proceed

PCR仪操作指南

步骤:

1、开机:打开开关,视窗上显示“SELFTEST”,显示10秒中后,显示RUN-

ENTER菜单:准备执行程序。

2、放入样本管,关紧盖子。

3、一、如果要运行已经编好的程序,则直接按《Proceed》,用箭头键选择已

储存的程序,按《Proceed》,则屏幕显示:按《Proceed》选择ENABLE,则开始执行

程序。

二、如果要输入新的程序,则在RUN-ENTER菜单上用箭头键选择ENTER

PROGRAM,按《Proceed》,屏幕显示

按《Proceed》,1)选择NEW,命名新的程序,最多8个字母,输入后按

《Proceed》确认(如何输入字母、数字)。

2)输入程序步骤:名字输入后,显示按《Proceed》则可以输入温度(0~100℃),

按《Proceed》确认后,则可以输入孵育时间,用《Select》键移动光标,输入数字,

完成后按《Proceed》确认,跳到下一步,输入方式同上。

3)选择GOTO,输入循环步骤时链接到第几步(循环数最多可达9999次)(为实

际循环数-1)。

4)选择option,显示再选择increment,按《Proceed》确认,输入初始的温度,

确认后输入时间,按《Proceed》确认,然后输入每个循环增加或减少的温度,增加用

正值,减少用负值(-0.1℃~6℃),按《Proceed》确认。选择extend,按

《Proceed》确认,输入每个循环增加或减少的时间(-60~60秒),按《Proceed》确

认。选择slop(指温度上升或下降的速率),输入温度的改变值(-0.1~1.5℃)按

《Proceed》确认,然后输入加热或致冷的速度,按《Proceed》确认。

4)选择End,输入结束步骤。

5、输入完成的程序后,到RUN-ENTER菜单,选择新程序,开始运行。

6、其它:用《pau》可以暂停一个运行的程序,再按一次继续程序。用

《stop》或《Cancel》可停止运行的程序。

编辑程序:

1、可以用《Cancel》键删除输错的值,输入新的值后按《Proceed》确认。

2、对于未输完的程序,要先输入END,按《Proceed》将程序储存后才能删

除。

3、删除已经储存的程序:从RUN-ENTER菜单中选择RUN-PROGRAM,按

《Proceed》,显示主菜单,选择DELET,用《Select》选择删除。

4、查看程序的步骤:在主菜单上选择LIST,按《Proceed》,用《Select》将

选择名称,再按《Proceed》,显示程序的第一步,用《Select》键向前、向后翻页查

看,此时不能改变程序的值。

编辑已有的程序:

1、从RUN-ENTER菜单中选择RUN-PROGRAM,按《Proceed》,显示主菜单,选择

EDIT,按《Proceed》确认,用《Select》键选择要编辑的程序,按《Proceed》显示

程序的第一步。

2、用《Select》键将光标移到要改变的温度或循环的值上,键入新值,按

《Proceed》确认,按《Cancel》删除键入的值,出现空格,键入新值后确认。

注:一旦值被改变或删除,原来的值不能恢复,必须重新键入。

3、编辑时间值:必须重新键入小时、分钟、秒,按《Proceed》。

如何设置一个PCR体系:

一般分为8步:

1、预变性:可用94~95℃,2~10min,一般用5min。

2、变性:一般用94℃,30s~2min,一般45s~1min。

3、退火:温度自定,30s~2min。

4、延伸:70~75℃,一般72℃,对于〈2kb,<1min;>2kb,每增加1kb加1min。

5、循环数:一般25~35个循环。

6、最终延伸:72℃,5~15min。

7、保存:10℃,时间设为0。

8、END半定量RT-PCR电泳图如何分析

电泳仪操作方法

操作步骤:

1.接通电源前,首先检查电源开关是否处在“关”位置,预置–工作键应处于

预置状态。

2.将仪器与负载之间的连线可靠连接,注意极性。

3.打开电源开关,此时,电源指示灯亮,数字表、时钟电路均应有数字显示。

4.根据需要选择3000V或1500V档,并将相应键按进。

5.按下V选择键,此时数字表显示值为电压预置值。根据实验要求,旋转电压

调节旋钮,使显示值与所要求值一致,则电压预置完成,对于电流和功率预置依此类

推。但工作过程中,要注意负载大小,使符合欧姆定律。

6.校时钟将时钟显示分别用“快进”或“慢进”键调到当时时间,再按下“定

时”键,此时显示的为定时时间,按住“定时”键,通过调节“快进”或“慢进”,可

调整定时到所需时间,定时时间到后,蜂鸣器报警,按一下止闹键,报警声停止。当需

要定时关机时,应按下“关机”键。到达定时时刻,既报警又关机。

7.上述调整完毕,将预警–工作键,按下至工作位置,仪器进入工作状态。此

时,相应指示灯亮,有时两个恒定指示灯同时亮,此时只需将另一个不需恒定的调节

电位器旋钮旋高即可。

酶标仪使用方法

操作规程

1.开启酶标仪电源,待酶标仪自检完成,仪器的液晶显示窗出现PLATE

READING及闪动光标(若仪器提示不能通过自检或出现其他出错信息,请立即停止下

列操作并将错误信息详细记录,报告专业人员维修)。

2.开启计算机。

3.打开酶标仪专用程序(此时在操作界面左下方显示Ready字样)。

4.打开“File”菜单,选择“NewReading”的“NewEndpointProtocol”项

(此时酶标仪转为计算机控制模式);在“ReadingParameters”处,设置各项参数:

单波长测定选择Single双波长测定选择Dual选择MeasurementFilter项确定测

量滤光片波长值选择ReferenceFilter项确定参比滤光片波长值本机目前配置的

滤光片波长有四种:1.405nm2.450nm3.540nm4.630nm(另有490nm的滤光片可

选用,需另行安装)

5.检查确认所设各参数无误,将酶标板放入仪器内(左上角为A1)关闭测量室

的盖板(注意:不能将酶标板的盖子放入仪器内。)

6.点击Run键,仪器开始测定,测定完成后,显示出与酶标板规格一致排列的各

孔OD值。

7.可将数值用Copy命令复制后粘贴至Excel电子数据工作表上,或打开File

菜单,运行Export命令,选择相应的数据文件格式,按自己确定的路径和文件名进

行保存。

PH计使用方法

1.后盖打开,装入电池一块。

2.装上复合玻璃电极注意:(1)复合电极下端是易碎玻璃泡,使用和存放时千万

要注意,防止与其它物品相碰。(2)复合电极内有KCl饱和溶液作为传导介质,如干

涸结果测定不准必须随时观察有无液体,发现剩余很少量时到化验室灌注。(3)复合

电极仪器接口决不允许

有污染,包括有水珠。(4)复合电极连线不能强制性拉动,防止线路接头断裂。

3.打开电源开关后,再打到PH测量档。

4.用温度计测量PH6.86标准液的温度,然后将PH计温度补偿旋钮调到所测的

温度值下。

5.将复合电极用去离子水冲洗干净,并用滤纸擦干。

6.将PH6.86标准溶液2~5ml倒入已用水洗净并擦干的塑料烧杯中,洗涤烧杯

和复合电极后倒掉,再加入20mlPH6.86标准溶液于塑料烧杯中,将复合电极插入于

溶液中,用仪器定位旋钮,调至读数6.86,直到稳定。

应该注意以下两点:(1)必须用PH6.86标准调定位。(2)调完后,决不能再动定

位旋钮。

7.将复合电极用去离子水洗净,用滤纸擦干,用温度计测量PH4.00溶液的温度,

并将仪器温度补偿旋钮调到所测的温度值下。

8.将PH4.00标准溶液2~5ml倒入另一个塑料烧杯中,洗涤烧杯和复合电极后

倒掉,再加入20mlPH4.00标准溶液,将复合电极插入溶液中,读数稳定后,用斜率旋

钮调至PH4.00。应该注意斜率钮调完后,决不能再动。

9.用温度计测定待测液温度,并将仪器温度补偿调至所测温度。

10.将复合电极插入待测溶液中,读取PH值,即为待测液PH值。应该注意以下

两点:(1)测定时温度不能过高,如超过40℃测定结果不准,需用烧杯取出稍冷。(2)

复合电极避免和有机物接触,一旦接触或沾污要用无水乙醇清洗干净。

11.注意事项:仪器在使用前必须进行校准,即以上4~8款操作。如果仪器不关

机,可以连续测定,一旦关机就要校准。但12小时即使不关机也必须校准一次。

高压蒸汽灭菌器使用方法

(1)在外层锅内加适量的水,将需要灭菌的物品放入内层锅,盖好锅盖并对称地

扭紧螺旋。

(2)加热使锅内产生蒸气,当压力表指针达到33.78kPa时,打开排气阀,将冷空

气排出,此时压力表指针下降,当指针下降至零时,即将排气阀关好。

(3)继续加热,锅内蒸气增加,压力表指针又上升,当锅内压力增加到所需压力

时,将火力减小,按所灭菌物品的特点,使蒸气压力维持所需压力一定时间,然后将灭

菌器断电或断火,让其自然冷后再慢慢打开排气阀以排除余气,然后才能开盖取物。