TAE是Tris-乙酸,缓冲容量小,但是溶解度大,易于储存
TBE是Tris-硼酸,缓冲容量大,但是溶解度小,不易长期储存,易产生沉淀
TAE与TBE的区别
首先要知道TAE與TBE緩衝溶液的成份如下:
50xTAEBuffer(Tris-Acetate-EDTA)
242gmTrisba
57.1mlAceticacid100ml
0.5MEDTA
AddddH2Oto1literandadjustpHto8.5.
10xTBEBuffer(Tris-Borate-EDTA)
108gmTrisba
55gmBoricacid
9.3gmNa4EDTA
AddddH2Oto1liter.
ThepHis8.3andrequiresnoadjustment.
它們的分別有下列幾點:
不能太濃(它只可有10times),因為borate會很容易沉澱,但一般
有少許沉澱是不會有太大問題。
的bufferingcapacity比TAE高,用TBE來跑出來的gel,分辨率
(resolution)會比較高。
3.因為TBE有borate離子(ion),它會影嚮酵素(enzyme)的工作。因此,
若要為分離出的DNA進行下一步酵素處理,如cloning或restrictioncut
的話,就要切記不要讓DNA碰上borateion。
的buffercapacity比較差,gel一般比較模糊,但它不會對影嚮酵素
三种缓冲液的配制方法
Tris-乙酸(TAE):50×浓贮存液(每升):
242gTris碱
57.1ml冰乙酸
100ml0.5mmol/LEDTA(pH8.0)
使用时再稀释50倍。
Tris-磷酸(TPE):10×浓贮存液(每升):
108gTris碱
15.5ml85%磷酸(1.679g/ml)
40ml0.5mmol/LEDTA(pH8.0)
使用时再稀释10倍。
Tris-硼酸(TBE):5×浓贮存液(每升):
54gTris碱
27.5g硼酸
20ml0.5mmol/LEDTA(pH8.0)
本文发布于:2023-01-01 10:58:49,感谢您对本站的认可!
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