第40卷第3期
2013年9月
茶叶通讯
TEA COMMUNICATION
Vo1.40.No.3
September,2013
酒石酸亚铁法和福林酚法
测定茶多酚的差异原因研究
钟兴刚 ,2刘淑娟,,2 郑红发 黄怀生,赵熙 粟本文’周浩’
(1湖南省农业科学院茶叶研究所・长沙・410125;2湖南省茶叶检测中心・长沙・410125)
摘要:本文通过大量的实验数据比较、查阅相关文献,发现茶多酚新老国标检测方法GB/T8313—2002茶叶和GB/T8313—2008,
即酒石酸亚铁法和福林酚法两者结果相差30%左右,并对差异原因进行研究。
关键词:茶多酚;检测方法;分析研究
The Reason of Variance of Tea Polyphenois Content Determined by Ferrous
Tartrate Method and Folin Phenol Method
ZHONG Xing—gang ,LIU Shu-juan ,ZHENG Hong-fa‘,HUANG Huai—sheng ,ZHAO Xi ,SU Ben-wen ,
ZHOU Hao
(J Tea Research Institute ofHunan Academy ofAgricultural Sciences,Changsh ̄410125;
2 Hunan Tea Test Center,Changsha,410125)
Abstract:Through the comparison of big number of testing data and consulting documents,around 30%variance in testing results was
found between GB/T8313—2002,Ferrous Tartrate Method and GB/T8313—2008,Folin Phenol Method.The reason ofvariance was studied.
Key wor ̄:Tea Polyphenols,Testing Me ̄od,Analysis study
茶多酚是茶叶中的主要品质成分,因其独特的
分子结构、很强的氧化性及螯合性,能很好的清除
人体内的自由基,起到抗氧化、抗衰老的效果;也因
其分子结构中的酚羟基有很好的螯合性能,能够与
蛋白质、金属离子相结合,茶多酚能与20多种离子
产生络合,其中10多种产生沉淀,络合产物很多会
产生明显的色泽变化,所以茶叶中茶多酚含量的测
定越来越受到人们的重视。
茶多酚的检测方法主要有以下几种:蛋白质沉
淀法:原理是利用茶多酚与蛋白质的络合沉淀特征
来检测茶多酚的含量。金属离子螯合法:GB/T8313—
2002对茶叶以及GB/T21733—2008对茶饮料中茶多
酚的检测,原理都是利用多酚羟基与铁离子的螯合
变成蓝紫色的特性,在540nm处进行检测。氧化法:
有两种方法,一是利用高锰酸钾与茶多酚的氧化,
进行颜色滴定,但是这种方法误差较大,所以目前
用的很少;二是GB/T8313—2008标准中的福林酚
法,利用福林酚能将茶多酚氧化然后自己被还原呈
蓝色的特征,进行测定。
茶叶茶多酚测定,使用方法较多的是GB/
T8313—2002与GB/T8313—2008,也就是酒石酸亚铁
法和福林酚法。
笔者在测定茶多酚时,发现GB/T8313—2008(福
林酚法)与老方法GB/T8313—2002(酒石酸亚铁法)
测定结果比较存在较大差异,特此对两种检测方法
进行实验比较,并进行分析讨论,为检测茶多酚同仁
提供参考。
1材料与方法
1.1 实验材料
供试茶样为湖南省茶叶检测中心检测样,随机
抽取30个。
1.2 测定方法
分别按照GB/T83 13—2002、GB/T83 13—2008对
3O个茶叶样品进行茶多酚含量测定。
1.3 实验分析方法
分别用GB/T8313—2002与GB/T8313—2008法
收稿日期:2013—05—09 修改稿收到日期:2013—06—19
作者简介:钟兴刚(1977一),男,湖南宜章人,助理研究员,主要从事茶叶成分和农残重金属分析检测。
第3期 钟兴刚等:酒石酸亚铁法和福林酚法测定茶多酚的差异原INN"究 29
表1 没食子酸工作液的浓度及对应的吸光度
。
/
・ / ◆系歹Ul 一线 (系列1)
/
l 10 2O 30 40 5O 6O
图1没食子酸标准曲线图
对3O个样品进行茶多酚检测,对两种结果进行数
据统计分析研究。
2结果分析
第一,从表l、图1分析来看,在福林酚法中,没
食子酸的标准品曲线比较理想,R2=O.999,被视为可
以用作计算茶多酚含量的曲线及公式。第二,酒石
酸亚铁法检测的茶多酚结果都比福林酚法高,最高
的高出35.47%,最低的也高出26.12%,从30个样
品的平均差异比率看,这两种方法检测的结果相差
30.73%。第三,两者结果比的系数比最高为1.549,
最低比为1.369,平均系数比为1.471,与两者所用
理论系数比值3.914:2.78=1.408的结果极为相近,
可以认为合理。
3结论与讨论
酒石酸亚铁法作为茶多酚检测的经典方法在
国内被应用了几十年,采用3.914的经验系数进行
茶多酚结果计算,查阅相关资料表明:3.914的系数
表2两种检测方法茶多酚含量
是以茶叶中乙酸乙酯分离物作为标定物质,进行标
准曲线计算而得出的系数,而乙酸乙酯分离物中不
仅仅包括了多酚类物质,还包括了一些其他内涵成
分,所以检测结果会偏大。
福林酚法主要利用福林酚的强氧化性,与多酚
反应变蓝,在765nm处进行检测,采用的标定物质
是以没食子酸作标准物质,当然GB/T8313—2008的
计算方法是利用标准品的标准曲线来进行计算的,
如果使用经验系数进行计算的话,这个通常使用的
系数为2.78。从有关资料和本实验的结果来看,用
福林酚法测定茶多酚,检测结果会偏低。
本实验结果表明,两种方法差异最大为
35.47%,最小为26.12%,平均差异30.73%,也就是
酒石酸亚铁法检测结果平均高出福林酚法的检测
结果30%左右。另根据Turkmen(2006) ̄ 盼别用酒
石酸亚铁法和福林酚法测定了土耳其红茶的多酚
含量,结果表明酒石酸亚铁法测得含量为1 3 1.9mg/g,
而福林酚法测得含量为99.8 mg/g,(下转第34页)
6 5 4 3 2 1 0 l
n n n n n n
制
34 茶叶通讯 第40卷
性。进一步地,如果再通过市场化的运作和传播,则
有可能使这一明显带有地方特色的感官经验被更
大范围内的群体所认可和接受——比如各种茶叶
评定中的“国标”即是将个人化的感官经验推广为
一种普适性标准的例子。从人类学对物质性与身体
感的研究来看,茶是一个物性受到人们精心操作的
例子。今天大家耳熟而详的各种茶类,从乌龙、绿
茶、红茶、黑茶等,并非生而有之,而是将茶树的叶
子通过不同的加工制作而成。茶(一种树叶)之所以
为茶(一种非常重要的饮料)乃茶农利用不同茶种
的特性,并开发不同的制作工序,将茶叶转化为具
有不同滋味之茶叶的结果,它们经历茶农与专家长
久研究茶叶的性质,从各种原料中挑选适当者,并
于各种制作(因而有各种滋味)的可能性中,开发出
具有特色、能轻易辨认、且为消费者/市场接受的典
型风味,有清楚定位后,再将茶树改为扦插种植,以
维持此茶种基因、茶叶质性的稳定性,并出现各种
茶之标准工序的制定,以容许此茶类之典型风味能
够永续,而成为一类之茶,有其名称,有其市场;所
以说,各种茶的物性,乃是茶农与专家长期的钻研、
实验而展现出来的。如此茶叶可以分出种类、等级,
(上接第29页) 前者高出后者32.16%,与本文实
验平均结果相近。
两种方法的检测结果到底哪种更接近真实结
果,可用第三种方法间接加以证明。根据李大祥翻曾
用RP—HPLC法和Robeas法分别测定了绿茶、乌龙
茶和红茶样中的儿茶素、茶黄素、茶红素含量[31,将
此三者含量之和作为茶多酚总量,结果与酒石酸亚
铁法检测结果非常接近。如果以RP—HPLC法和
Robe,s法相结合测得的茶多酚总量为相对精准的
真实值的话,那么间接证明了酒石酸亚铁法比福林
酚法更接近实际的茶多酚结果。
茶多酚是一种复合物,其中包括了儿茶素、茶
黄素、茶红素、茶褐素、黄酮类、花青素等等,不同的
组分与亚铁离子形成紫蓝色络合物,可用分光光度
法测定其含量,所以酒石酸亚铁法既适合茶多酚没
发酵氧化或轻发酵氧化的茶类(白茶、绿茶、青茶),
也适合中度或完全发酵氧化的茶类(黄茶、红茶和
黑茶),同时也适合茶粉及其制品和茶饮料等的茶
多酚测定。据周卫龙等嗍报道表明酒石酸亚铁法并
不适合茶叶提取物制品中茶多酚的测定,同时他还
并发展出各自的泡茶品饮方式,以呈现各自的风
味,也因此,各类茶也常为认为有各自的“个性”。[71
久安古茶树从昔日无人问津的山间野茶到今
日“一树干金”的名茶的过程,无疑是一种“物质性”
受到社会、文化、历史、环境诸多因素操纵的结果。
从物质本身来看,久安古茶树的物理结构在今天并
没有发生显著变化,但由于茶一尤其是具有几百
年历史的古茶树这一特殊物质所具有的众多象征
意涵及其能够吸纳的广泛的操作性,使其成为了一个
很好的探究物、地方与文化体系之间的关系的案例。
参考文献
1陈椽.茶叶通史【M】.北京:农业出版社,1984.
2【唐】陆羽.茶经[M】南京:凤凰出版社,2007.
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2008.
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6《生物史》编写组.生物史[M】.北京:科学出版社,1979.
7余舜德.物与身体感的研究【M】.台北:国立清华大学出版
社。2010.
表明福林酚法可用于茶叶及茶叶制品中茶多酚的
测定,包含了与茶有关产品中茶多酚的测定。
由于福林酚法还用于蛋白质的检测,所以福林
酚法并不能有效区分茶多酚,一些还原性氨基酸,
植物中非多酚类酚陛物质,如抗坏血酸等等都会有
反应变蓝,从而导致测定的结果并不真实,这也是
它的局限性。作者认为:福林酚法更适合多酚含量
比较单一的或是未氧化发酵的茶类中茶多酚的测
定,这也就是福林酚法更适合绿茶和茶叶提取制品
中茶多酚的测定,与周卫龙等报道结果是相同的。
参考文献
1 Turkmen,N,SARI,F,Velioglu YS.Effect of extraction solvents
on concention and antioxidant activity of black and black
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Ciocalteu methods[J].Food Chemistry,2006,99:835-841.
2李大祥,宋丽.酒石酸亚铁法和Folin—Ciocalteu法测定茶
多酚总量的比较研究.第四届海峡两岸茶业学术研讨会
论文集[D】,311 ̄314.
3杨荣俊.茶鲜叶中多酚类物质在茶叶加工中的变化[D】.安
徽农业大学2005届学士学位论文,2005.
4周卫龙.GB/T8313—2008第二法茶叶中茶多酚测定的研
究比较[J】.中国茶叶加工,2009,(1):40~41.
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