酶⽆法切开质粒是什么原因
⾸先确定酶切位点是否甲基化，甲基化⼀般常见有Dam（GmATC），Dc（CWGG，W=A或T）和CpG（CG），在酶切位点选择时尽量避
免如：XbaI（TCTAGA）
（Dam）,ClaI（ATCGAT），BclI（TGATCA），ApaI（GGWCC），SfiI（GGCCNNNNNGGCC），StuI（AGGCCT）等位点切割；⽆法
避免这类酶切位点的，需将质粒转化甲基化缺陷型的细胞再抽提制备质粒，常⽤的Dam/Dcm细胞如：
GM2163（E4105S），ER2925，JM110等。
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本文发布于:2022-12-28 11:55:50，感谢您对本站的认可！
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