分光光度计，尤尼柯(上海)仪器有限公司；TGL-16G台

式离心机，上海安亭科学仪器厂；可调式移液器，上海雷勃分析仪器有限公司。

3实验方法

3.1尿量的测定

取清洁级体重180～200g大鼠,wistar,雄性；实验前先筛选大鼠泌尿作用，

大鼠禁食不禁水12h，灌服25ml/kg的生理盐水,2h内收集的尿量达到所灌入

量的40%以上的大鼠可用于利尿实验。取筛选合格的大鼠72只，随机分为6组,

每组12只，分别灌服灌服大、中、小剂量康肾口服液（20ml原药液/kg、10ml

原药液/kg、5ml原药液/kg，原药液、生理盐水稀释1倍、生理盐水稀释2倍，

2ml/100g）、尿毒清颗粒混悬液（4.2g/kg，用生理盐水配成0.21g/ml，2ml/100g）、

呋塞米片混悬液（6.6mg/kg，用生理盐水配成0.33mg/ml，2ml/100g）和同体积

的生理盐水（2ml/100g）；每天给药1次，连续给药7天。于第6天晚上大鼠禁

食不禁水，第7天禁食不禁水16h，给各组大鼠灌服生理盐水25ml/kg,并轻压

下腹部使膀胱排空；30min后各组灌服相应药物,立即将大鼠放入代谢笼内(每

笼1只)，每隔1h量计一次尿量,共计5h,收集给药后5h总尿量,测尿液中

5

Na+、K+、Cl-的浓度。结果见表4[2]。

3.2血清钾的测定（比浊法）

样本前处理：取血清0.1ml加蛋白沉淀剂0.9ml，3500转/分离心5分钟，取上清0.5ml，

按下表进行钾的测定。定值血清必须同样进行蛋白沉淀。

表1操作步骤：

空白管标准管样本管

蒸馏水（ml）0.5

0.4mmol/L的钾标准

液（ml）

0.5

测定血清的上清液

（ml）

0.5

试剂二（NA-TPB工

作液）（ml）

222

计算：血清钾含量mmol/L=

标准管吸光度

测定管吸光度

*标准浓度*样本测试前稀释倍数（10）

3.2钠的测定

表2操作步骤

标准管样品管备注

试剂(ml)0.30.3-

标准液(ul)20-15秒内迅速加入促

进剂200(ul)，形成浊

度后各管加1ml乙醇

稀释液，混匀后测定。

样品(ul)-20

分光光度计测定方法：波长620或630nm,用蒸馏水调零，测定标准管吸光度值（A标）和样

品管吸光度值（A样），按公式计算测定结果。

计算公式：C样=A样/

A标*

C标

6

3.3氯化物的测定（手工试剂）

表3操作步骤：

空白管标准管样品管

蒸馏水(ml)0.03

100mmol/L氯标准液

(ml)

0.03

血清(ml)0.03

试剂二（硫氰酸汞工

作液）(ml)

333

混匀后，放置5-10分钟，480nm，空白管调零，1cm光径，测各管吸光度。

计算公式：氯离子含量（mmol/L）=

标准管吸光度

测定管吸光度

*100mmol/L

4实验结果

4.1康肾口服液对水负荷大鼠模型5h尿量的影响结果

表4康肾口服液对水负荷大鼠模型5h尿量的影响（±s，n=12）

组别

剂量

(ml原药液

/kg)

1h2h3h4h5h5h总尿量

空白对照

组

2.3±1.30.9±0.40.6±0.30.3±0.30.3±0.34.3±1.2

7

呋塞米片

组

6.6mg5.3±1.7**1.2±0.50.4±0.20.2±0.20.2±0.37.3±1.5**

尿毒清颗

粒组

4.2g1.8±1.51.6±0.81.0±0.4*0.3±0.40.4±0.25.2±1.1**

大剂量康

肾口服液

组

201.3±1.41.3±0.61.2±0.6**0.4±0.40.4±0.44.6±1.6

中剂量康

肾口服液

组

102.0±0.71.6±0.80.9±0.4*0.5±0.40.3±0.35.2±0.9**

小剂量康

肾口服液

组

52.9±0.7**1.1±0.80.7±0.50.4±0.30.3±0.35.3±1.2**

*:表示与空白对照组比P<0.05，**:表示与空白对照组比P<0.01

从上表可看出，与空白对照组比，在第1h，小剂量康肾口服液组和呋塞米

片组可显著增加大鼠尿液量（P<0.01）；在第2h，各给药组均有增加大鼠尿液量

的趋势；在第3h，大剂量康肾口服液组可显著增加大鼠尿液量（P<0.01），中剂

量康肾口服液组和尿毒清颗粒组可明显增加大鼠尿液量（P<0.05）；在第3h、4h，

各给药组增加大鼠尿液量不明显；中、小剂量康肾口服液组、尿毒清颗粒组和呋

塞米片组均可显著增加大鼠5h总尿量（P<0.01），大剂量康肾口服液组仅有著增

加大鼠5h总尿量的趋势（P﹥0.05）；以中、小剂量康肾口服液组对水负荷大鼠模

型5h尿量增加作用为好。

4.2康肾口服液对水负荷大鼠模型尿中Na+、K+、Cl-含量的影响结果

表5康肾口服液对水负荷大鼠模型尿中Na+、K+、Cl-含量的影响（±s，

n=12）

组别

剂量

(ml原药液/kg)

尿氯离子尿钠离子尿钾离子

8

空白对照组37.40±14.0760.00±5.7832.76±6.65

呋塞米片组6.6mg62.33±13.90**73.20±9.20**33.24±5.59

尿毒清颗粒组4.2g68.93±16.52**69.53±5.03**40.69±8.55*

大剂量康肾口服液组2073.62±16.99**81.73±13.34**36.51±7.27

中剂量康肾口服液组1067.97±18.76**70.86±11.37**38.43±6.60

小剂量康肾口服液组557.24±19.13**67.57±11.8435.01±6.05

*:表示与空白对照组比P<0.05，**:表示与空白对照组比P<0.01

从上表可看出，与空白对照组比，大、中、小剂量康肾口服液组、尿毒清颗

粒组和呋塞米片组均可显著增加尿液中尿氯离子含量（P<0.01）；大、中剂量康肾

口服液组、尿毒清颗粒组和呋塞米片组均可显著增加尿液中尿钠离子含量

（P<0.01），小剂量康肾口服液组仅有增加尿液中尿钠离子含量的趋势（P﹥0.05）；

尿毒清颗粒组可显著增加尿液中尿钾离子含量（P<0.01），大、中、小剂量康肾口

服液组和呋塞米片组仅有增加尿液中尿钾离子含量的趋势（P﹥0.05）。

5讨论

5.1关于康肾口服液、呋塞米、肾毒清的对比

“康肾口服液”为解放军163医院非标制剂，该制剂是从临床治疗急性肾炎的

中药方剂中筛选出来的，用于临床治疗急性肾炎疗效确切，使用方便，无毒副作

用。其制备工艺采取经典的水煮醇沉提取方法，充分保留了盐酸小檗碱等有效成

分，生产工艺科学，操作简便，质量控制技术先进，量化指标准确可靠，质量稳

定。临床用于治疗急性肾炎疗效显著，总结病例162例与对照组比较，其治愈率、

有效率分别达到90%、96.88%,明显高于对照组（66.6%、86.07%），且无不良反

应[3]。

呋塞米也称速尿，临床上用于治疗心脏性水肿、肾性水肿、肝硬化腹水、机

能障碍或血管障碍所引起的周围性水肿，并可促使上部尿道结石的排出。其利尿

作用迅速、强大，多用于其它利尿药无效的严重病例。由于水、电解质丢失明显

9

等原因，故不宜常规使用。静脉给药（20～80mg）可治疗肺水肿和脑水肿。药

物中毒时可用以加速毒物的排泻。

尿毒清方中用黄芪、党参健脾益气，制何首乌补肾益精，共奏健脾益肾之

功；用生大黄通腑泄浊，使湿浊之邪从大便而出，白术健脾除湿，茯苓、车前草

利尿除湿，姜半夏燥湿和中、降逆止呕，共奏通腑降浊之功；更用川芎、丹参

等活血化瘀。综观全方，具有健脾利湿、通腑降浊、活血化瘀等功能。其组方合

理，配伍精当，切中慢性肾功能衰竭肾气虚为本，湿浊瘀血壅塞为标的病机，因

此临床疗效显著。

三方中，呋塞米属西药利尿剂，利尿作用迅速强大，但易引起电解质的紊乱。

康肾口服液属中药浸提制剂，主要用于急性肾炎，副作用小。尿毒清亦属中成药

制剂，除祛湿健脾外，补益作用明显，对慢性肾功能衰竭引起的肾气虚症状有良

好的改善作用。

5.2传统中药、西药利尿作用的药理研究

中医学对肾性水肿的认识，概括而言，病因大致可分为外感、内伤两端，或

由风寒湿热邪气及疮毒内淫，或因饥饱劳伤、七情郁损及久病体虚等原因导致肺

脾肾三脏气化失司，水道不能通调，三焦决渎失权，或气血瘀阻，血化为水，水

湿泛滥而成。对此病治疗的认识，汉唐以前主要是攻逐、发汗、利小便，后世医

家充实了健脾、补肾、温阳、活血等扶正固本及攻补兼施之法。传统中药理论中，

利尿药性味多苦寒，或甘淡而寒。寒能清热，走下焦，尤能清利下焦湿热，以利

尿通淋为主要作用，主要用于小便短赤，热淋，石淋及膏淋等症。例如尿毒清中

的车前。此外，尿毒清中的黄芪、党参健脾益气，白术健脾除湿，通过增强脾脏

的祛湿能力来达到利尿作用，在康肾口服液中，由人参、生黄芪、甘草等中药组

成制剂，通过益气温阳、固本涩精的药理作用，增强肾脏的利水之功，应用于临

床急性肾炎有较好的疗效[4]。现代医学认为，利尿药是一类作用于肾脏，通过增

加电解质和水的排出，使尿量增多的药物。利尿药的作用机制有①增加肾小球的

滤过②抑制肾小管和集合管的重吸收③影响肾小管和集合管的分泌。临床应用有

①治疗各型水肿：对心性及肾性水肿疗效较好。在治疗心性水肿与强心苷合用时，

强心苷对低血钾的患者易引起中毒，故应及时补充钾盐。②治疗高血压：多与其

10

他降压药配合使用。③治疗尿崩症主要用于肾性尿崩症及加压素无效的垂体性尿

崩症。其常见的不良反应有①电解质紊乱：可引起低血钠、低血镁，以低血钾最

为常见。②潴留现象：如高尿酸血症、高钙血症，痛风者慎用。③代谢变化：如

高血糖、高脂血症等，糖尿病患者慎用。

5.3实验指标选择依据

在肾病综合征患者中水肿是非常普遍的,表现多样。水肿可发生在四肢、颜

面，严重者可伴浆膜腔积液，表现为腹水、胸水/心包以及纵隔积液，甚至出现

呼吸困难和心力衰竭，消化道私膜水肿也常发生，表现为呕吐、腹泻、消化不良

等症状;另外严重的水肿还可以造成皮肤剥落，形成难治性皮肤溃疡。多数病例

水肿为轻、中度，经限制钠盐摄人及应用噻嗪类利尿剂可使缓解。然而部分病人，

严重水钠储留引起全身性水肿，通过饮食控制和利尿剂并不能得到有效控制。在

水肿治疗前评估体内液体容量状态是至关重要的。通过临床及生化指标、影像学

检查可以评估血管内血容量。评估体内液体容量包括测量尿钠浓度、钠排泄分数

【FENa(%)】等。FENa(%)与肾小管滤过的钠比值在钠储留的情况下小于

1%，FENa越低,利尿剂反应越差,利尿剂抵抗的病人其FENa显著低于正常

(<02%)[5]，尿钾浓度/(尿钾浓度+尿钠浓度)是肾素一血管紧张素一醛固酮轴激活

的理想指标泛。比值>60%提示肾素-血管紧张素-醛固酮轴激活及肾脏排钾。肾病

综合征伴低血容量的患者，FENa偏低(常小于0.2%)，尿K/(K+Na)偏高

(大于60%)[6]。

5.4对实验结果的讨论

本次实验选取两组阳性对照，分别为临床上已经验证有效的西药强效利尿剂

呋塞米和中药利尿剂尿毒清，空白对照为生理盐水组，对筛选过的老鼠Wistar

进行造模，收集尿液，并测定尿液中钠离子、氯离子、钾离子浓度，通过一系列

量化指标对康肾口服液的利水功效达到一个准确的认识。

在康肾口服液对水负荷大鼠模型5h尿量的影响实验中，可以发现在给药第

11

第1h，小剂量康肾口服液组和呋塞米片组可显著增加大鼠尿液量（P<0.01）；在

第2h，各个给药组增加大鼠尿液量的趋势均不明显（P﹥0.05）；在第3h，大剂

量康肾口服液组可显著增加大鼠尿液量（P<0.01），中剂量康肾口服液组和尿毒

清颗粒组可明显增加大鼠尿液量（P<0.05）；在第4h、5h，各个给药组增加大鼠

尿液量的趋势均不明显（P﹥0.05）；在收集的总尿量中，中、小剂量康肾口服液

组、尿毒清颗粒组和呋塞米片组均可显著增加大鼠5h总尿量（P<0.01），大剂量

康肾口服液组仅有著增加大鼠5h总尿量的趋势（P﹥0.05）；以中、小剂量康肾

口服液组对水负荷大鼠模型5h尿量增加作用为好。综合以上结果，较之空白对

照组，阳性药组与康肾口服液组均能不同程度地增加大鼠尿量，以西药呋塞米利

尿功能最为强大，康肾口服液与中药利尿剂尿毒清功效相当（在上述实验标准

下）。

在康肾口服液对水负荷大鼠模型尿中Na+、K+、Cl-含量的影响中，各

个给药组均可显著增加尿液中尿氯离子含量（P<0.01）；大、中剂量康肾口服液

组、尿毒清颗粒组和呋塞米片组均可显著增加尿液中尿钠离子含量（P<0.01），

尿毒清颗粒组可显著增加尿液中尿钾离子含量（P<0.01）。尿中的无机盐类主要

是Cl-、Na+、K+和磷酸盐等。尿中Cl-和Na+的排泄常伴随而行，食入的多，排

泄的多，少食少排，体内缺乏时可以不排。K+则不同，即使体内缺K+，只要有

尿仍随尿排出。所以肾脏保Na+的能力比保K+强。上述实验数据表明西药利尿剂

呋塞米、中药利尿剂尿毒清易引起电解质的紊乱。

6结论

本口服液临床对肾小球肾炎、肾功能不全疗效较好,该实验已为临床应用提

供了部分依据。该实验说明康肾口服液对水负荷大鼠模型有较为确切的利水功

效，且不易引起电解质的紊乱。有报道]7[方中人参的含皂甙对慢性肾炎、肾病综

合征有较好的治疗作用,白术有利尿抗炎作用;茯苓可利尿,淫羊藿抗炎;黄芪有

明显降尿蛋白作用,临床广泛用于肾炎的治疗。该口服液的作用是其所含药物利

尿、抗炎、改善肾脏功能、减轻肾脏损伤等作用的综合体现。本实验结果还显示

12

康肾口服液小剂量组作用较好,与一般药物所能呈现的量效关系不一致。肾炎模

型动物肾脏功能降低,其排泄代谢能力均会有所改变,是否因剂量大后增加了肾

脏的排泄代谢负担,而导致疗效不如小剂量为优,还有待进一步研究。

参考文献

[1]徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版

社,2001:1223-1226.

[2]陈学习，赵晓梅，吴赟，苏志扬.泽泻汤不同配比对水负荷大鼠尿量及尿液

水通道蛋白2影响的实验研究.（2009）31-23-02

[3]张正臣,赵京生,付军玲,彭传真.康肾口服液对大鼠膜性肾炎的影响河南

中医药学刊2002,(17)

[4]曲正平.肾病水肿的中医护理体会[J].中国中医急症,2010,(09)

[5]VasudevanA，MantanM，mentofedemainnephrotic

Pediatr,2004,41:487-495

[6]DeSantoNC，PollastroRM,SuvianoC，

Nephrol,2001,21:262-268.

[7]苗明三.法定中药药理与临床[M].西安:世界图书出版公司,1998:30、328、

863、1052、1117