湖北大学
湖北大学生命科学学院
生物化学实验报告
不同水果中维生素C的含量比较(间接碘量法)
杨勇2014级生物技术产业班
2015/5/19
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一.实验目的
1.掌握间接碘量法测定维生素C的原理和方法;
2.了解维生素C的功能及测定意义;
3.了解不同水果中的维生素C的含量,给维生素C的摄入提供有价值的建议;
二.实验原理
维生素C又称作抗坏血酸。在1928年,从牛的肾上腺皮质质中提取出来的结晶物质,
证明对治疗和预防坏血病有特殊功效,因此称作抗坏血酸。维生素C,六碳多羟基,酸性化
合物,白色针状结晶,有酸味,可溶于水。
在弱酸性条件下,可被碘氧化为脱氢抗坏血酸。维生素C的分子式为C6H8O6,分子量
为176,分子中的烯二醇基具有还原性,易被氧化为烯二酮基。碘溶液具有氧化性质,可以
用标准碘溶液对维生素C进行直接滴定和间接滴定,本实验,我们采用间接滴定法,测定不
通水多种水果中的维生素C的含量。
反应1.C6H8O6+I2=C6H6O6+2HI;
反应2.I2+2Na2S2O3=Na2S4O6+2NaI
三.实验器材
1.实验仪器:组织搅碎机、容量瓶(50ML)(四只)、电子分析天平、锥形瓶(100ML)
(四只)、酸式滴定管、胶头滴管、漏斗(四只)、滤纸、移液枪(带移
液枪头)、烧杯(四只)
2.实验试剂:2%草酸溶液、1%草酸溶液、0.5%淀粉溶液、2mol/L醋酸溶液、0.01mol/L
标准碘溶液、0.01mol/L标准Na2S2O3溶液、新鲜水果(苹果、橙子、柚子、
香蕉)
四.实验步骤
1.提取样品:将新鲜水果用水洗净,用纱布或者吸水纸拭去表面的水。然后各称取
20.0g,加2%草酸100ML置于组织搅碎机中打成浆状。然后各称取桨状物5.0g,倒
入50ML容量瓶中以2%的草酸溶液稀释到刻度(若浆状物中泡沫较多,可以加入数
滴辛醇或者丁醇)。静置10min,过滤(最初的数ML不要)。过滤液体备用。
2.完全反应;取四只干净的锥形瓶,分别标上序号或者字样,再分别取过滤试样2.0ML
到50ML锥形瓶中,加入9ML1%草酸溶液,加入2mol/L的醋酸溶液2~3ML(调节溶
液的ph为5-6弱酸性),然后每个锥形瓶中加入10ML标准碘液,将每个锥形瓶都
摇匀,静置1min,待滴定;
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3.样品滴定:静置后,用0.01mol/L的Na2S2O3溶液滴定溶液中剩余的碘,滴定到浅
黄色时,加入2-3滴0.5%淀粉溶液作为指示剂,然后继续滴定到蓝色消失,并且在
30s内溶液不变色,此时即为滴定终点,记录下每一组的实验数据,完成下面的表
格(表-1)。
4.计算。根据实验数据计算每种水果中维生素C的含量(mg/100g)。
5.实验分析和评估
6.实验小组讨论(为摄入适量维生素C提出有价值的意见)
五.数据记录
表-1不同水果中维生素C的含量测定
苹果橙子梨子香蕉
样品过滤液/ml1.01.01.01.0
1%草酸/ml9.09.09.09.0
标准碘溶液/ml10.010.010.010.0
滴定前示数0000
滴定后示数8.02.410.83.6
消耗标准
0.01mol/lNa2S4O6
溶液
8.02.410.83.6
维生素C含量
(mg/100g)
4.87.63.47.0
六.计算
m=(v1*c1-v2*c2/2)*M*25*100/1000mo
式中m:100g水果样品中抗环血酸的含量(mg);
V1:样品溶液中加入的标准碘溶液的体积(ML);
C1:标准碘溶液的浓度(mol/L);
V2:滴定溶液中剩余碘消耗的标准Na2S2O3溶液的体积(ML);
C2:标准Na2S4O6溶液的物质的量浓度(mol/L);
25:稀释倍数25;
M:维生素C的摩尔质量;
100:水果样品100g;
m0:所取水果样品匀浆质量为m0=5.0g;
1000:将最终的单位统一为升;
2:单质碘和硫代硫酸钠的反应关系为,I2—2Na2S2O3
七.实验信息搜集
水果种类维生素的含量(mg/100g)
苹果5.0
梨子4.0
香蕉8.0-10.0
橙子33.0
八.实验分析与思考
1.1.维生素C属于不稳定维生素,尤其是在溶液状态下,容易被热、碱、氧和光破坏,
在酸性条件下较为稳定。提取维生素C应该迅速,以防样品暴露于空气中被氧化破坏。
2.滴定速度应该迅速,并且要注意碘的挥发性。
3.有的水果细胞色素对滴定实验可能造成干扰,可以使用一定的脱色剂,再加入指示剂
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方面,要把握好时机,判断滴定终点要准确。
4.本次试验中,我们所用到的实验试剂均为本组成员自己配制的,在配制过程中,也出现
了一些不足或者缺陷,例如,配置溶液,没有是固体完全溶解就进行定容;在提取样品
进行过滤时,没有严格静置10min,也没有完全过滤水果匀浆;滴定只进行了一次,没
有进行平行滴定以减小偶然误差等;
5.在设计实验时,也存在考虑不周方面,经过查阅资料获知100g橙子中的维生素含量大
约为33mg,而在设计实验时,将标准碘的加入量定位为10ML,面临着可能不能足的情
形;但最终我们的实验结果显示,橙子中维生素C的含量为7.6mg/100g;我们组的橙子
实验结果与资料中的有较大的偏差,经分析思考,我们得到,我们组购买的橙子实验样
品不够新鲜,在制作组织匀浆时,我们没有采用组织搅碎机,并且在研磨时,没有及时
的加入2%草酸,这样可能使得我们组所得到的橙子样品研磨不够充分或维生素C遭到
一定程度的破坏,最终这些因素影响着我们所得到的维生素含量;对比资料显示,其他
的三类水果中的维生素含量测定比较准确;
6.这次生物化学实验对我们提出了要求,涉及到的实验技能也贯穿我们平时实验学习过程
中。要掌握基本的实验原理和常用到实验方法,掌握样品制作、一定浓度的溶液配制、
溶液的移取、滴定等实验操作;还要求了对整体实验的把握,团体实验的分工配合,还
要求我们态度严谨认真;
九.实验总结
1.对于测定维生素C,我们已经有多种方法和途径,有紫外可见分光光度法、荧光法、
2,6-二氯酚靛酚滴定法、碘量法(直接碘量法、间接碘量法)等;
2.根据我们这次实验和平时的相关了解,对于我们生活摄入维生素C可以提出一定的意
见或者建议,在我们日常生活中应该注意到维生素C对于我们的生理重要性,对于苹果、
橙子、梨子、香蕉这几种常见常食用的水果,我们可以选择维生素C含量高的橙子、香
蕉,但是我们也应该使用其他水果,不同种水果中维生素的种类和含量不相同,这样就
不易出现维生素摄入不足的情形;
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