伯碳

Ｗｏｒｌｄ Ｎｏｔｅｓ ｏｎ Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２０１ １，Ｖｏ１．３２，Ｎｏ．１

肺炎克雷伯碳青霉烯酶的研究进展

郝家砚 一，

（１安徽医科大学第一附属医院榆验科， 合肥

徐元宏 ，

２３００２２；２安徽省立儿童医院检验科，合肥２３００５１）

摘要： 肺炎克雷伯碳青霉烯酶型Ｄ内酰胺酶（ＫＰＣ）是近年来发现的肠杆菌科细菌对碳青霉烯酶抗生素耐药的主要机

制，可水解除头霉素以外的所有Ｂ一内酰胺类抗生素。然而由于实验室检测ＫＰＣ的及时性与准确性仍不能达到临床要求，这必

将给一．线的抗感染治疗和管理院内感染带来困难， 此，临床医师和实验室更应该重视，相互加强联系与沟通。

关键词：肺炎克雷伯： 碳青霉烯酶； 榆测

中图分类号：Ｒ３７８．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１—８７５１（２０１ １）０１—０００６．０４

Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ Ｃａｒｂａｐｅｎｅｍａｓｅ ｉｎ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ

Ｈａｏ Ｊｉａ—ｙａｎ ｒ．Ｘｕ Ｙｕａｎ—ｈｏｎｇ

（１ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＣｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，ｔｈｅ ＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＡｎｈｕｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｅｆｅｉ ２３００２２；

２ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ａｎｈｕｉ Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ Ｃｈｉｌｄｒｅｎ’Ｓ Ｈｏｓｐｉｔａ１．Ｈｅｆｅｉ ２３００５ １）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＫＩｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ｃａｒｂａｐｅｎｅｍａｓｅ．．ｔｙｐｅ １３．．１ａｃｔａｍａｓｅ ｉｓ ｔｈｅ ｍａｉｎ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ

ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ ｃａｒｂａｐｅｎｅｍａｓｅｓ，ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｄｉｓｃｏｖｅｒｅｄ ｉｎ ｒｅｃｅｎｔ ｙｅａｒｓ．Ｉｔ ｃａｎ ｈｙｄｒｏｌｙｚｅｓ ａｌ１ ｐ—ｌａｃｔａｍ

ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ｅｘｃｅｐｔ ｅｅｐｈａｍｙｃｉｎ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｄｕｅ ｔｏ ｔｈｅ ｔｉｍｅｌｉｎｅｓｓ ｏｆ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｔｅｓｔｉｎｇ ａｎｄ ｔｈｅ ａｃｃｕｒａｃｙ ｏｆ ｔｈｅ ＫＰＣ ｃａｎ

ｎｏｔ ｍｅｅｔ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ．ｗｈｉｃｈ ｗｉｌｌ ｇｉｖｅ ｆｉｒｓｔ—ｌｉｎｅ ａｎｔｉ—ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｎｄ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ｎｏｓｏｃｏｍｉａｌ

ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｄｉ佑ｃｕｌｔ．ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ．ｃｌｉｎｉｃｉａｎｓ ａｎｄ ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ ｓｈｏｕｌｄ ａｔｔａｃｈ ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ ｔｏ ｅａｃｈ ｏｔｈｅｒ ｔｏ ｓ￣ｅｎｇｔｈｅｎ ｃｏｎｔａｃｔ

ａｎｄ ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ； ｃａｒｂａｐｅｎｅｍａｓｅ：ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ

自亚胺培南、美罗培南、厄他培南等碳青霉烯

类抗菌药物广泛投放于临床治疗以来，对其多重耐

药的肠杆菌已逐渐产生，其中肺炎克雷伯碳青霉烯

酶型Ｂ一内酰胺酶（ＫＰＣ）的出现、迅速扩散及其

引起的多起暴发感染，提示临床的抗感染治疗与实

验室诊断所面临的巨大困难。本文根据ＫＰＣ酶的分

类、生化特性及检测方法等问题综述如下。

１ ＫＰＣ的分类

ＫＰＣ酶是一种由质粒介导的丝氨酸ｐ一内酰胺

酶，属于Ｂｕｓｈ分组的２ｅ类，Ａｍｂｌｅｒ分类的Ａ类，能

够水解除头霉素以外的几乎所有的１３一内酰胺类抗生

素，克拉维酸和三唑巴坦可轻度抑制其水解作用，

但对ＥＤＴＡ不敏感【１＿。

１．１ ＫＰＣ．１

ＫＰＣ一１最早报道于２００１年的美国北卡罗来纳州，

该菌株由１９９６年临床分离后保存，除被克拉维酸抑

制外，几乎对其它所有的Ｂ．内酰胺类药物都呈现耐

药，亚胺培南和美罗培南的最低抑菌浓度（ＭＩＣ）

均为１６ｐｇ／ｍＬ。该菌株等电聚焦电泳后分别显示了

ＳＨＶ－２９（ＰＩ ７．２１、ＴＥＭ．１（ＰＩ ５．４）￣ｔｌＫＰＣ．１（ＰＩ ６．７）３种

ｐ．内酰胺酶。ＫＰＣ一１基因由大约５０ｋｂ的非结合性质

粒携带。氨基酸序列分析表明，ＫＰＣ．１与来源于黏质

收稿日期：２０１０－１１－１６

作者简介：郝家砚，女，检验师，在职研究生，研究方向：临床微生物检验与耐药机制研究。

，通讯作者：徐元宏，男，教授，研究生导师，研究方向：临床微生物榆验与耐药机制研究。

国外医药抗生素分册２０１１年１月第３２卷第１期

沙雷菌Ｓ６的可水解碳青霉烯的Ｂ．内酰胺酶Ｓｍｅ一１，

同源性为４５％，提示可能与Ａ类碳青霉烯酶有不同

起源。该菌株的外膜蛋白仅检测￣ｌＪＯｍｐｋ３６，其中

Ｏｍｐｋ３５￣ＨＯｍｐｋ３７的表达降低【２Ｊ。Ｙｉｇｉｔ等提示该菌株

对碳青霉烯的耐药主要是ＫＰＣ一１产生所致。

１．２ ＫＰＣ一２

２００３年ＫＰＣ．２被发现于马里兰巴尔的摩的肺炎

克雷伯菌［，］，之后又从肠炎沙门菌古巴血清型【４ｌ和产

酸克雷伯菌ｌ ５】中分离出来。２００６年又报道了产ＫＰＣ一２

的铜绿假单胞菌和费劳地柠檬酸杆菌，这是ＫＰＣ出

现在肠杆菌科以外的首次报道［６】。ＫＰＣ一２是由８６３个

核苷酸编码的１ ５７个氨基酸残基的肽链，与ＫＰＣ一１比

较，ＫＰＣ．２存在Ｓｅｒｌ７４Ｇｌｙ的突变，能引起碳青霉烯

类耐药。外膜蛋白检测￣０Ｏｍｐｋ３５、Ｏｍｐｋ３６。Ｙｉｇｉｔ

等在重新测序后发表更正，由于ＫＰＣ一１测序错误造

成误差，两者实质为同一种酶。然而之后的研究发

现，ＫＰＣ．１与ＫＰＣ一２仍有不同，可能是由于相同的转

移片段插入到了不同的质粒中而引起的。ＫＰＣ．２编码

基因通常位于质粒或整合子等可转移基因元件上，

即携带ＫＰＣ一２的质粒可水平传播给其它细菌。该质

粒与沙门菌中的质粒有９８％的同源性，成为ＫＰＣ在

肠杆菌中结合并传播的重要条件。国外已有实验成

功的将ＫＰＣ一２基因接合到易感菌株上，接合子对亚

胺培南的ＭＩＣ显著增加，但并未达到耐药水平。在

考虑到可能有其它耐药机制并存的情况下，ＫＰＣ酶

仍不失为其耐药的主要原因［７】。此外，ＫＰＣ一２酶对亚

胺培南和美罗培南表达敏感或中介。若菌株中发现

ＫＰＣ酶，同时其超广谱Ｂ一内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）也是

阳性，检测该类菌株ＫＰＣ．２酶可能会有一定困难。

１．３ ＫＰＣ．３

ＫＰＣ．３发现于２０００—２００１年纽约ＴＩＳＣＨ医院发

生的肺炎克雷伯菌暴发感染。ＫＰＣ．３由７５ｋｂ的质粒

编码，可传播给其它菌株，该质粒也同时携带氨

基糖苷类耐药基因。与ＫＰＣ一１相比有Ｓｅｒ１ ７４Ｇｌｕ和

Ｈｉｓ２７２ｆｙｒ ２个碱基的改变。外膜蛋白检测到０ｍｐｋ３６

而缺失Ｏｍｐｋ３５，考虑胞壁通透性的降低可能也是对

碳青霉烯类耐药的因素之一。酶动力学研究显示，

ＫＰＣ．３能有效水解亚胺培南和美罗培南，对头孢他啶

的活性几乎是ＫＰＣ．１￣ＨＫＰＣ．２的３０倍，提示氨基酸的

替换可能导致了其功能改变［８ｊ。

２ ＫＰｃ的分布特点

ＫＰＣ酶尽管最初被发现于肺炎克雷伯菌，但现

已在肠杆菌科中的其它菌种中都有报道，如大肠埃

希菌、阴沟肠杆菌、产酸克雷伯菌、肠炎沙门菌、

黏质沙雷菌、奇异变形菌、费劳地枸橼酸杆菌，以

及铜绿假单胞菌、恶臭假单胞菌等。根据目前资

料，ＫＰＣ一２的发生率最高，其次是ＫＰＣ．３。仅几年

的时间，ＫＰＣ酶己由最初的美国东海岸，迅速在美

国其它地区蔓延，之后在全球开始出现，包括以色

列、哥伦比亚、英国、法国、阿根廷和中国。然

而在医院检测出ＫＰＣ基因时，仅有少数患者表示曾

有ＫＰＣ流行区域的旅游史，或存在家庭成员之间的

相互传播，大部分患者并未有相关行为，由此推测

ＫＰＣ基因的出现是碳青霉烯类抗菌药物广泛应用引

起的耐药基因突变，或者存在院内感染的可能。

我国第一株产ＫＰＣ一２菌株发现于浙江大学附属第

一医院，２００４年分离获得『９】，该分离菌的ｂ／ａ 。 ，基因

位于一个约６０ｂｐ的质粒，其基因环境与美国和哥伦

比亚分离菌部分不同；同时浙江大学附属第二医院

报道了２００６年分离的三株产ｋｐｃ一２的黏质沙雷菌，均

对亚胺培南耐药［Ｉｏ１，随后该医院所报道的产ＫＰＣ菌

株均为产ＫＰＣ一２Ｕ１ １２１。

以上事实表明，ＫＰＣ编码基因可通过质粒在不

同菌种甚至不同菌属间进行传播，并可通过国际旅

游、商贸往来、家族交叉感染、医院感染等方式造

成不同地区和国家的蔓延或者暴发。

３ ＫＰＣ的检测

自发现ＫＰＣ以来，临床实验室对其检测一直困

难重重，一是产ＫＰＣ酶菌株对碳青霉烯酶的灵敏度

是否能达到完全耐药的水平；二是ＥＳＢＬｓ菌株对ＫＰＣ

酶检测的感染；三是产ＫＰＣ酶菌株接种效应的存在

显著影响亚胺培南的ＭＩＣ。如何准确检测ＫＰＣ，特别

是体外试验中对亚胺培南仍保持敏感的菌株，对有

效治疗临床感染、控制其传播有至关重要的作用。

３．１ ＫＰＣ的表型检测

目前用于表性检测的方法有ＭＩＣ检测、自动检

测、抑制剂的微生物学实验和扩散试验等。国内已

有研究证实纸片扩散法和琼脂稀释法对产ＫＰＣ酶菌

株的检出率要明显高于仪器法［１ ３］，国外也有文献称

自动化药敏检测系统不能有效检测出产ＫＰＣ酶菌株

对碳青霉烯类药物的耐药性［１４１。纸片扩散法仍为临

床微生物实验室筛查产ＫＰＣ酶细菌的常用方法。

３．１．１底物的选择

ｂｌａ…基因通过某种机制在不同类型的质粒间传

Ｗｏｒｌｄ Ｎｏｔｅｓ ｏｎ Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２０ ｌｌ，Ｖｏ１．３２，Ｎｏ．１

播，该类质粒大多同时编码６ 基因，有的甚至

编码更多的基因，有的不能结合。携带ｂｌａ 基因

的质粒再通过水平传播使其它菌种或菌株获得耐药

性，但一般的药敏试验难以检洲到ＫＰＣ．２。国内外

研究均证明，产ＫＰＣ酶的细菌对亚胺培南仪表现为

中介或敏感性的降低，并存在接种效应，从而造成

ＫＰＣ酶的漏诊或误诊【＂］。

在检ＮＫｒ＇Ｃ酶介导的耐药性时，』叵他培南比单独

的美罗培南，亚胺培南敏感性更强。作为检测ＫＰＣ基

因的最佳底物，厄他培南已被列入常规药敏试验。对

具有ＥＳＢＬｓ／ＡｍｐＣ酶样表型的肠杆菌科细菌，呵采用

纸片法或Ｅ．ｔｅｓｔ法进行厄他培南的测定。对第三代头

孢菌素耐药者，或厄他培南的ＭＩＣ为２ｇｇ／ｍＬ以及关

罗培南、亚胺培南的ＭＩＣ为２～４ ｇ／ｍＬ，应视为有产

ＫＰＣ或产其它碳青霉烯酶的叮能。

３．１．２改￣Ｈｏｄｇｅ试验

改￣Ｈｏｄｇｅ试验常用来证实是否产ＫＰＣ，其灵敏

度和特异度均为１００％『ｌ６］。将大肠埃希菌ＡＴＣＣ２５９２２

涂布至ＭＨ平板上（０．５麦氏浊度的１：１０稀释），从平板

中央向边缘划待测菌，待平板置于室温１５ｍｉｎ后将亚

胺培南或美罗培南纸片贴到平板中央，３５。Ｃ孵育过

夜，观察大肠埃希菌在待测菌周围的生长情况，若

出现苜蓿叶状抑菌环为碳青霉烯酶阳性。值得注意

的是，采用改Ｌ￣Ｈｏｄｇｅ试验做ＫＰＣ酶检测时大约２５％

的ＥＳＢＬｓ￣ＡｍｐＣ酶菌株会产生假＿５日性，而当ＫＰＣ酶

低水平表达时又会产生假阴性。可采用在厄他培南

纸片上加入３ｍｇ硼酸和１ｍｇ苯唑西林的方法来消除这

些影响。然而加入硼酸对于ＫＰＣ．２型酶具有抑制作

用，可导致改￣Ｈｏｄｇｅ试验由阳转阴。

３．２纸片增效试验

２００８年，Ｔｓａｋｒｉｓ等 ］以硼酸为抑制剂、碳青霉

烯类和头孢吡肟为水解底物，利用纸片增效试验的

原理，建立了检测ＫＰＣ的硼酸纸片法（ＢＡＤＴ）。用

标准扩散法将待测菌接种到ＭＨ 板上，将含与不含

４００ｐｇ硼酸的不同Ｂ一内酰胺类药物（亚胺培南、美

罗培南、厄他培南、头孢吡肟、头孢西丁、头孢噻

肟、头孢他啶）纸片置于平板上，３７℃培养过夜，

比较含与不含硼酸的纸片周围抑菌环的直径。当含

硼酸药敏纸片比单纯药敏纸片的抑菌环直径大于或

等于５ｒａｍ时，即可判定ＢＡＤＴ试验阳性，提示待测菌

产生ＫＰＣ。该法不仅可以区别质粒介导的ＡｍｐＣ酶，

还可以与厄他培南不敏感联合，使得产ＫＰＣ酶菌株

与产其它 ．内酰胺酶的菌株区别开来ｌＪ８】。

３－３分子生物学检测

实时ＰＣＲ检测ｂｌａ 基因是最快速准确的方

法，由Ｈｉｎｄｉｙｅｈ等…］应用ＴａｑＭａｎ技术，从患者

原始标本（肛门／直肠拭子）直接提取ＤＮＡ，将

ｂｌａ 。基因的检测时间由２４ｈ缩短为４ｈ。ｂｌａ 基

因经荧光定量探针扩增后产生一个３９９ｂｐ的扩增

产物，可被ＢｓｔＮ Ｉ和Ｒｓａ Ｉ消化，用以检测核苷

酸的多态性。ＫＰＣ共同的引物为：ＫＰＣ正义链，

５’．ＡＴＧＴＣＡＣＴＧＴＡＴＣＧＣＣＧＴＣＴ一３’：反义链，５’．

ＴＴＴＴｃＡＧＡＧＣＣＴＴＡＣＴＧＣＣＣ．３’。反应条件为

９４℃３ｍｉｎ：９４℃ｌｍｉｎ、５２℃１ｍｉｎ、７２℃ｒａｉｎ，３０个循

环；７２℃延伸１０ｒａｉｎ。扩增片段长度为８８０ｂｐ。由于

核酸序列的多态性，经限制性核酸内切酶消化后，

ＫＰＣ一２产生３５９、４０ｂｐ的扩增片段，ＫＰＣ一３产生２９５、

６４、４０ｂｐ的扩增片段，而ＫＰＣ．１不被ＢｓｔＮ Ｉ和Ｒｓａ

Ｉ消化。

有资料表明，以常规菌种鉴定方法（生化鉴

定）鉴定菌株时，有可能导致菌株鉴定错误，推荐

选择分析ｇｙｒＡ基因序列对菌株进行分子鉴定，尽可

能避免菌株鉴定结果误差，提高研究结果的准确

性。常规或实时ＰＣＲ技术可应用与临床标本或菌落

的检测，并可协助查找病原菌的传染源及其传播途

径，但却无法检测细菌大量的耐药基因和碳青霉烯

类耐药的其它机制。另外，由于尚无美国食品药品

监督管理局批准的ＰＣＲ诊断试剂，ＰＣＲ技术的临床应

用还很有限。在ＫＰＣ产生菌暴发流行时可考虑应用

菌落杂交法进行大规模的碳青霉烯酶分离株的高效

筛选［１９】。

４小结

导致肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素耐

药或敏感性下降的原因有菌株产碳青霉烯酶（如

ＫＰＣ．２）、ＩＭＰ型金属ｐ一内酰胺酶（如ＩＭＰ一１和

ＩＭＰ一８型酶）、产 ．内酰胺酶（如高产质粒介导的

ＡｍｐＣ酶合并膜孔蛋白缺失）等，但以产ＫＰＣ型碳青

霉烯酶为主。住院时间过长、入住ＩＣＵ侵入性器械植

入体内、应用免疫抑制剂和多种抗生素联合使用等

原因均会大大提高ＫＰＣ产生菌感染的发生。此外，

患者往往均使用过Ｊ３．内酰胺类和氟喹诺酮类药物，

再加上微生物学检测往往落后于临床，ＫＰＣ产生菌

隐藏在患者体内不能被及时检出，这些综合原因使

实验室诊断和临床用药带来重重困难。对于确认是

国外医药抗生素分册２０１１年１月第３２卷第１期 ．９．

产碳青霉烯酶的菌株，临床微生物实验室可以按照

实际检测结果报告临床具体的抑菌圈直径或ＭＩＣ值；

或修改结果、报告耐药或中介，不能报告敏感。合

理有效使用抗生素，及时指导临床调整用药，实验

室定期检测细菌的耐药趋势，严格执行院感监控，

提高医护人员的院感意识，注意手卫生和病室通

风，才能阻断或延缓ＫＰＣ产生菌的院内蔓延。

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ｍｅｄｉｃａｔｅｄ，ｃａｒｂａｐｅｎｅｍ—ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｎｇ ｂｅｔａｌａｃｔａｍａｓｅ，ＫＰＣ一２，

ｉｎ Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｉａｅ ｉｓｏｌａｔｅｓ［Ｊ］．Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ

Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，２００３，５１（３）：７１１

【１ ６］Ａｎｄｅｒｓｏｎ ＫＦ，Ｌｏｎｓｗａｙ ＤＲ，Ｒａｓｈｅｅｄ ＪＫ，ｅｔ ａ１．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ

ｏｆ ｍｅｔｈｏｄｓ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ｔｈｅ Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ

ｃａｒｂａｐｅｎｅｍａｓｅ ｉｎ Ｅｎｔｅｒ０ｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ［Ｊ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，

２００７，４５（８）：２７２３

［１ ７］Ｔｓａｋｒｉｓ Ａ，Ｋｒｉｓｔｏ Ｉ，Ｐｏｕｌｏｕ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｆｉｒｓｔ ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ ｏｆ ＫＰＣ一

２－ｐｏｓｓｅｓｓｉｎｇ Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ｉｎ ａ Ｇｒｅｅｋ ｈｏｓｐｉｔａｌ

ａｎｄ ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｂｏｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ ｄｉｓｃ

ｔｅｓｔｓ［Ｊ］．Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，２００８．６２（６）：

１２５７

［１８］Ｄｏｉ Ｙ，Ｐｏｔｏｓｋｉ ＢＡ，Ａｄａｍｓ—Ｈａｄｕｃｈ ＪＭ，ｅｔ ａ１．Ｓｉｍｐｌｅ

ｄｉｓｋｂａｓｅｄ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ

ｃａｒｂａｐｅｎｅｍａｓｅ—ｔｙｐｅ —ｌａｃｔａｍａｓｅ ｂｙ ｕｓｅ ｏｆ ａ ｂｏｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ

ｃｏｍｐｏｕｎｄ［Ｊ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｍｉｅｒｏｂｉｏｌ，２００８，４６（１ ２）：４０８３

［１９］陈从新，吴蘩，汤一苇．碳青霉烯酶和肺炎克雷伯杆菌碳

青霉烯酶：当前水平［Ｊ］＿传染病信息，２０１０，２３（１）：４３