麻磺碱

麻黄碱和伪麻黄碱的毛细管电泳分离研究

目的建立毛细管电泳分离麻黄碱与伪麻黄碱的方法。方法分别以甲基化

-β-环糊精和羟丙基-β-环糊精为添加剂，采用毛细管电泳法分离麻黄碱和伪麻黄

碱。考察添加剂的种类和浓度、缓冲溶液的浓度和pH值、运行电压、有机溶剂

对麻黄碱和伪麻黄碱分离的影响。结果采用甲基化-β-环糊精和羟丙基-β-环糊精

为添加剂均可以使麻黄碱和伪麻黄碱实现分离。前者的最佳分离条件为：分离电

压10kV，25mmol/LTris-磷酸缓冲液（pH2.42）含20mg/mL甲基化-β-环糊精，

此条件下麻黄碱和伪麻黄碱的分离度为1.56，在13min内获得快速基线分离；

后者的最佳分离条件为：分离电压10kV，25mmol/LTris-H3PO4缓冲液（pH3.00）

含50mg/mL羟丙基-β-环糊精，此条件下麻黄碱和伪麻黄碱的分离度为2.73，在

15min内获得快速基线分离。结论此方法可靠、快速、重复性好，可作为麻黄

碱和伪麻黄碱分离测定的方法。

Abstract：ObjectiveToestablishacapillaryelectrophoresismethodtoparate

sRM-β-CDandHP-β-CDweretas

ectsoftypesand

concentrationsofadditives，theconcentrationsandpHvaluesofbufferedsolution，

runningvoltageandorganicsolventontheparationofephedrineand

sEphedrineandpudoephedrinecould

besuccessfullyparatedbyusingeitherRM-β-CDorHP-β-

RM-β-CDwasudasadditive，thebestparationconditionswereasfollows：

parationvoltage10kV，25mmol/LTris-H3PO4（pH2.42），20mg/mLof

RM-β-heconditions，theresolutionofephedrineandpudoephedrine

-β-CDwas

udasadditive，thebestparationconditionswereasfollows：parationvoltage

10kV，25mmol/LTris-H3PO4（pH3.00），50mg/mLofHP-β-he

conditions，theresolutionofephedrineandpudoephedrinewas2.73andtheywere

sionThismethodisreliable，rapidand

eudasparationdeterminationmethodforephedrineand

pudoephedrine.

Keywords：ephedrine；pudoephedrine；capillaryelectrophoresis；

cyclodextrin

麻黃具有发汗解表、宣肺平喘等功效，生物碱类成分是其主要活性成分，其

中麻黄碱和伪麻黄碱是最主要的活性成分，二者互为立体异构体。麻黄碱具有平

喘、抑制高血糖、兴奋中枢神经和交感神经等作用，伪麻黄碱具有抗炎和利尿作

用，是麻黄药材质量控制的指标性成分[1]。目前分离麻黄碱和伪麻黄碱的方法

主要有高效液相色谱法[2-4]、气相色谱法[5-6]、薄层扫描法[7]、毛细管电泳法

[8-10]等。毛细管电泳法由于分离速度快、模式多、消耗少等特点在手性分离分

析中具有明显优势。目前采用毛细管电泳法对麻黄碱和伪麻黄碱进行分离的报

道，主要是在分离过程中加入氨基酸[11]、络合物[12-13]、离子液体[14]、有机

添加剂[15]等改变二者的淌度，或对二者进行衍生后改变淌度使其分离[16]。本

试验以环糊精衍生物为添加剂，采用毛细管电泳分离麻黄碱与伪麻黄碱，为麻黄

的质量控制提供新思路。

1仪器与试药

毛细管规格为75mm内径，360mm外径（河北永年锐沣色谱器件有限公司）。

TriSep-2100电色谱系统（通微，UnimicroTechnologies），TriSep2003色谱工作站

（通微，UnimicroTechnologies），FE20/EL20实验室pH计，梅特勒-托利多仪器

（上海）有限公司。β-环糊精、磺丁基-β-环糊精、羟丙基-β-环糊精、甲基化-β-

环糊精，山东滨州智源生物科技有限公司；盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱，中国食

品药品检定研究院；磷酸、氢氧化钠、甲醇、乙腈、三羟甲基氨基甲烷（Tris）

等均为分析纯，水为去离子水。

2方法与结果

2.1溶液及样品配制

吸取一定体积的0.1mol/L磷酸，滴加0.1mol/LTris至所需pH，然后加入

适量水，得到一定浓度的Tris-磷酸缓冲溶液。取适量添加剂，直接加入上述溶

液中，即得到含一定浓度添加剂的缓冲溶液，经过0.45μm滤膜过滤，再超声脱

气15min后使用。

称取盐酸麻黄碱、酸盐伪麻黄碱适量，用80%甲醇配成终浓度均约为1.00

mg/mL的混合样品。

2.2毛细管电泳条件

石英毛细管柱总长度为60cm，有效长度40cm；温度为室温；检测波长214

nm；虹吸进样，高度10cm，时间5s。每日分析前依次用1mol/L氢氧化钠溶液、

水、缓冲液对毛细管进行冲洗，每次分析之间用电泳缓冲液冲洗2min。

2.3分离度计算方法

麻黄碱和伪麻黄碱分离度计算：Rs=2（tR2-tR1）/（W1+W2）。其中tR1、tR2

分別为两峰的保留时间，W1、W2分别为两峰的峰宽。

2.4添加剂种类的选择

麻黄碱和伪麻黄碱为立体异构体，可采用环糊精及其衍生物为手性添加剂对

其进行分离。以25mmol/LTris-磷酸（pH3.00）为缓冲溶液，在15kV电压条件

下，分别以浓度均为15mg/mLβ-环糊精、羟丙基-β-环糊精、磺丁基-β-环糊精、

甲基化-β-环糊精为添加剂，考察添加剂种类对分离的影响。

结果显示，β-环糊精、磺丁基-β-环糊精选择性较差，改变条件后均未能完全

分离麻黄碱与伪麻黄碱；甲基化-β-环糊精、羟丙基-β-环糊精对麻黄碱与伪麻黄

碱有很好的分离效果和选择性，且峰形较好，分离色谱图见图1、图2。故可选

用羟丙基-β-环糊精、甲基化-β-环糊精为添加剂，并进行系统的条件优化实验。

2.5缓冲溶液种类的选择

磷酸盐缓冲溶液由于可调pH范围较宽，因此常用作毛细管电泳的缓冲溶液。

试验考察NaOH-H3PO4和Tris-H3PO4对分离的影响，结果发现相同pH和浓度

条件下2种缓冲溶液体系的分离结果相似，故选用Tris-H3PO4缓冲体系进行浓

度和pH的考察。

2.6缓冲溶液浓度的选择

以羟丙基-β-环糊精为添加剂，考察了Tris-H3PO4（pH3.00）缓冲溶液浓度

在10～50mmol/L范围内变化时麻黄碱、伪麻黄碱的手性分离效果，结果见图3。

可见，随着缓冲溶液浓度增高，麻黄碱和伪麻黄碱的分离度逐渐升高。原因可能

是缓冲溶液浓度高时，电渗流较小，样品和手性添加剂有较长的相互作用时间，

有利于麻黄碱和伪麻黄碱的拆分。但缓冲溶液浓度较高时电流较大，焦耳热现象

较严重，容易了生断流，故选择浓度为25mmol/L，通过改变添加剂浓度、分离

电压等对分离结果进行优化。

2.7缓冲溶液pH值对分离的影响

缓冲溶液的pH值一方面影响样品的带电性质，另一方面对电渗流的大小有

直接影响，因此会对分离产生重要影响。试验中使用25mmol/LTris-H3PO4为缓

冲溶液，分别以羟丙基-β-环糊精和甲基化-β-环糊精为添加剂，在10kV电压下，

考察缓冲溶液pH值对分离的影响，结果见图4。可见，以甲基化-β-环糊精为添

加剂，当缓冲溶液pH值为2.42时，麻黄碱与伪麻黄碱分离效果最好；以羟丙基

-β-环糊精为添加剂，当缓冲溶液pH值为3.00时，麻黄碱与伪麻黄碱分离效果

最好。随着pH值升高，分离度逐渐下降。原因可能是随着pH值升高，二者逐

渐呈电中性，所使用的添加剂均为中性环糊精，因此2种麻黄碱或二者与环糊精

的包合物迁移速度均与电渗流速度相同，得不到有效分离。在pH7.0以上的条

件下，2种环糊精对麻黄碱和伪麻黄碱的分离度均为0。因此，使用甲基化-β-环

糊精和羟丙基-β-环糊精为添加剂时，最适的pH值条件分别为2.42和3.00。

2.8添加剂浓度对分离的影响

分别以甲基化-β-环糊精和羟丙基-β-环糊精为添加剂，在最适pH值条件下，

运行电压均为10KV，考察添加剂浓度对分离的影响，结果见图5。可见，随着

甲基化-β-环糊精或羟丙基-β-环糊精浓度增加，麻黄碱和伪麻黄碱的分离度逐渐

增加，但增加到一定程度后分离度有缓慢下降趋势。甲基化-β-环糊精浓度在20

mg/mL时出现最佳分离，羟丙基-β-环糊精浓度在50mg/mL时出现最佳分离。原

因可能是随着添加剂浓度加，麻黄碱和伪麻黄碱与添加剂的相互作用增强，因此

分离度增加；而添加剂浓度过高时，由于溶液黏度增加，电渗流减小，分离时间

延长，扩散作用严重，造成分离度下降。

2.9电压对分离的影响

分别以甲基化-β-环糊精和羟丙基-β-环糊精作为添加剂，在优化的pH值条件

下，考察不同电压对分离的影响，结果如图6所示。从图6结果可以看出，随着

分离电压的增大，麻黄碱和伪麻黄碱的分离度逐渐降低，原因可能是随着电压的

增大，电渗流速度加快，样品与手性添加剂的作用时间缩短，因此分离度下降。

在此条件下，当添加剂为甲基化-β-环糊精，运行电压为10kV时，麻黄碱与伪

麻黄碱分离效果最好，分离度达到1.56；当添加剂为羟丙基-β-环糊精，运行电

压为10kV时，麻黄碱与伪麻黄碱分离效果最好，分离度达到2.73。

2.10有机溶剂对分离的影响

有机溶剂一方面可能会和客体竞争环糊精空腔，从而不利于环糊精与客体的

包合；另一方面，还可能参与形成环糊精-客体-溶剂三元包合物，三元包合物一

般比二元包合物更为稳定，因此可以增强环糊精与客体的包合作用。这2种相反

的作用同时存在，其产生的最终效果取决于哪种因素占主导地位。本试验考察了

加入10%甲醇、10%乙腈对分离的影响，结果见图7、图8。结果表明，无论甲

基化-β-环糊精还是羟丙基-β-环糊精作为添加剂，甲醇或者乙腈的加入均降低了

分离效率，且乙腈对分离度的降低作用更显著。故认为有机溶剂的加入对分离产

生了不良影响。3小结

甲基化-β-环糊精和羟丙基-β-环糊精均能使麻黄碱和伪麻黄碱得到有效分

离。使用甲基化-β-环糊精为添加剂的最佳分离条件为：分离电压10kV，25

mmol/LTris-H3PO4缓冲液（pH2.42）含20mg/mL甲基化-β-环糊精，此条件下

麻黄碱和伪麻黄碱的分离度为1.56。使用羟丙基-β-环糊精为添加剂的最佳分离

条件为：分离电压10kV，25mmol/LTris-H3PO4缓冲液（pH3.00）含50mg/mL

羟丙基-β-环糊精，此条件下麻黄碱和伪麻黄碱的分离度为2.73。本研究为麻黄

及麻黄制剂提供了一种简便、快速、低成本的分析方法。

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