peak是什么意思

更新时间:2022-12-29 02:14:26 阅读: 评论:0


2022年12月29日发(作者:上海培训公司)

Ⅱ基本概念和理论

一、基本概念和术语

1.色谱图和峰参数

⊕色谱图(chromatogram)--样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-

时间曲线,又称色谱流出曲线(elutionprofile).

⊕基线(baline)--流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出

一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。

⊕噪音(noi)――基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、

检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。

⊕漂移(drift)基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温

度、流动相及流量的不稳定所引起,柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也

会产生漂移。

⊕色谱峰(peak)--组分流经检测器时相应的连续信号产生的曲线。流出

曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称性正态分布曲线(高斯Gauss曲

线)。不对称色谱峰有两种:前延峰(leadingpeak)和脱尾峰(tailing

peak)。

⊕拖尾因子(tailingfactor,T)T=B/A,用以衡量色谱峰的对称性。也称

为对称因子(symmetryfactor)或不对称因子(asymmetryfactor)《中国药

典》规定T应为0.95~1.05。T<0.95为前延峰,T>1.05为拖尾峰。

⊕峰底――基线上峰的起点至终点的距离。

⊕峰高(Peakheight,h)――峰的最高点至峰底的距离。

⊕标准偏差(standarddeviation,σ)--正态分布曲线x=±1时(拐

点)的峰宽之半。正常峰宽的拐点在峰高的0.607倍处。

⊕峰宽(peakwidth,W)--峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点

间的距离。W=4σ。

⊕半峰宽(peakwidthathalf-height,Wh/2)--峰高一半处的峰宽。Wh/2

=2.355σ。

⊕峰面积(peakarea,A)――峰与峰底所包围的面积。

A=2.507σh=1.064W

h/2

h

2.定性参数(保留值)

⊕死时间(deadtime,t0)--不保留组分的保留时间。即流动相(溶剂)

通过色谱柱的时间。在反相HPLC中可用苯磺酸钠来测定死时间。

⊕死体积(deadvolume,V0)――由进样器进样口到检测器流动池未被固

定相所占据的空间。它包括4部分:进样器至色谱柱管路体积、柱内固定相颗

粒间隙(被流动相占据,Vm)、柱出口管路体积、检测器流动池体积。其中只

有Vm参与色谱平衡过程,其他3部粉只起峰扩展作用。为防止峰扩展,这3部

分体积应尽量减小。V0=F×t0(F为流速)

⊕保留时间(retentiontime,tR)--从进样开始到某个组分在柱后出现浓

度极大值的时间。

⊕保留体积(retentionvolume,VR)--从进样开始到某个组分在柱后出现

浓度极大值时流出溶剂的体积。又称洗脱体积。VR=F*tR.

⊕调整保留时间(adjustedretentiontime,tR’)--扣除死时间后的保留

时间。也称折合保留时间(reducedretentiontime)。在实验条件(温度、

固定相等)一定时,tR’只决定于组分的性质,因此,tR’(或tR)可用于定性。

TR’=tR-t0

⊕调整保留体积(adjustedretentionvolume,VR’)--扣除死体积后的保

留体积。VR’=VR-V0或VR’=F*tR’

3.柱效参数

⊕理论塔板数(theoreticalplatenumber,N)用于定量表示色谱柱的分

离效率(简称柱效)。

N=(tR/σ)2=16(tR/W)2=5.54(tR/W1/2)2

⊕理论塔板高度(theorticalplateheight,H)每单位柱长的方差。实际

应用时往往用柱长L和理论塔板数计算:H=L/N

4.相平衡参数

⊕容量因子(capacityfactor,K)--化合物在两相间达到平衡时,在固定

相与流动相中的量之比。

K=(tR-t0)/t0=tR’/t0(或溶质在固定相中的量/溶质在流动相中的量),因

此,容量因子也称质量分配系数。

⊕选择性因子(lectivityfactor,α)--相邻两组份的分配系数或容量

因子之比。

α=k2/k1(设k2>k1),α又称为相对保留时间(《美国药典》)。要使

两组分得到分离,必须使α≠1。α与化合物在固定相和流动相中的分配性质、

柱温有关,与柱尺寸、流速、填充情况无关。

5.分离参数

⊕分离度(resolution,R)--相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比

值。也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度。

R=(tR2-tR1)/[(W1+W2)/2]。,

当W1=W2,R=1时,称为4σ分离,两峰基本分离,裸露锋面积为95.4%,

内测峰基重叠约2%。

当R=1.5时,称为6σ分离,裸露锋面积为99.7%。R≥1.5称为完全分

离。《中国药典》规定R应大于1.5。

⊕基本分离方程――分离度与三个色谱基本参数有如下关系:

R=1/4(а-1)×N0.5×[k’/(1+k’)]

其中N称为柱效项,α为柱选择项,k’为柱容量项。柱效项与色谱过程动力

学特性有关,后两项与色谱过程热力学因素有关。

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