technique

免疫荧光技术(immunofluorescenttechnique)简介

1、荧光免疫测定技术的概念

将试剂抗原或试剂抗体用荧光素进行标记，试剂与标本中相应的抗体或抗原反应后，

测定复合物中的荧光素，这种免疫技术，称为免疫荧光素技术。

2、技术分类

（1）荧光抗体技术（荧光显微镜技术）：抗原抗体反应后，利用荧光显微镜判定

结果的检测方法。

（2）免疫荧光测定技术：抗原抗体反应后，利用特殊仪器测定荧光强度而推算被

测物浓度的检测方法。

3、荧光的产生

物质吸收外界能量而进入激发状态，在恢复基态时多余的能量以电磁辐射的形式释

放，即发光，这种光称为荧光。这种物质，称为荧光素。由光激发所引起的荧光，

为光致荧光------荧光免疫技术；由化学反应所引起的荧光，为化学荧光------

化学发光技术。

4、荧光素的荧光特性

（1）停止供能，荧光现象随即终止。

（2）对光的吸收和荧光的发射具高度选择性。入射光波长<发射光波长。

（3）荧光效率：发射荧光的光量子数

荧光效率=---------------------------

吸收光的光量子数

（4）荧光猝灭现象：荧光素的辐射能力减弱。

5、常见荧光素及其特性

（1）FITC：黄色结晶粉末，吸收光490~495nm，发射光520~530nm，明亮的黄绿色

荧光。

（2）RB200：橘红色粉末,吸收光570nm，发射光595~600nm，橘红色荧光。

（3）TRITC：紫红色粉末，吸收光550nm，发射光620nm，橙红色荧光。

（4）镧系：Eu3+、Tb3+等。

（5）PE：吸收光490~560nm，发射光595nm，红色荧光。

（6）其它：酶作用后产生荧光物质，具体如下表：

酶底物产物激发光发射光

B-GMUGMU360450

APMUPMU360450

HRPHPA二聚体317414

6、合适荧光素的选择

（1）具有与蛋白质形成共价键的化学基团。

荧光素-N=C+NH-蛋白质荧光素-N-C-N-蛋白质

‖���颉���

SHHSH

（2）荧光效率高，标记后下降不明显。

（3）荧光色泽与背景色泽对比鲜明。

（4）标记后能保持生物学活性和免疫活性。

（5）标记方法简单、快速。

（6）安全无毒。

【注意事项】

大家在用药的时候，药物说明书里面有三种标识，一般要注意一下：

1.第一种就是禁用，就是绝对禁止使用。

2.第二种就是慎用，就是药物可以使用，但是要密切关注患者口服药以后的情况，

一旦有不良反应发生，需要马上停止使用。

3.第三种就是忌用，就是说明药物在此类人群中有明确的不良反应，应该是由医生

根据病情给出用药建议。如果一定需要这种药物，就可以联合其他的能减轻不良反

应的药物一起服用。大家以后在服用药物的时候，多留意说明书，留意注意事项，

避免不良反应的发生。

本文到此结束，谢谢大家!