震惊反射实验

系统功能

1、重量传感器的选择与定型（1~2kg）

2、装置控制卡的功能

（1）能接受主控制器的指令，进行声、光、电、气的启动与中止

（2）能采集放大重量传感器的信号，并传送到主控制器

（3）一个观察装置配置一个装置控制卡

3、主控制器的功能：

（1）能与上位机通讯，接受上位机的指令，进行数据的采集、声光电气的启动与中止

（2）能与装置控制卡进行通讯

（3）能同时控制4个装置控制卡，并进行独立工作

4、与上位机软件的接口

（1）提供图形化的数据采集界面，波形的显示（4通道）

（2）提供采集参数的设置界面

（3）提供实时的采集数据（Y值）

（4）声光电的启动时间、持续时间、终止时间由上位机确定

（5）信号采集的启动时间、持续时间、终止时间由上位机确定

（6）提供OCX或者Dll进行模块化设计。

5、技术指标

（1）声刺激强度：85分贝，95分贝，最大130分贝，可通过软件设置；声刺激频率：可通过软件设置，4~25KHz

（2）光刺激强度：2w；光刺激频率：可通过软件设置，默认60次/分钟

（3）电刺激：电流强度0~3mA（恒流）可调

(4)气（触觉刺激）：通过气瓶调节气压，气的输出时间能过软件控制气阀

（5）信号采样频率：0~500KHz，可通过软件进行设置

（6）数据要求，16位A/D数字信号

（7）上位机与下位机的通讯方式采用USB接口方式

(8) 数据采集：开始刺激时，动物反应潜伏期，动物反应高度，动物反应时间，动物叫声分贝采集

（9）可灵活配置刺激方式：如声、光、电、结合等实验方式

PPI(前脉冲抑制)

短暂而强烈(一般大于80dB）的听觉刺激可以引起震惊反射。在强的震惊反射刺激出现之前20~500ms内对实验动物施加一个本身不能引起震惊反射的声音刺激，可以将震惊的幅度减小80%。这种在强烈的震惊反射刺激出现前的一段时间内出现的弱感觉刺激对震惊反射的抑制作用就叫做PPI。

PPI测试

PPI测试通常使用听觉刺激模式，通常采用爆破白噪音，常用刺激序列如下：每一轮刺激刚开始时让受试对象适应一定强度的背景噪音，且持续在整个实验过程中，首先给予仅有强刺激的小实验，然后给出弱刺激与强刺激为不同时间间隔的一系列小实验，小实验顺序以随机方式给出，每两个小实验之间的时间间隔为8~30s或更长（通常为15~20s），以便后面的刺激是作为新奇刺激出现的，避免了前面刺激产生的不应期对后面刺激的影响，而且随机变化的实验间隔时间较固定间隔更少出现惊跳反射的适应性。

为保证声音刺激和实验数据的准确性，设备应配备标准仪器，在每次实验前用标准仪器对设备进行校准。

实验仪器

震惊反射实验蓝图震惊反射系统有以下组成：隔音箱1个，加密狗1个，鼠笼2套，传感器1个，，传感器支架1套，电源线 2根，USB采集线1根，标准串口线2根，震惊反射系统组成。

实验方法

分为训练和测试两阶段

（一）训练阶段（第一天）

1．调试仪器，以确保格栅地板有电流刺激，扩音器有声音刺激，并分别记录电流强度和声音强度（分贝）。

2．将大鼠放入条件恐惧箱2min（A相），记录这最初2min内动物的凝滞（freezing）时间作基线。

3．接着加入卡嗒声，80Db,30s(B相)。

4．紧接着再给予电击，0.35mA，2s（C相），完成一轮训练。如需要多轮训练，则重复A、B、C三相训练即可。

5．记录整个训练阶段动物凝滞时间（s），用以测量动物的非条件恐惧（unconditioned fear）。

6．将大鼠移开操作箱。用70%的酒精或4%醋酸溶液彻底清洁操作箱，以备进行下一批动物的训练。

（二）测试阶段 在训练后的第二天进行，包括关联（context）测试、变更关联（altered context）或条件刺激前（pre-conditioning-stimulus，pre-CS）测试以及条件刺激（conditioning stimulus，CS）测试。测试阶段没有电击刺激。关联测试和变更关联测试中也没有听觉条件刺激，但每只动物所用的操作箱应与训练阶段的相同。

1．关联测试 将动物放入箱内，计算机自动记录动物的凝滞行为。若用人工观察，则观察者（应不知道动物的处理或基因型）用静声秒表通过箱门上的猫眼（小窗口）观察动物的行为并计分：凝滞为1分，活动（moving）为0分（也有只记录凝滞时间）。每10秒观察一次，共5min，这样可记录到30次（bout）可能的凝滞（即最大凝滞得分为30分）。用在这一阶段记录到的、动物在同一操作箱内的凝滞时间测量动物的关联条件恐惧（contextually conditioned fear）。此为关联测试。观察结束后将动物放回笼内，清洁操作箱，进行下一只动物的观察。