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白术的作用和功效

更新时间:2023-02-02 20:36:43 阅读: 评论:0

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2023年2月2日发(作者:退休年龄最新规定2015)

世界科学技术一中医药现代化★技术应用研究

白术挥发油中苍 术酮的稳定性研究六

李玲辉,窦德强

(辽宁中医药大学药学院大连116600)

摘 要:目的:考察不同条件下白术挥发油中苍术酮的稳定性。方法:采用高效液相色谱法测定

挥发油中苍术酮及白术内酯含量,以苍术酮及白术内酯的相对含量作为衡量苍术酮变化的指标。结

果:白术挥发油纯品中的苍术酮在室温日光条件下,第6天分解率达到12%以上,在室温避光条件

下基本不变。挥发油吐温一80溶液在室温避光条件下,苍术酮在第5天的分解率达到30%以上,在冷

冻避光条件下基本不变。挥发油中的苍术酮在人工胃液及人工肠液中均不稳定,其变化符合一级动

力学过程。结论:在不同条件下,白术挥发油中苍术酮的稳定性不同,稀溶液中48小时内比较稳定,

苍术酮较其纯品稳定性好。

关键词:苍术酮 白术挥发油

doi:10.1 1842/wst.2014.01.036

稳定性

中图分类号:R284.2 文献标识码:A

白术为菊科植物白术Atrctctylodes macrocephala

Koidz.的干燥根茎…,其挥发油的含量约为1.0l%~

1.32%t 1,其中苍术酮的含量达到挥发油的6l%『31。

文献报道白术质量受地域影响很大,其中以浙江、

湖南、四川为佳[41,白术挥发油具抗肿瘤、抗肝损

伤及促进胃肠运动作用[5-71,实验结果表明白术挥

发油中苍术酮不稳定,影响其不稳定的主要条件

为光照【8l。挥发油中的苍术酮在空气中会氧化产生

白术内酯I、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、表白术内酯

I和双白术内酯等5种物质[9,1o1。研究表明白术内脂

和苍术酮的药理活性不同…1。目前多采用苍术酮纯

品考查其稳定性【 ,而药理实验一般加辅料吐温一80

的挥发油混合物进行给药。

本实验以苍术酮及白术内酯的相对含量,系统

考查了白术挥发油中苍术酮在不同条件下的稳定

性,同时考查其在人工胃液、人工肠液中的分解反

应动力学,为进一步采用白术挥发油进行药理实验

的样品配制及保存方法以及阐明挥发油中苍术酮

的药理作用奠定基础。

1仪器与试剂

Agilent 1260高效液相色谱系统,配有DAD检

测器,在线脱气机,自动进样器;SHZ一82恒温振荡

器(常州国华电器有限公司);Delta320梅特勒精

密酸度计(大连托利电子衡器有限公司);PCJ一10

超纯水机(成都品成科技有限公司)。

白术采自浙江于潜,经辽宁中医药大学药用植物

教研室王冰教授鉴定为正品。白术内酯I对照品

购自南京泽朗医药科技有限公司;苍术酮、白术内

酯Ⅱ及白术内酯Ⅲ均自制,经 HNMR和 CNMR

鉴定其结构,HPLC归一化法测定其纯度大于

95%;乙腈为色谱纯,水为超纯水,其余试剂均为

分析纯。

收稿日期:2013—04—17

修回日期:2013—05—09

★ 科学技术部国家重点基础研究计划(“973计划”)项目(2012CB107333):基于中药性(气)味科学内涵假说的利水功效中药的药性理论研究,负责

人:匡海学。

★★ 通讯作者:窦德强,教授,博士生导师,主要研究方向:天然药物化学及中药新药研制与开发。

[World Science and Technology ̄Modernization ofTraditional Chinese Medicine and Materia Medica]193

2014第十六卷第一期*Vo1.16 No.1

2方法与结果

2.1 HPLC法测定挥发油中苍术酮和白术内酯

2.1.1挥发油提取

将白术粉碎后,过20目筛,用挥发油提取器按

常规水蒸气蒸馏法提取挥发油,放冷后直接分离

油水得挥发油,其为淡黄色透明油状液体。放置冰

箱一20℃保存,备用。

2.1.2供试样品制备

取一20 ̄C保存的挥发油0.05 g,精密稳定,用适

量正己烷一乙酸乙酯(10:1)溶解,定容于25 mL容

量瓶中,制成浓度为2 mg・mL 的挥发油溶液。

2.1.3 色谱条件

Kromasil CI8(250 mm x4.6 mm,5 lxm)色谱柱;

以乙腈(A)一水(B)为流动相进行梯度洗脱,0 5

min,3%A;5~10 min,3%~1O%A;10-25 min,10%~

40%A;25-40 min,40%-60%A;40-50 min,60%~

100%A;50-60 min,100%A;60-70 min,100%~3%

A;柱温25℃;流速1.0 mL・min ;DAD检测器;检

测波长242 nm;进样量20 L。

2.1.4检测波长的确定

取一20 ̄C保存的白术挥发油用正己烷一乙酸乙

酯(10:1)定容,进行全波长扫描(200~400 nm),苍

术酮及白术内酯I、Ⅲ的最大吸收波长为220 nm,

白术内酯Ⅱ的最大吸收波长为280 nm,检测波长为

242 llm时各成分峰面积适中。最终确定检测波长为

242 nm。

2.1.5稳定性试验

取同一批样品有机溶液及吐温一8O溶液,分别

于0、2、4、8、12 h避光测定,RSD分别为1.70%、

1.98%,结果表明挥发油样品有机溶液及吐温一80

溶液在12 h内稳定。

2.2 苍术酮室温放置稳定性试验

取一20℃保存的白术挥发油,分别在25 cI=避光

和不避光条件下放置,于0、1、2、3.5、4.5、5、6天

取样品。平行测定3批样品,按“2.1.3”项条件测定

测定挥发油中苍术酮与白术内酯I、Ⅱ、Ⅲ的峰面

积,以苍术酮的相对含量A苍术酮及白术内酯的

相对含量A内酯作为衡量指标。试验结果见表1,

图2、3。

苍术酮和白术内酯相对含量的计算公式:A苍术酮=

S 苍术酮/ 苍术酮×100%,A内酯=S 内酯/s0苍术酮x100%,式

中s 苍术酮为第n天苍术酮的峰面积,so苍术酮为第0

天苍术酮的峰面积,s 内酯为第n天白术内酯(I、

Ⅱ、Ⅲ)的峰面积。

2.3 苍术酮在0.5%吐温一80溶液中稳定性试验

精密称取一20℃保存的白术挥发油0.012 9 g,

置25 mL容量瓶中,加0.5%吐温一80溶液适量,超

声使其分散均匀成乳浊液,定容至刻度。将配好的

挥发油溶液分成2份,分别在室温避光、一20℃冷冻

避光条件下保存。于0、1、2、3、4、5天吸取一定量的

挥发油溶液,经0.45 Ixm微孔滤膜滤过。平行测定3

批样品,按“2.1”项测定挥发油中苍术酮与白术内

酯I、Ⅱ、Ⅲ的峰面积,以苍术酮的相对含量A苍术酮

及白术内酯的相对含量A内酯作为衡量指标。数据结

果见表2,图4、5。

2.4 苍术酮在人工胃液和人工肠液中的分解变化

动力学试验

2.4.1 人工胃液和人工肠液配制

按2010年版《中国药典》(二部)【l2】‘‘附录XC溶

出度测定法附录”,取1 mol・L 稀盐酸溶液16.4

mL,加水稀释成l 000 mL,制得人工胃液。

按2010年版《中国药典》(二部)【 l‘‘附录XVD

缓冲液”,取0.2 mol・L 磷酸二氢钾溶液250 mL,

加0.2 mol・L 氢氧化钠溶液118 mL,用水稀释至

1 000 mL,摇匀,制得人工肠液。

2.4.2试验过程及结果

称取一20 ̄C保存的白术挥发油1 g,精密称定,

分别加到20 mL人工胃液(pH 1.36)和20 mL人工

肠液(pH 6.8)中,超声分散后,立即置于37℃恒温

振荡器中,于0、0.5、1、1.5、2、3、4、5、6 h精密吸取

2 mL,分别加6 mL正己烷一乙酸乙酯(10:1)萃取3

次,定容至25 mL容量瓶中,平行测定3批样品,按

“2.1”项测定测定挥发油中苍术酮与白术内酯I、

Ⅱ、Ⅲ的峰面积,以苍术酮的相对含量A苍术酮及白

术内酯的相对含量A内酯作为衡量指标。结果显示在

人工胃液和肠液中6 h时苍术酮的相对含量仍在

70%以上。数据结果见表3,图6、7。

假定白术挥发油中苍术酮的分解遵循一级反

应进行,即X=Xg ,取对数得lgX=一Kt+lgX。,即lga

苍术酮=一Kt+lgAo苍术酮。以lgA苍术酮对t作图,进行线性

回归处理,所得直线斜率即为挥发油中苍术酮分解

反应的速率常数K,由K值求得反应半衰期,tl/2=

0.693/K。数据处理结果见表4。

194[World Science and Technology/Tfodernization of Traditwnd Chinese Medicine and Materia Medica]

世界科学技术—中医药现代化★技术应用研究

mAU

400

350

30o

250

20o

l50

l00

50

I A

35 40 45 50 55 60

mAU

600

500

400

300

200

1o0

1ilAU

600

500

400

300

200

1O0

mAU

600

500

400

300

200

1O0

35 40 45 5O 55 6O

35 40 45 50 55 60

…一~ 焱 — 』l L. 』

35 40 45 50 55 60

图1 对照品及样品色谱图

注:1.白术内酯Ⅲ,2.白术内酯I,3.白术内酯II,4.苍术酮;A.白术内酯Ⅲ对照品HPLC图,B.白术内酯I对照品HPLC图,C.白术内

酯Ⅱ对照品HPLC图,D.苍术酮对照品HPLC图,E.白术挥发油HPLC图。

[World& e e and Technology ̄Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica]195

2014第十六卷第一期★Vo1.16 No.1

表1 室温条件下苍术酮相对含量的变化(x+s,n=3)

25

20

15

10

0 1 2 3 4 5 6 7

放置时间/天

图2 日光下挥发油中白术内酯相对量图

放置时间/天

图3避光下挥发油中白术内酯相对量图

表2苍术酮相对含量的变化(X+S,n=3)

2.5

2.0

1.5

1.0

0.5

0.0

0 1 2 3 4 5 6

放置时间/天

图4室温条件下白术内酯的相对量图

放置时间/天

图5冷冻条件下白术内酯的相对量图

196[World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica]

世界科学技术一中医药现代化★技术应用研究

表3人工胃液及人工肠液中苍术酮相对含量的变化( 蜘,n=3)

放置时间m

图6 人工胃液中白术内酯的相对含量图

3讨论

本实验中挥发油测定方法稳定,保证样品在

避光条件下测定。纯品苍术酮极不稳定,因此本

实验未采用外标一点法测定苍术酮的含量,而是

以苍术酮在0 h含量为100%计算,并根据文献报

道以A内酯作为衡量苍术酮转化为内酯量的指标,

比较放置一定时间 内酯的变化。采用两个指标在

一定程度上能准确反映白术挥发油中苍术酮的降

低量。试验中以挥发油纯品为对象,结果显示避

光条件下挥发油纯品中的苍术酮相对含量未降

低,对应的白术内酯相对含量亦未增加;日光条

件下苍术酮相对含量降低,白术内酯I、Ⅲ的相对

含量明显增加。因此,纯品挥发油在日光条件下

不稳定,在室温避光条件下短期内不会分解,影

响苍术酮分解的因素有光照。文献报道纯品苍术

酮的甲醇溶液在日光6 h的分解率达到92.48%。

本实验结果表明苍术酮在挥发油中稳定性较其纯

品好。

吐温一8O常作为中药注射剂增溶剂,常用量为

0.5~1%l13】,作为乳化剂的浓度为0.2~0.5%f14】,本实

验采用0.5%的吐温一80作为挥发油的溶媒。试验研

究了挥发油在0.5%吐温一80中避光放置的稳定性,

挥发油在0.5%吐温一80溶液中形成乳浊液,放置不

分层,为均一溶液。实验结果显示苍术酮在室温避

光条件下放置第5天的分解率达30%以上,白术内

酯I、Ⅲ相对含量也增加;苍术酮在一20℃避光条件

下两个指标变化不明显。实验结果表明挥发油中苍

术酮在溶液中避光条件下也会分解,在一20 o(=冷冻

避光条件下稳定,因此冷冻条件可以选为白术挥发

油药理实验的贮存方法,说明影响苍术酮分解的因

素包含温度。但一般在2天之内分解较少,可按照2

天的给药量配制溶液。

白术挥发油不稳定,研究药代动力学较困难,

表4试验数据处理结果

数据来源 线性方程

人工胃液l昏4苍术酮=一0.0212t+1.9983 0.999 1 0.048 8 14.20

放置时间m

图7 人工肠液中自术内酯的相对含量图 人工肠液lg4 =一0・0242 1・9970 0・996 9 0・055 7 12・4J4

[World Science and Technology, ̄odemization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica] 197

2014第十六卷第一期 ̄rVo1.16 No.1

本实验对挥发油在人工胃液和人工肠液中的稳定

性进行研究,以考查苍术酮是否以原型或内脂的形

式吸收人血。挥发油中苍术酮在人工胃液和人工肠

液中的分解变化动力学试验结果表明苍术酮在人

工胃液和人工肠液中不稳定,苍术酮的相对含量均

降低,白术内酯I、Ⅱ、Ⅲ的相对含量均增加。苍术

酮分解反应用动力学方程模拟发现,其在人工胃

液、人工肠液中分解反应均属于一级反应动力学,

按照方程计算其在人工胃液中的半衰期为14.2 h,

在人工肠液中为12.4 h,后者反应速率较快。表明

影响苍术酮分解的因素为pH。白术挥发油中的苍

术酮在人工胃液及人工肠液中6 h时相对含量仍

保持在70%以上,而胃排空一般为2 h,包括小肠消

化吸收,总时间大约为6~8 h。脂溶性物质在胃和小

肠吸收快,挥发油脂溶性良好,因此苍术酮大部分

以将以原型吸收入血。

综上所述,苍术酮在白术挥发油中不稳定,会

转化成白术内酯。影响苍术酮分解速率的因素有光

照、温度及pH。挥发油中苍术酮在日光条件下分解

更快,药理实验中挥发油溶液应冷冻避光保存。本

实验中所采用的白术药材非同一批,而白术药材在

放置过程中苍术酮含量会发生改变,因此白术药材

中自术内酯的相对含量有一定差别。

参考文献

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10李伟,文红梅,崔小兵,等.白术的炮制机理及其倍半萜成分转化

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Study on Stability of Atractyion in Volatile Oil of Atractylodes Macrocephala Koidz.

Li Linghui,Dou Deqiang

(School of Pharmacy,Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Dalian 116600,China)

Abstract:This study was aimed to explore the stability of atractylon in volatile oil of A tractylodes macrocephala

Koidz.under various conditions.High performance liquid chromatography(HPLC)method was used to determine the

atractylon content and atractylenolide content of volatile oils.And the relative percentages of atractylone and a—

tractylenolide were selected as indexes to measure the change of atractylon.The results showed that the atractylon in

atractylodes volatile oil was unstable with the rate of atractylon decomposition up to 1 2%in natural conditions on the

6 day.The condition was almost not changed at room temperature and avoiding light.Atractylodes volatile oil in

tween一80 solution was unstable with the rate of atractylon decomposition up to 30%at room temperature and avoiding

light on the 5 day.The condition was almost not changed in the freezing temperature and avoiding light.The atracty—

lon in volatile oil in artificial gastric iuice and artificial intestinal iuiee were unstable,which were in conformity with the

first order kinetics.It was concluded that the stability of atractylon of volatile oil was different.The atracty|on of volatile

oil was relatively stable in dilute solution within 48 hours.The atractylon in volatile oil was stable than its pure solution.

Keywords:Atractylon,Atractylodes macrocephala Koidz.,volatile oil,stability

(责任编辑:叶丽萍张志华,责任译审:王晶)

198[World Science and Technology ̄Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica]

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