果蝇杂交实验

实验五果蝇杂交实验

一、实验目的与要求

了解伴性遗传和非伴性遗传的区别，以及了解伴性基因在正反杂交中的差异，理解

遗传规律。

二、实验类型

本实验为设计型实验。

三、实验原理及说明

基因的颗粒性遗传是孟德而尔遗传学定律的精髓，两对处于不同染色体上的基因决

定两对相对性状的遗传遵循孟德尔定律。

常染色体上的基因遗传时，性状分离在雌雄两性中有同样的表现。性染色体上的一

对等位基因伴随性染色体遗传，其性状遗传与性别相联系。处于同一染色体上的连锁基

因可以发生一定频率的重组，重组值的大小反映基因在染色体上的相对距离。三点测交

就是通过一组杂交对三队连锁基因的交换行为进行测定，以确定其在染色体上的相对位

置和排列顺序的最经典的实验。

这些规律的验证可以分别进行，也可以通过不同突变体的合理组合有所侧重。如伴

性遗传基因分离图解：

A：B：

♀X+X+×XwY♂♀XwXw×X+Y♂

红眼白眼白眼红眼

F

1

F

1

♂XwY♂X+Y

♀♀

X+X+XwX+YXwX+XwXwY

♀红♂红♀红♂白

实验说明：vg位于第二号染色体，e位于第三号染色体，wsn3m位于X染色体。

从图解得知，以显性个体作杂交组合的母本时，F

1

代和非伴性遗传相同，若以隐性

个体作杂交组合母本时F

1

代中的雄性表现为隐性性状。

四、实验仪器

2

序号仪器名称台数

1双筒解剖镜20

2培养箱2

五、实验内容和步骤

1.实验准备：

（1）用具牛奶瓶，麻醉瓶，磁板，海绵板，解剖针，毛笔，镊子，解剖镜，死

蝇收集瓶，吸虫管，口曲纸，解剖针，普通果蝇的两个品系：野生型果蝇（+），白眼

果蝇（w），残翅果蝇（vg），黑檀体果蝇（e），白眼、卷刚毛、小翅果蝇（wsn3m）。

（说明：vg位于第二号染色体，e位于第三号染色体，wsn3m位于X染色体。）

（2）药品：乙醚，0.75NaCl

2.实验步骤：

第一周：学生根据实验材料自己确定实验方案，可以任选其中1-2个杂交组合。

①选取每组实验所要用的各种果蝇表型作为亲本进行杂交。每个杂交都做正反交。

②贞蝇的鉴别与挑选和收集。每组至少挑选5-10只贞蝇。新羽化的雌身体细长，

幼嫩的几乎透明，一般在8-10h没有交配能力，或经过7-10天的隔离饲养没有与任何雄

蝇交配过的蝇都属于处女蝇。

挑选处女蝇的方法：将亲本培养瓶中的成蝇全部依走（可在晚上22：00至23：00

期间将成蝇移入另一个培养瓶中，次日早晨8：00至9：00对新羽化的果蝇进行进行挑

选）。以后每隔6-8h观察一次，并将新羽化的雌雄成虫取出并分别放入培养瓶内备用。

新羽化的雌身体细长，幼嫩的几乎透明，一般在8-10h没有交配能力，属于处女蝇。。

③杂交接种的步骤：Ⅰ接种：把选出的雌雄果蝇，根据杂交实验组合的要求分别搭

配起来，装入一个培养瓶内，每瓶放5—6对，贴上标签，写明杂交组合的亲本、杂交

日期、实验者姓名。Ⅱ培养：第二天检查培养瓶，亲蝇若有死亡应及时补充，将培养瓶

放在25℃恒温培养箱中培养。注意随时检查培养基是否发霉，如有污染应立即更换新的

培养基。

第二周：对果蝇生活史进行细心观察，并书写观察日记，记录你所看到的果蝇的行

为，各发育阶段的主要现象及经历所需的时间等。

①淘汰亲本果蝇：第一周接种的亲蝇，经7-8天培养后，再过3-4天，F1代将孵出，

为避免亲子蝇混淆，应将亲蝇放飞或将其移到死蝇瓶中。即当瓶壁上出现黑色蛹时，在

实验室移去亲本，之后继续将培养瓶存放在恒温箱内保存。

②配制培养基：在接下来的一周中，将F1移入新的培养瓶中进行兄妹交，因此需

要配制新的培养基。

③设计测交实验：通过测交实验以验证F1的基因型。测交实验须用隐性亲本的处

3

女蝇。收集隐性亲本的处女蝇，以备下一周使用，请写出你自己设计的实验流程及相应

的记录表

第三周：

①观察记录F1表型：再经3~5天（即接种杂交亲本后的约11~12天），F1成虫开

始羽化，在实验室中取出F1成蝇，观察记录其表型和数量。每个杂交组合至少应统计

30只。

②F1兄妹交：取一新培养瓶，放10~15对F1果蝇（这里的雌蝇无须是贞蝇，为什

么？），③进行F1自交。贴好标签，写明F1的基因型、杂交日期、实验者姓名。

测交：将隐性亲本的处女蝇与F1杂交，做测交实验。

第四周：

7~8天后，移去F1兄妹交（自交）的个体。

第五周：

①再过3~5天即接种F1果蝇11~12天后，F2开始羽化。在实验室中逐批仔细观察

各种表型并计数，并用X2进行测验，说明实验结果是否与理论数值相符合。连续统计

4~5天，以保证获得足够数旦的被观察后代，已被观察统计过的果蝇倒入尸体瓶。每个

实验小组统计100~200只。

②同时对测交结果进行统计。

六、实验数据处理与结果分析

1.按下列格式记录所得结果并进行说明。

（1）分离规律开始日期：

P残翅（vgvg）×野生型（++）

世代统计日期

果蝇数目

+vg

F1

比例

F2总数

比例

F

2

代X2测验

合计表型野生型（+）残翅型（vg）

观察数

理论数

偏差

4

（0-C）2/C

（2）自由组合定律开始日期：

P灰身残翅（++vgvg）×黑檀体长翅（ee++）(正交)或黑檀体长翅（ee++）×灰身残

翅（++vgvg）(反交)

世代

统计

日期

果蝇数目

灰身长翅灰身残翅黑檀体长翅黑檀体残翅

F1

比例

F2总数

比例

F

2

代X2测验：

表型灰身长翅灰身残翅黑檀体长翅黑檀体残翅合计

观察数

理论数

偏差

（0~C）2/CX2

[3]

（3）伴性遗传开始日期：

P：红眼×白眼（正交）白眼×红眼（反交）

X+X+×XwYXwXw×X+Y

世代统计日期正交反交

F1红眼白眼红眼白眼

比例

世代统计日期正交反交

红眼白眼红眼白眼

F2

总数

比例

（4）基因定位开始日期

P：白眼卷刚毛小翅×红眼直刚毛长翅

5

wwsn3sn3mm++++++

↓

F1

↓

F

2

项目F

2

代表现型

推知的配

子种类

个体数类别合计每类占总数％

非交换

红眼直刚毛长翅+++

白眼卷刚毛小翅wsn3m

单交换

白眼直刚毛长翅w++

红卷刚毛小翅+sn3m

单交换

红眼直刚毛长翅++m

白眼卷刚毛长翅wsn

3

+

双交换红眼卷刚毛长翅+sm

3

+

计算基因间的重组值，并绘制染色体图.w—sn

3

间重组值＝

sn

3

—m间重组值＝

w―m间重组值＝

七、注意事项

母本为处女蝇，雄果蝇可以不是贞蝇？F1之间杂交时雌性果蝇不必是贞蝇。

八、预习与思考题

1.写出详细的观察日记

2.符合伴性性遗传的基因定位实验中，三隐性雌蝇与雄蝇之间的杂交相当于测交后

代，为什么？反交是否也是？常染色体上的基因遗传是否也是这样？