红细胞裂解液配方

1PBS的配方及功能：

NaCl8.0g，KCl0.2g，Na2HPO4˙12H2O3.48g，KH2PO40.2g

加蒸馏水至1000ml。

pH＝6.48＋lg[n(Na2HPO4)/n(KH2PO4)]

红细胞裂解液作用：用红细胞裂解液直接与血液或脾细胞悬液混合，

或用于重悬离心收集的血细胞，可以选择性裂解其中的红细胞，而不

破坏白细胞。随后低速离心去除红细胞裂解碎片和血小板，收集白细

胞，回收率可达90%以上。富集的白细胞的生物学活性不受影响，可

用于各种后续的细胞实验。从富集的白细胞中提取DNA、RNA、和蛋

白质时，可免除红细胞成分如血红素等的不利影响。适于裂解人全血、

小鼠全血或脾细胞悬液中的红细胞。

规格：红细胞裂解液120ml

储存：常温运输，4ºC24个月

用法：

与全血混合直接裂解红细胞

1.采取0.35ml人或小鼠全血，加入1.5ml离心管

2.加1ml红细胞裂解液，颠倒混合，室温放置10min。

3.1500g离心5分钟，弃上清。细胞沉淀应为白色。如果裂解不完

全，用1ml裂解液重悬细胞沉淀，放置10min。1500g离心5分钟，

弃上清。

4.用1.5mlPBS或生理盐水重悬细胞，1500g离心5分钟，弃上清。

重复洗涤2次。

重悬细胞沉淀后裂解红细胞

1.采取1ml人全血或小鼠全血，枸橼酸钠或EDTA或肝素抗凝。或

用1个小鼠脾脏制备的细胞悬液，1500g离心10分钟收集所有细胞。

弃上清。

2.加3ml裂解液重悬细胞(约100~200万个细胞)。颠倒混合，室

温放置10min。

3.1500g离心5分钟，弃上清。细胞沉淀应为白色。如果裂解不完

全，应重复步骤2-3

4.用1.5mlPBS或生理盐水重悬细胞，1500g离心5分钟，弃上清。

重复洗涤2次。

说明：

1.每3ml裂解液可充分裂解约1ml的全血中的红细胞，可按此比

例扩大或缩小规模。加入过多少的裂解液可能导致红细胞不全裂解。

2.裂解人和小鼠红细胞效果佳，裂解其他动物红细胞时效率略低但

仍可裂解。

3.尽量使用4ºC储存小于1周的血液。

红细胞裂解液，PBS（7.4）。红细胞裂解液的配方是139.6mmol/L

NH4CL，16.96mmol/LTris，用1mol/LHCL调PH至7.2和PBS的配

方是