cucurbit

中国瓜菜2016，29（7）：1-8

专题综述

瓜菜细菌性病害的防治手段单一，造成了大多

数病原细菌对抗生素及铜制剂产生耐药性。早在1962年美国佛罗里达州就发现了番茄疮痂病菌的

田间链霉素耐药菌株

[1]

，之后有关植物病原细菌耐

药性的报道屡见不鲜。向平安等

[2]

检测了7株不同

来源（中国）的辣椒疮痂病菌（Xanthomonasvesicato⁃

ria），发现4株辣椒疮痂病菌具有较高的链霉素耐

受性。Shenge等

[3]

调查了来自坦桑尼亚番茄产区的

番茄细菌性斑点病病原菌（toria），发现所有菌株对铜制剂均有较高的

耐受性。

病原细菌对抗生素或铜制剂较强的适应性和

耐受性，为瓜菜类致病细菌的防治带来挑战。病原

细菌的耐药机制多种多样，而外排泵的发现，开启

了人类认识病原细菌的新篇章。依赖于能量的外

排泵最早在哺乳动物中发现

[4]

。1983年George和Levy首次报道了细菌的外排泵可以增强其多耐抗

生素的能力

[5]

。之后在Escherichiacoli和Pudomo⁃

nasaeruginosa中发现的以耐药结节分化家族（resis⁃tance-nodulation-divisionfamily，RND）为代表的多

耐药外排泵

[6-10]

成为人们关注的焦点。RND多耐药

外排泵对革兰氏阴性细菌耐药性贡献很大，生物信

息学分析表明RND外排泵广泛存在于瓜菜作物病

原细菌中。瓜菜作物RND外排泵不仅可以外排抗

收稿日期：2016-02-23；修回日期：2016-06-30

基金项目：国家西甜瓜产业技术体系（CARS-26）；中国农业科学院科技创新工程项目资助;北京市自然基金（6162023）和公益性行业

（农业）科研专项（201003066）

作者简介：王真，男，在读硕士研究生。研究方向为植物病害综合治理。E-mail：575873060@

通信作者:胡俊，男，教授，植物病害综合治理。E-mail：hujun6202@

赵廷昌，男，研究员，分子植物病理学。E-mail：zhaotgcg@

瓜菜类病原细菌耐药外排泵RND研究进展

王真

1,2

，赵廷昌

2

，杨玉文

2

，关巍

2

，胡俊

1

（1.内蒙古农业大学呼和浩特010019；2.中国农业科学院植物保护研究所·

植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193）

摘要：近年来，瓜菜类作物病原细菌的耐药性日益增强，增加了瓜菜相关病害防治的难度。存在于瓜菜作物病原

细菌中的外排泵耐药结节分化家族（RND）与细菌的耐药性及细菌/植物互作关系密切。笔者根据有关文献综述了

RND外排泵的结构与功能、细菌/植物互作过程中外排泵的作用以及外排泵抑制剂（EPIS）的相关研究进展，为瓜类

和蔬菜类作物病原细菌耐药性的研究提供参考。

关键词：葫芦科；蔬菜；病原细菌；耐药性外排泵；细菌/植物互作；外排泵抑制剂

AdvancesinRND-typemulti-drugeffluxpumpsfromcucurbitandveg⁃

etablepathogenicbacteria

WANGZhen1,2,ZHAOTingchang2,YANGYuwen2,GUANWei2,HUJun1

(InnerMongoliaAgriculturalUniversity,Hohhot010019,InnerMongolia,China；uteofPlantProtection,ChineAcademyofAgri⁃

culturalSciences,StateKeyLaboratoryforBiologyofPlantDiasandInctPests,Beijing100193,China)

Abstract:Inrecentyears,drugresistanceofbacteriacausingdiasoncucurbitsandvegetableshasbeenincreasinglyre⁃

poance-nodulation-divisionfamily(RND)is

oneofthemostimportanteffluxpumpfamilyincucurbitandvegetablepathogenicbacteria,whichisclolyrelatedtobacte⁃

riamultiribestructuresandfunctionsof

RNDeffluxpumps,relationshipsbetweeneffluxpumpsandbacterial/plantinteractionsaswellastherelevantrearchofef⁃

fluxpumpinhibitors(EPIS).Thisreviewwillprovidereferencesforfurtherstudiesondrugresistanceofcucurbitandvegeta⁃

blepathogenicbacteria.

Keywords：Cucurbit;Vegetable;Pathogenicbacteria;Multidrugeffluxpump;Bacterial/plantinteractions;Effluxpumpin⁃

hibitors

··1

Copyright©博看网htsRerved.

中国瓜菜第29卷

专题综述

生素、抗菌素等有害物质，还可以被逆境激活，参与

细菌侵染植物的整个过程

[11-13]

。但相关研究较少，

具体机制还不明确。鉴于此，笔者综述了病原细菌RND外排泵的结构与功能、细菌/植物互作过程中

外排泵的作用及抑制剂等方面的研究进展，以期为

瓜菜作物病原细菌耐药性的研究提供参考。1RND外排泵家族的结构与功能

RND家族是一类三聚体外排泵，包含有内膜蛋

白（IMP），位于周质的膜融合蛋白（MFP）和外膜蛋

白（OMP）

[14]

。这3类蛋白贯穿于细菌的2层膜，协

同完成细菌内有害物质的外排（图1）。可根据其外

排底物的不同将RND外排泵家族分为两类，一类

是疏水性或者两亲性的外排泵（HAE-RND）

[15]

；另一

类是重金属外排泵（HME-RND）。HAE-RND家族

包括AcrAB、MexAB-OprM、MexEF-OprN、MdtAB

和MdtEF等系统，HME-RND家族目前报道的仅有CusCFBA系统[16]

。这2类外排泵广泛存在于瓜类

和蔬菜病原细菌中，笔者以AcrAB和CusCFBA为

代表介绍外排泵的结构与功能。

1.1AcrAB-TolC外排系统的结构与功能

的Acr外排家族系统是RND外排泵研

A：AcrABZ-TolC各部分组成示意图，其中AcrB属于内膜蛋白（IMP），AcrA属于膜周质蛋白（MFP），TolC属于外膜蛋白（OMP）。OM代表

外膜，IM代表内膜。B：AcrB结构中不同阶段外排机理俯视图，图中亚基1、亚基2和亚基3代表了不同的AcrB亚基。

1、外部的凹陷或者裂口通道；2、前庭通道；3、中心区域通道；4、中心腔；5、近端结合区域；6、末梢结合区域；7、漏斗状中心。LMMS代表小

分子质量物质，HMMS代表大分子质量物质。底物分子可以通过1、2和3，3个通道进入AcrB，大分子物质与AcrB在位置5结合，小分子物

质在位置6结合，之后在质子力作用下运输到位置7，最终经过TolC排出细胞外。

图1AcrABZ-TolC外排泵模型[16]

究的模型系统。Acr外排家族系统包括外膜通道TolC、膜内的次级转运蛋白AcrB以及位于周质连接

内外膜的通道蛋白AcrA。AcrB-AcrA-TolC外排泵

可转运多种结构不同的抗生素，赋予了细菌广谱的

抗生素耐药性。

在中，位于周质的AcrA与细胞内膜通

过氨基端脂质修饰连接在一起，其结构域包括周质

膜区域、β桶状区域、硫辛酰区域和α发夹区域

[17]

。

其中α发夹区域与内膜的TolC蛋白结合，其他的

区域可能与AcrB互作

[18-21]

。AcrB贯穿于跨膜结构域和周质结构域[22]

，包括

3个非对称的晶体结构，结构具有可旋转性，可通过

松散（L）、紧凑（T）、开放（O）型3个结构的变化，实

现底物的向外运输功能

[23-25]

（图1）。TolC外膜通道

是由3个TolC单体组成的炮筒状结构

[26]

，这个通道

连接周质穿过细胞外膜一直通向细胞表面

[27]

。

1.2CusCFBA外排系统

CusCFBA外排系统是瓜类和蔬菜作物病原细

菌重要的铜外排系统，在植物病原细菌铜制剂耐受

性方面具有重要的作用。CusCFBA外排系统（图2）

也是最具有代表性的一个HME-RND外排系统。

它可以外排重金属Ag

+

和Cu

+

，同时还可能参与磷霉

2

1

5

6

4

3

7

7

6

1

5

2

4

3

··2

Copyright©博看网htsRerved.

第7期等：瓜菜类病原细菌耐药外排泵RND研究进展

专题综述

素、二硝基苯酚、硝基苯与乙硫异烟胺的外排

[28-29]

，

该外排泵有助于细胞内Cu

+

平衡的维持

[30]

。CusCFBA外排系统由位于内膜的CusA，位于

周质膜的CusB和位于外膜的CusC组成。这与AcrABC结构极为相似，其化学计量学分析结果表

明CusA∶CusB∶CusC为3∶6∶3

[31-32]

。CusB系统包含4个亚结构域：3个β螺旋结构

域和1个α螺旋结构域

[33]

。CusA包含12个跨膜α螺

旋。CusB识别并结合Cu

+

和Ag

+

，之后将Cu

+

和Ag

+

传递给位于周质膜裂缝处CusA的M573、M623和M672等保守氨基酸残基（图3）。接收到重金属离

子的CusA构象会迅速改变，使得这些重金属离子

进入外排泵的周质区域中，或者直接通向细胞外

[34]

。另

外，CusF与CusB相互作用，可能促进周质膜裂缝的

打开；CusC自身的螺旋结构与CusB的α螺旋结构

相互作用，构建了重金属离子的外排通道

[33]

。

2RND耐药外排泵和病原细菌/作物

互作的关系

如今植物基因组学和高通量测序等新技术已

被广泛应用于植物病原细菌毒力、病原细菌/植物互

作以及病原细菌耐药性分析，植物病原细菌Xan⁃

，tris，Ralstoniasolanacearum，Pudomonas

DC3000，Erwiniacarotovorasub⁃ptica和等的

测序工作相继完成

[35-39]

。测序结果显示植物病原细

菌基因组中含有大量的RND外排泵相关基因。RND外排泵不仅在细菌耐药性方面具有重要作用，

而且与细菌的致病性密切相关。另外，病原细菌的RND耐药外排泵还参与细菌体代谢副产物的分泌，

如RND外排泵转运蛋白ToxGHI帮助Burkholderia

glumaeBGR1外排毒黄素

[40]

。Palumbo等最早发现Agrobacteriumtumefaciens

中的外排泵IfeAB运载体可以外排植物分泌的抑菌

性物质异黄酮，并且在细菌定殖寄主作物过程中有

着不可替代的作用

[41]

。在豆类作物病原细菌⁃

licola1448A、⁃

gaeB728a和番茄病原细菌DC3000中，RND转运蛋白复合体MexAB-OprM对

化合物（如抗生素、植物源抗菌素、洗涤剂和染料

等）有着非常高的耐受力。该蛋白复合体还参与细

菌在植物体内的繁殖过程

[42]

。⁃

gae染色体基因编码的PABC家族是其合成丁香

毒素和丁香肽等毒素不可缺少的，pC基因的缺失

会减少植物毒素的合成和分泌量

[43]

。VargasP等

[44]

a中下半部分为CusA分子晶体结构，CusBmolecule1和CusBmolecule2组成了CusB的不对称晶体结构。b为CusBA结构侧面图，下半

部为CusA的结构域，1-6为CusB亚基的不同结构域组成。c为CusBA复合结构的俯视图。

图2CusBA复合结构[31]

图3底物与CusA结合示意图[34]

王真，

··3

Copyright©博看网htsRerved.

中国瓜菜第29卷

专题综述

研究发现，番茄植株分泌的黄酮类物质可诱导丁香

假单胞番茄致病变种菌株PmeR蛋白的过表达，过表达的PmeR可抑制Mex⁃

AB-OprM外排系统。PmeR和MexAB-OprM构成

的互作系统，与菌株在番茄植

株上的定殖密切相关。对丁香假单胞烟草致病变

种鞭毛蛋白FliC的研究表明，

ΔfliC较野生型菌株致病力和运动性都显著降低，但

是mexEFoprN（RND外排系统编码基因）基因的表

达量急剧上升。IV型菌毛（T4P）缺陷型突变体Δpi⁃

lA，其菌株富集能力及对烟草的致病力明显减弱，参

与其多耐药外排泵MEX的相关基因mexABoprM的

表达量明显上升

[45]

。可见RND外排泵不仅在逆境

适应、有害物质外排等方面有重要的作用，而且在

ae中与细菌的侵染力也密切相关。

nthemi具有2个AcrAB外排系统，它

们不仅可以帮助细菌抵抗菊苣分泌的抗菌肽硫素，

而且辅助细菌定殖菊苣叶片，引起病害

[46]

。有研究

认为nthemi侵染植物，导致寄主植物水杨

酸等抗菌物质分泌增多，而这些有毒的抗菌物质正

好激活了细菌多耐药外排泵编码基因的表达，提高

了细菌的侵染成活率

[47]

。该菌株中tolC编码51kDa的

蛋白与中TolC蛋白同源性高达70%。tolC

基因缺失突变体不能外排盐酸小檗碱；突变体在寄

主植物内可以存活，但生长较慢，不足以造成

病害

[11]

。Brown等

[48]

通过对青枯菌（⁃

nacearum）多耐药外排泵相关基因acrA和dinF的

功能研究发现缺失突变株对抗生素、植物毒素和洗

涤剂的耐受性明显低于野生菌株；对番茄植株侵染

力相对较弱。这一结果也证实了RND外排泵在瓜

菜病原细菌中具有双重作用。

梨火疫病菌（ora）主要侵染蔷薇科作

物。在侵染初期，病原细菌会暴露在植物体表面，

并被植物分泌的大量抗菌素包围。染料木黄酮是

豆科作物或者非豆科作物分泌的异黄酮类抗菌

素

[49-50]

，是植物抗毒素Phytoalexins和Phytoanticipins

路径合成抗菌素的前体

[51-52]

。BurA等

[53]

发现蔷薇

科分泌的异黄酮类抗菌素可诱导ora中外

排泵编码基因acrAB的大量表达；acrB缺失突变株

致病力降低，对于果树分泌的抗菌素变得敏感。这

与Al-KarabliehN等的研究结果不符。Al-KarabliehN等发现，ora基因tolC和

acrB/tolC的缺失突变体对植物分泌的抗菌素及一

些合成的抗菌剂较野生型敏感，而acrB缺失突变株

对相关抗生素并不敏感。另外tolC和acrB/tolC缺

失突变株的毒力并没有降低，TolC可能通过与AcrAB的互作来保持植物体表面毒素的平衡，以辅

助ora突破植物表层保护组织

[54]

。在AcrB

外排泵缺失的突变株中，过表达转运蛋白MdtABC

和MdtUVW，可以使ora对黄酮类、梭链孢

酸和新生霉素产生耐受性。MdtABC介导⁃

lovora对胆盐、硝酸盐的抗性，其表达受双组份调节

系统BaeSR的调节；MdtUVW介导其对克霉唑的耐

受性。MdtABC和MdtUVW的缺失也会阻碍细菌

对寄主植物的侵染

[55]

。他们还证明了外排蛋白NorM在ora侵染植株花器官时，可以与花

柱上寄生的分泌抗菌素类物质的泛菌属竞争空间

和营养，帮助ora完成侵染。而norM基因

缺失突变株的毒力并没有降低，自然条件下致病力

却下降

[56]

。

有关植物病原细菌铜制剂耐受性的研究较多，

但是大都集中在对Cop系统的研究，有关Cus系统

的研究相对较少

[57-60]

。Gutiérrez-Barranquero等通过

对ae全基因组信息的分析发现ae

的铜耐受性是由CopG、CusCBA和CopABCD操纵

子协同作用完成的

[61]

。另外，刘星

[62]

验证了Acidovo⁃

raxcitrulliRND外排泵相关基因cusB与Acidovorax

citrulli菌株的铜耐受性密切相关。cusB缺失突变株

较野生型对铜制剂更加敏感，但不影响致病力。3外排泵抑制剂的开发

外排泵抑制剂（EPIs）是一类抑制细菌外排泵功

能的药物。利用它可使低浓度的抗生素起到较高

的抗菌效果，同时减少细菌耐药性的发生。它还可

以抑制生物膜的形成，降低病原菌的毒力。EPIs的

研究与应用对于瓜菜细菌性病害的防治意义重大，

但是相关研究难度较大。在实验室条件下，有效的EPIs已经有不少报道，但是目前还没有可以应用于

实践的EPIs。

3.1RNDEPIs选取原则

实验应用中EPIs必须具备以下几个特点：第

一，能促进细菌外排泵相关基因的表达；第二，药剂

本身对细胞无损害；第三，在其发挥作用的同时不

影响质子的跨膜运输；第四，不能增加非外排抗生

素的活性；第五，不能影响抗生素的活性。这些限

制因素使得实际筛选EPIs时困难重重。例如，对细

菌能量平衡影响较大的羰基氰氯苯腙（CCCP）可作

为一种抑制细菌外排泵的化合物。然而，该类化合

··4

Copyright©博看网htsRerved.

第7期等：瓜菜类病原细菌耐药外排泵RND研究进展

专题综述

物严重消耗了细菌膜质子动力，从而导致了细菌的

死亡

[63]

。再如，外排泵调控基因有很多，而且调控功

能多且复杂，很难通过对一种或者一类调控基因的

抑制作用深入解析其抑制外排泵的分子机制，同

时，在理论研究上，对于大部分调控基因的作用机

制尚不明确，加大了研究难度。

3.2研究较多的EPIs

目前研究较多的2类EPIs包括肽类EPIs和吡

啶并嘧啶类EPIs，它们也是最具代表性的2类EPIs。

3.2.1肽类EPIsPAβN（苯丙氨酸-精氨酸-氨酸

萘酰胺，起初称为MC-207，110），英文全称phenyl⁃alanylarginylβ-naphthylamide，是研究最早最有价

值的一种EPI

[64]

，其结构如图4。Renau等通过对

Pudomonasaeruginosa中MexAB、MexCD和Mex⁃EF基因过表达，从200000个可增强nosa

菌株敏感性的小分子EPIs中筛选得到了该化

合物

[65]

。PAβN作为外排泵的结合底物，与抗生素

竞争结合区域

[66]

，提高细胞内抗生素浓度，从而达到

抑制抗生素外排的作用。作为一种广谱性的EPIs，

它还可以使结构不同的抗生素如氟喹诺酮类、大环

内酯类、恶唑烷酮类、氯霉素和利福平等抗生素恢

复生物活性，但不能恢复β内酰胺以及氨基糖苷类

抗生素活性

[64]

。这类化合物最突出的优点在于，它

很难使细菌对其产生耐药性。但是该类化合物的

亲和力较差，必须当底物浓度积累到一定程度才能

发挥作用

[67]

。此类化合物会阻碍细胞膜的功能，对

细胞具有一定的毒性

[68]

，这限制了其应用前景。然

而PAβN衍生物如MC-04，124，在细胞液中的稳定

性高，且毒性很小，同时不会使外排泵的调控基因

表达过高

[69]

。3.2.2吡啶并嘧啶类EPIs-ABI-PP（D13-9001）

D13-9001（图4）是与RND外排泵作用过程研究最

清楚的一类EPIs。其作用机制是D13-9001与AcrB、MexB的疏水端结合，影响AcrB/MexB的空间

结构的改变，破坏底物与AcrB/MexB末端的运输通

道造成外排泵功能故障，药物在细菌体内积累，进

而达到抑制外排的效果

[70]

。D13-9001的亲水端存

在于细菌外排泵的通道，可能阻碍底物与外排泵在

这一区域的结合。

与肽类EPIs-PAβN相比，吡啶并嘧啶类

EPIs-ABI-PP安全低毒或无毒、水溶性好、药效突

出

[71]

，具有较大的应用前景。它可以特异性地抑制AcrAB-TolC和MexAB-OprM外排泵，但是对

MexXY-OprM外排泵没有抑制效果[72]

，这也是它没

能应用于实践中的主要原因。4展望

外排泵广泛存在于瓜类和蔬菜作物病原细菌

中，在细菌抵抗外界胁迫过程中发挥着重要作用。

（A）PAβN（MC-207，110）及其衍生物（MC-04，124）；（B）吡啶并嘧啶衍生物（D13-9001）。

图4两类抗生素的分子式[64]

王真，

··5

Copyright©博看网htsRerved.

中国瓜菜第29卷

专题综述

目前有关RND外排泵结构与功能、外排抑制剂等

的研究已取得很大的进展。植物病原细菌⁃

gae，ciens，Rhizobiumetli和Bradyrhizobium

japonicum中相关多耐药RND外排泵的研究已见报

道，但相关机制并不清楚

[73-75]

。RND多耐药外排泵是细胞代谢的外排结构，在

细胞代谢中具有重要作用。在正常的细菌体内，RND外排泵相关基因的表达应该有特定的生理调

节方式，对这一调控体系的研究有助于我们了解细

菌适应环境的机制。另外，有关植物分泌物对病原

细菌的吸引导致病害发生的研究甚多

[76]

。然而，病

原细菌RND多耐药外排泵对植物分泌物的响应机

制的研究，可以说还是一个未开发的领域。已经有

研究证明，细菌RND外排泵直接参与细菌有毒物

质的外排

[77]

，植物分泌的抗菌素类外排底物或许可

以作为生物源药剂，通过化学合成其类似物并用于

对细菌的防治。针对RND多耐药外排泵在病原细

菌/植物互作中的重要作用的研究，也将给我们对细

菌致病机制、入侵手段、植物防御特点等的研究提

供思路。

综上所述，系统研究植物病原细菌RND多耐

药外排泵对病原细菌的科学防治具有重大意义。

相信随着分子生物学、生物信息学等相关领域的发

展，对于外排泵的研究会更加的深入，这也将会给

瓜菜细菌性病害的防治提供新的更好的措施。

参考文献

[1]STALLRE，omycinresistanceofthebacteri⁃

alspotpathogenandcontrolwithstreptomycin[J].，

1962，46：389-392.

[2]向平安，周燕，高必达.辣椒疮痂病菌（Xanthomonasvesicato⁃

ria）和水稻细菌性条斑病菌（ola）的质粒及

其与耐链霉素和耐铜性关系[J].植物病理学报，2003（4）：

330-333.

[3]SHENGEKC，MABAGALARB，MORTENSENCN，⁃

toriaisolatesfromTan⁃

zaniatocopperandimplicationsforbacterialspotmanagement

[J].AfricanJournalofMicrobiologyRearch，2014，8（30）：

2881-2885.

[4]GOTTESMANMM，ecularbasisofmultidrugre⁃

sistanceincancer：theearlyyearsofP-glycoproteinrearch[J].

FEBSletters，2006，580（4）：998-1009.

[5]GEORGEAM，iableresistancetotetracycline，

chloramphenicol，andotherantibioticsinEscherichiacoli：involve⁃

mentofanon-plasmid-determinedeffluxoftetracycline[J].Jour⁃

nalofBacteriology，1983，155（2）：531-540.

[6]MAD，COOKDN，ALBERTIM，larcloningand

characterizationofacrAandacrEgenesofEscherichiacoli[J].

JournalofBacteriology，1993，175（19）：6299-6313.

[7]POOLEK，KREBESK，MCNALLYC，leantibioticre⁃

sistanceinPudomonasaeruginosa：evidenceforinvolvementof

aneffluxoperon[J].Journalofbacteriology，1993，175（22）：

7363-7372.

[8]LIXZ，LIVERMOREDM，effluxpump（s）

inintrinsicresistanceofPudomonasaeruginosa：resistanceto

tetracycline，chloramphenicol，andnorfloxacin[J].Antimicrobial

agentsandchemotherapy，1994，38（8）：1732-1741.

[9]LIXZ，MAD，LIVERMOREDM，effluxpump（s）

inintrinsicresistanceofPudomonasaeruginosa：activeeffluxas

acontributingfactortobeta-lactamresistance[J].Antimicrobial

agentsandchemotherapy，1994，38（8）：1742-1752.

[10]LIXZ，NIKAIDOH，mexA-mexB-oprMinan⁃

tibioticeffluxinPudomonasaeruginosa[J].Antimicrobial

agentsandchemotherapy，1995，39（9）：1948-1953.

[11]BARABOTERD，JOHNSONOL，ZETINAE，achry⁃

santhemitolCisinvolvedinresistancetoantimicrobialplant

chemicalsandisntialforphytopathogenesis[J].Journalof

bacteriology，2003，185（19）：5772-5778.

[12]LÓPEZSOLANILLAE，LLAMAPALACIOSA，COLLMERA，et

veeffectsonvirulenceofmutationsinthesap,pel,and

hrplociofErwiniachrysanthemi[J].Molecularplant-microbein⁃

teractions，2001，14（3）：386-393.

[13]LÓPEZSOLANILLAE，GARCÍAOLMEDOF，RO⁃

DRÍvationofthesapAtosapFlo⁃

cusofErwiniachrysanthemirevealscommonfeaturesinplantand

animalbacterialpathogenesis[J].ThePlantCell，1998，10（6）:

917-924.

[14]ureandmechanismofRND-typemultidrugef⁃

fluxpumps[J].Advancesinenzymologyandrelatedareasofmo⁃

lecularbiology，2011，77：1.

[15]-mediatedheavymetalresistanceinprokaryotes

[J].FEMSmicrobiologyreviews，2003，27（2/3）：313-339.

[16]ANESJ，MCCUSKERMP，FANNINGS，andouts

ofRNDEffluxPumpsinEscherichiacoli[J].FrontiersinMicrobi⁃

ology，2015，6：587.

[17]SYMMONSMF，BOKMAE，KORONAKISE，em⁃

bledstructureofacompletetripartitebacterialmultidrugefflux

pump[J].ProceedingsoftheNationalAcademyofSciences，

2009，106（17）：7173-7178.

[18]ELKINSCA，icanalysisofAcrAfunctionre⁃

vealstheimportanceofitsC-terminaldomaininitsinteraction

withtheAcrBmultidrugeffluxpump[J].Journalofbacteriology，

2003，185（18）：5349-5356.

[19]LOBEDANZS，BOKMAE，SYMMONSMF，lasmic

coiled-coilinterfaceunderlyingTolCrecruitmentandtheasm⁃

blyofbacterialdrugeffluxpumps[J].ProceedingsoftheNational

AcademyofSciences，2007，104（11）：4612-4617.

[20]KIMHM，XUY，LEEM，onalrelationshipsbetween

theAcrAhairpintipregionandtheTolCaperturetipregionfor

theformationofthebacterialtripartiteeffluxpumpAcrAB-TolC

··6

Copyright©博看网htsRerved.

第7期等：瓜菜类病原细菌耐药外排泵RND研究进展

专题综述

[J].Journalofbacteriology，2010，192（17）：4498-4503.

[21]KIMJS，JEONGH，SONGS，ureofthetripartitemul⁃

tidrugeffluxpumpAcrAB-TolCsuggestsanalternativeasmbly

mode[J].Moleculesandcells，2015，38（2）：180.

[22]HUSAINF，atepathintheAcrBmultidrugef⁃

fluxpumpofEscherichiacoli[J].Molecularmicrobiology，2010，

78（2）：320-330.

[23]MURAKAMIS，NAKASHIMAR，YAMASHITAE，l

structuresofamultidrugtransporterrevealafunctionallyrotating

mechanism[J].Nature，2006，443（7108）：173-179.

[24]SEEGERMA，VONBALLMOOSC，EICHERT，⁃

neereddisulfidebondssupportthefunctionalrotationmechanism

ofmultidrugeffluxpumpAcrB[J].Naturestructural&molecular

biology，2008，15（2）：199-205.

[25]SEEGERMA，SCHIEFNERA，EICHERT，uralasym⁃

metryofAcrBtrimersuggestsaperistalticpumpmechanism[J].

Science，2006，313（5791）：1295-1298.

[26]KORONAKISV，SHARFFA，KORONAKISE，l

structureofthebacterialmembraneproteinTolCcentraltomulti⁃

drugeffluxandproteinexport[J].Nature，2000，405（6789）：

914-919.

[27]HINCHLIFFEP，SYMMONSMF，HUGHESC，ure

andoperationofbacterialtripartitepumps[J].Annualreviewof

microbiology，2013，67：221-242.

[28]NISHINOK，isofacompletelibraryof

putativedrugtransportergenesinEscherichiacoli[J].Journalof

bacteriology，2001，183（20）：5803-5812.

[29]CONROYO，KIMEH，MCEVOYMM，ingabilityto

transportnonmetalsubstratesbytwoRND-typemetalexporters

[J].FEMSmicrobiologyletters，2010，308（2）：115-122.

[30]RADEMACHERC，-responsivegenereg⁃

ulationinbacteria[J].Microbiology，2012，158（10）：2451-2464.

[31]SUCC，LONGF，ZIMMERMANNMT，lstructureof

theCusBAheavy-metaleffluxcomplexofEscherichiacoli[J].Na⁃

ture，2011，470（7335）：558-562.

[32]DELMARJA，SUCC，ialmultidrugeffluxtrans⁃

porters[J].Annualreviewofbiophysics，2014，43：93-117.

[33]LONGF，SUCC，LEIHT，ureandmechanismofthe

tripartiteCusCBAheavy-metaleffluxcomplex[J].Philosophical

TransactionsoftheRoyalSocietyofLondonB：BiologicalScienc⁃

es，2012，367（1592）：1047-1058.

[34]SUCC，LONGF，LEIHT，daminoacids（R83，

E567，D617，E625，R669，andK678）ofCusAarerequiredfor

metaliontransportintheCuffluxsystem[J].Journalofmolecu⁃

larbiology，2012，422（3）：429-441.

[35]SILVAAC，FERROJA，REINACHFC，isonofthe

genomesoftwoXanthomonaspathogenswithdifferinghostspeci⁃

ficities[J].Nature，2002，417（6887）：459-463.

[36]LEEBM，PARKYJ，PARKDS，omequenceof

XanthomonasoryzaepathovaroryzaeKACC10331，thebacterial

blightpathogenofrice[J].Nucleicacidsrearch，2005，33（2）：

577-586.

[37]BUELLCR，JOARDARV，LINDEBERGM，plete

genomequenceoftheArabidopsisandtomatopathogenPudo⁃

DC3000[J].ProceedingsoftheNation⁃

alAcademyofSciences，2003，100（18）：10181-10186.

[38]BELLKS，SEBAIHIAM，PRITCHARDL，⁃

quenceoftheenterobacterialphytopathogenErwiniacarotovora

pticaandcharacterizationofvirulencefactors[J].Pro⁃

ceedingsofthenationalAcademyofSciencesoftheUnitedStates

ofAmerica，2004，101（30）：11105-11110.

[39]SALANOUBATM，GENINS，ARTIGUENAVEF，

quenceoftheplantpathogenRalstoniasolanacearum[J].Na⁃

ture，2002，415（6871）：497-502.

[40]KIMJ，KIMJG，KANGY，nsingandtheLy⁃

sR-typetranscriptionalactivatorToxRregulatetoxoflavinbiosyn⁃

thesisandtransportinBurkholderiaglumae[J].Molecularmicrobi⁃

ology，2004，54（4）：921-934.

[41]PALUMBOJD，KADOCI，lavonoid-in⁃

ducibleeffluxpumpinAgrobacteriumtumefaciensisinvolvedin

competitivecolonizationofroots[J].Journalofbacteriology，1998，

180（12）：3107-3113.

[42]STOITSOVASO，BRAUNY，ULLRICHMS，teriza⁃

tionoftheRND-typemultidrugeffluxpumpMexAB-OprMofthe

plantpathogenPudomonassyringae[J].Appliedandenviron⁃

mentalmicrobiology，2008，74（11）：3387-3393.

[43]KANGH,terizationofaresistance-nodula⁃

tion-celldivisiontransportersystemassociatedwiththesyr-syp

ae[J].Applied

andenvironmentalmicrobiology,2005,71（9）:5056-5065.

[44]VARGASP，FELIPEA，MICHÁNC，ionofPudo⁃

DC3000MexAB-OprMmultidrugef⁃

fluxpumpbyflavonoidsismediatedbytherepressorPmeR[J].

Molecularplant-microbeinteractions，2011，24（10）：

1207-1219.

[45]ICHINOSEY，SAWADAT，MATSUIH，ty-mediated

regulationofvirulenceinPudomonassyringae[J].Physiological

andMolecularPlantPathology，2016.

[46]VALECILLOSAM,，PALENZUELAPR，LÓPEZSOLANILLAE.

TheroleofveralmultidrugresistancesystemsinErwiniachry⁃

santhemipathogenesis[J].Molecularplant-microbeinteractions，

2006，19（6）：607-613.

[47]RAVIRALARS，BARABOTERD，WHEELERDM，⁃

fluxpumpgeneexpressioninErwiniachrysanthemiisinducedby

exposuretophenolicacids[J].Molecularplant-microbeinterac⁃

tions，2007，20（3）：313-320.

[48]BROWNDG，SWANSONJK，t-inducedRal⁃

stoniasolanacearumgenes，acrAanddinF,encodemultidrugef⁃

fluxpumpsandcontributetobacterialwiltvirulence[J].Applied

andenvironmentalmicrobiology，2007，73（9）：2777-2786.

[49]VANRHIJNP，zobium-plantsym⁃

biosis[J].Microbiologicalreviews，1995，59（1）：124-142.

[50]YUO，JUNGW，SHIJ，tionoftheisoflavonesgenis⁃

teinanddaidzeininnon-legumedicotandmonocottissues[J].

王真，

··7

Copyright©博看网htsRerved.

中国瓜菜第29卷

专题综述

Plantphysiology，2000，124（2）：781-794.

[51]AKEDAY，NAGAYAMAK，YAMAMOTOK，vephe⁃

notypeofVibrioparahaemolyticus[J].JournalofInfectiousDias⁃

es，1997，176（3）：822-824.

[52]BAEEA，JOOHANM，oAnti-Helicobocterpylo⁃

riactivityoflrisolidoneisolatedfromtheflowersandrhizomesof

Puercirici[J].PlantaMed，2001，67：161-163.

[53]BURSEA，WEINGARTH，toalexin-in⁃

duciblemultidrugeffluxpumpAcrABcontributestovirulencein

thefireblightpathogen，Erwiniaamylovora[J].Molecular

plant-microbeinteractions，2004，17（1）：43-54.

[54]ALKARABLIEHN，WEINGARTH，er

membraneproteinTolCisrequiredforphytoalexinresistanceand

virulenceofthefireblightpathogenErwiniaamylovora[J].Micro⁃

bialbiotechnology，2009，2（4）：465-475.

[55]PLETZERD，terizationandregulationof

theResistance-Nodulation-CellDivision-typemultidrugefflux

pumpsMdtABCandMdtUVWfromthefireblightpathogenEr⁃

winiaamylovora[J].BMCmicrobiology，2014，14（1）：1.

[56]BURSEA，WEINGARTH，，anErwiniaam⁃

ylovoramultidrugeffluxpumpinvolvedininvitrocompetition

withotherepiphyticbacteria[J].Appliedandenvironmentalmi⁃

crobiology，2004，70（2）：693-703.

[57]VOLOUDAKISAE，REIGNIERTM，⁃

⁃

toria[J].Appliedandenvironmentalmicrobiology，2005，71（2）：

782-789.

[58]BENDERCL，nousplasmidsinPudo⁃

：conjugativetransferandroleincopper

resistance[J].JournalofBacteriology，1986，165（2）：534-541.

[59]CHAJS，hypernsitivityanduptakein

Pudomonassyringaecontainingclonedcomponentsofthecop⁃

perresistanceoperon[J].Appliedandenvironmentalmicrobiolo⁃

gy，1993，59（5）：1671-1674.

[60]李强，杨玉文，孙柏欣，等.瓜类及蔬菜等植物病原细菌抗铜机

制研究进展[J].中国瓜菜，2014，27（3）：5-9.

[61]GUTIÉRREZBARRANQUEROJA，DEVICENTEA，CAR⁃

RIÓNVJ，tmentandrearrangementofthreedifferent

geneticdeterminantsintoaconjugativeplasmidincreacopper

resistanceinPudomonassyringae[J].Appliedandenvironmen⁃

talmicrobiology，2013，79（3）：1028-1033.

[62]刘星.西瓜食酸菌RND蛋白家族外排转运体cusB基因抗铜

功能研究[J].微生物学通报，2016，43（1）：97−106.

[63]MAHAMOUDA，CHEVALIERJ，ALIBERTFRANCOS，etal.

AntibioticeffluxpumpsinGram-negativebacteria：theinhibitor

responstrategy[J].JournalofAntimicrobialChemotherapy，

2007，59（6）：1223-1229.

[64]LOMOVSKAYAO，WARRENMS，LEEA，fication

andcharacterizationofinhibitorsofmultidrugresistanceefflux

pumpsinPudomonasaeruginosa：novelagentsforcombination

therapy[J].AntimicrobialAgentsandChemotherapy，2001，45

（1）：105-116.

[65]RENAUTE，LÉGERR，FLAMMEEM，torsofEfflux

PumpsinPudomonasaeruginosapotentiatetheactivityofthe

FluoroquinoloneAntibacterialLevofloxacin[J].Journalofmedici⁃

nalchemistry，1999，42（24）：4928-4931.

[66]LOMOVSKAYAO，ZGURSKAYAHI，TOTROVM，⁃

ingtransportersand“thedancemacabre”betweenhumansand

bacteria[J].NaturereviewsDrugdiscovery，2007，6（1）：56-65.

[67]POOLEK，luxinhibitorsreallycoun⁃

terresistance?[J].DrugDiscoveryToday：TherapeuticStrategies，

2006，3（2）：145-152.

[68]MATSUMOTOY，HAYAMAK，SAKAKIHARAS，⁃

tionofmultidrugeffluxpumpinhibitorsbyanewmethodusing

microfluidicchannels[J].PLoSOne，2011，6（4）：e18547.

[69]WATKINSWJ，LANDAVERRYY，LÉGERR，ation⁃

shipbetweenphysicochemicalproperties，invitroactivityand

pharmacokineticprofilesofanaloguesofdiamine-containingef⁃

fluxpumpinhibitors[J].Bioorganic&medicinalchemistrylet⁃

ters，2003，13（23）：4241-4244.

[70]NAKASHIMAR，SAKURAIK，YAMASAKIS，ural

basisfortheinhibitionofbacterialmultidrugexporters[J].Na⁃

ture，2013，500（7460）：102-106.

[71]YOSHIDAK，NAKAYAMAK，OHTSUKAM，⁃

AB-OprMspecificeffluxpumpinhibitorsinPudomonasaerugi⁃

7：highlysolubleandinvivoactivequaternaryammoni⁃

umanalogueD13-9001，apotentialpreclinicalcandidate[J].Bio⁃

organic&medicinalchemistry，2007，15（22）：7087-7097.

[72]NAKAYAMAK，ISHIDAY，OHTSUKAM，⁃

AB-OprM-specificeffluxpumpinhibitorsinPudomonasaeru⁃

1：discoveryandearlystrategiesforleadoptimization

[J].Bioorganic&medicinalchemistryletters，2003，13（23）：

4201-4204.

[73]GONZÁLEZPASAYOR，MARTÍesis⁃

tancegenesofRhizobiumetliCFN42[J].Molecularplant-mi⁃

crobeinteractions，2000，13（5）：572-577.

[74]KRUMMENACHERP，encodinga

putativemultidrugeffluxpumpoftheRND/MFPfamilyarecotran⁃

scribedwithanrpoHgeneinBradyrhizobiumjaponicum[J].Gene，

2000，241（2）：247-254.

[75]PENGWT，terizationofaputative

RND-typeeffluxsysteminAgrobacteriumtumefaciens[J].Gene，

2001，270（1）：245-252.

[76]CORNELISGR，lyandfunctionof

typeIIIcretorysystems[J].AnnualReviewsinMicrobiology，

2000，54（1）：735-774.

[77]CHUANCHUENR，NARASAKICT，

MexJKeffluxpumpofPudomonasaeruginosarequiresOprMfor

antibioticeffluxbutnotforeffluxoftriclosan[J].JournalofBacte⁃

riology，2002，184（18）：5036-5044.

··8

Copyright©博看网htsRerved.