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考马斯亮蓝染色中G250与R250的区别

考马斯亮蓝染色中G250与R250的区别

Update:2009-03-15From::

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R250属于慢染，脱色脱的完全，G250属于快染，脱色脱的

不彻底。R250(Coomassiebrilliantblue

R250).C45H44O7H3S2Na,MW=824,λmax=560―590nm.染

色灵敏度比氨基黑高5倍.尤其适用于SDS电泳微量蛋白质

染色.但蛋白质浓度超出一定范围时,对高浓度蛋白的染色不

符合Beer定律,用作定量分析时要注意这点.

G250,又名XylenebrilliantcyaninG.比考马斯亮蓝R250多

二个甲基.MW=854;λmax=590―610nm.染色灵敏度不如

R250,但比氨基黑高3倍.优点在于它在三氯乙酸中不溶而成

胶体,能选择地染色蛋白而几乎无本底色.所以常用于需要重

复性好和稳定的染色,适于作定量分析.G250中的G就是

Green，偏绿，R250中的R代表Red，偏红，在进行小分

子量蛋白的Tricine电泳是常用G250染色，至于加热，染

和脱色都可以加热，但都是在急需知道结果的情况下采

用，加热后染的背景色很重脱色时间就长而且很难将背景

色脱干净，脱色液经常加热会导致固定剂的会发，很快脱

色剂就没用了，脱色效果很差，而且加热挥发出来的甲醛

对呼吸道有刺激作用因此尽量不要加热！CoomassieG

(green)-250isgreenish,stainsbrightblue,islesssoluble

andudincolloidalform(stainentersaproteinbetterthan

theacrylamide,sobackgroundisminimized).CoomassieR

(red)-250dyeisreddish,stainsdarkblueandismore

soluble,usuallyresultinginhighbackground.