北京雷根生物技术有限公司
植物类黄酮检测试剂盒(比色法)
简介:
类黄酮(Flavonoids)是植物重要的一类次生代谢产物,它以结合态(黄酮苷)或自由
态(黄酮苷元)形式存在于水果、蔬菜、豆类和茶叶等许多食源性植物中。
Leagene植物类黄酮检测试剂盒(比色法)检测原理是类黄酮溶于有机溶剂,以有机溶
剂粗提类黄酮,根据提取液的吸收光谱特性,可利用分光光度计在特定波长(325nm)处测
定其吸光度,通过与标准曲线比较,计算出类黄酮含量,主要用于植物组织或果实中类黄
酮的提取以及定量检测类黄酮含量。该试盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用
途。
组成:
自备材料:
1、实验材料:桃子、李子、苹果、杏等果实或其他植物组织
2、研钵或匀浆器
3、离心管
4、滤纸或纱布
5、比色杯
6、分光光度计
操作步骤(仅供参考):
1、类黄酮提取:
①取果实或其他植物组织,洗净,擦干,称取剪碎的新鲜样品,置于4℃预冷的研钵或匀
浆器。
②加入4℃预冷的FlavonoidsAssaybuffer,充分研磨或匀浆后转入10ml离心管中。
用FlavonoidsAssaybuffer冲洗研钵或匀浆器并转移至离心管中,补加FlavonoidsAssay
buffer至。
③4℃避光静置,期间摇动2~3次,然后过滤至离心管中,滤液即为类黄酮粗提液。
2、稀释Flavonoids标准溶液:取适量的Flavonoids标准(1mg/ml),按下表进行稀释:
编号
名称
TP1113
50T
Storage
试剂(A):Flavonoids标准(1mg/ml)5ml4℃避光
试剂(B):FlavonoidsAssaybuffer500mlRT避光
使用说明书1份
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加入物(ml)123456
Flavonoids标准(1mg/ml)0.10.20.30.40.51
蒸馏水0.90.80.60.60.50
Flavonoids浓度(mg/ml)0.10.20.30.40.51
3、加样:按照下表设置空白管、对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免
产生气泡,小心混匀。如果样品中的类黄酮活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后
再进行测定。样品的检测最好能设置2平行管,求平均值。
4、测定:以分光光度计,1cm的比色杯,以空白调零,测定系列标准管、测定管在325nm
处吸光度。
计算:
以1~6号管系列Flavonoids标准浓度(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1mg/ml)为横坐标,
以对应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,直接计算直线回归方程。
组织样品的类黄酮(mg/g)={C×V
T
}/(W×V
1
)
式中:C=根据标准曲线求得的测定管Flavonoids含量(mg/ml)
V
T
=类黄酮粗提液总体积(ml)=8
V
1
=加样时所用类黄酮粗提液的体积(ml)=1
W=样品鲜重(g)
注意事项:
1、为了避免类黄酮见光分解,操作时应尽量避光,研磨或匀浆时应尽量缩短时间。
2、取样量、试剂用量应根据类黄酮含量适当调整。
3、FlavonoidsAssaybuffer应密闭避光保存,避免有效成分挥发。
4、如果没有分光光度计,也可以使用普通的酶标仪测定,但应考虑酶标仪的最大检测体
积。相关产品:
加入物(ml)空白管标准管测定管
FlavonoidsAssaybuffer1——
系列Flavonoids标准(1~6号管)—1—
类黄酮粗提液——1
产品编号产品名称
CS0201细胞线粒体分离试剂盒
DC0032
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PS0013
RIPA裂解液(强)
TC1167
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本文发布于:2022-12-26 13:45:23,感谢您对本站的认可!
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