考点75蛋白质的提取与分离
1.蛋白质提取与分离的依据
分子的形状、大小;电荷性质和多少;溶解度;吸附性质;对其他分子亲和力什么屎不臭。
2.凝胶色谱法
(1)材料:凝胶
多孔性,多糖类化合物六一儿童节作文开头,如葡聚糖、琼脂糖。
(2)步骤:混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分
子
原理:当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质容易
进入凝胶内部的通道文学手抄报,路程较长业务员提成制度,移动速度较慢;相对分子质量较大的蛋白质无法
进入凝胶内部的通道无级生,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。相对分子
质量不同的蛋白质因此得以分离蒸排骨的做法。
3.缓冲溶液
(1)概念:在一定范围内英语小说读后感,能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液pH发生
明显变化的溶液莆田旅游景点大全。
(2)作用:能够抵制外界的酸或碱的对溶液的pH的影响,维持pH基本不变清明节祝福语简短优美。
(3)配制:通常由1-2种缓冲剂溶解于水中配制而成结婚请柬。调节缓冲剂的使用比例就可以
制得在不同pH范围内使用的缓冲液。由弱酸和相应的强碱弱酸盐溶解于水中。如
H2CO3/NaHCO3青浦中学,NaH2PO4/Na2HPO4等苜蓿菜。
(4)本实验使用的是磷酸缓冲液(NaH2PO4/Na2HPO4)浙江晚婚婚假多少天,目的是利用缓冲液模拟细胞内的pH
环境,保证血红蛋白的正常结构和功能,便于观察(红色)和科学研究(活性)北京十一天气预报。
4.电泳法
(1)概念:指带电粒子在电场作用下发生迁移的过程开心天地。
(2)原理:分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小学习会计,形状的不同使带
电分子产生不同的迁移速度手,从而实现样品中各种分子的分离神道之门。
1
(3)类型:
琼脂糖凝胶电泳法:由于琼脂糖本身不带电荷,各种分子在电场中迁移速度决定于
所带电荷性质的差异及分子的大小、形状的不同经典一句话语录。
聚丙烯酰胺凝胶电泳法:在凝胶中加入SDS,使蛋白质解聚成单链,与各种蛋白质
形成蛋白质-SDS复合物,使其迁移速度完全取决于分子的大小奶茶行业。
5.实验操作
实验操作的基本步骤:样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定书房图片。
(一)样品处理
(1)红细胞的洗涤:
①目的:去除杂蛋白。
②为防止血液凝固夏天去哪里旅游比较好,应先加入柠檬酸钠黄山奇石有哪些奇石 。
③所用洗涤液:是五倍体积的生理盐水(质量分数为0.9%的NaCl溶液)佛祖圣诞。
④缓慢搅拌网络诈骗举报,采用低速短时间离心。
⑤洗涤干净的标准是上清液没有黄色立夏节气的风俗活动。
(2)血红蛋白的释放:在蒸馏水和甲苯的作用下,红细胞破裂,释放出血红蛋白。
(3)分离血红蛋白溶液:(方法)离心。
试管中的溶液分为4层梅兰芳学艺,从上往下依次是:
①无色透明的甲苯层小小爸爸。
②白色薄层固体:脂溶性物质沉淀层。
③红色透明液体:血红蛋白溶液层。
④暗红色沉淀层:红细胞破碎物沉淀。
(4)透析:
①方法:取1mL血红蛋白溶液装入透析袋,将透析袋放入盛有300mL物质的量
浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7)中科幻故事,透析12h肉桂的功效与作用及食用方法。
②目的:去除样品中分子量较小的杂质。
③原理:透析袋能使小分子自由进出gaokaoshijian,而将大分子物质保留在袋内。
(二)凝胶色谱操作
(1)凝胶色谱柱的制作
制作步骤:打孔→挖穴→安管→覆网→纱包→插管。
(2)凝胶色谱柱的装填
①材料:实验所用凝胶是交联葡聚糖凝胶市场总监岗位职责。
2
②方法:凝胶用蒸馏水充分溶胀后多媒体课件下载,配成凝胶悬浮液,一次性缓慢倒入色谱柱内。
不能有气泡存在美丽心灵电影。然后用300mL物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液充分
洗涤平衡12h会所管理,使凝胶装填紧密裤妹我爱你。
(3)样品的加入和洗脱
使吸管管口沿管壁将样品缓慢加入色谱柱内原料采购,不要破坏凝胶面。待红色的蛋白质
接近色谱柱低端时对我影响最大的一个人 作文,用试管收集流出液2020奥运会在哪里举行,每5mL收集一管,连续收集。
考向一蛋白质提取与分离的方法及原理
1.下列有关提取和分离血红蛋白实验的叙述,错误的是
A.该实验的材料必须选用鸡血
B.通过透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质解方程五年级,此为样品的粗提取
C.凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分离蛋白质
D.电泳法是利用各种分子带电性质的差异及分子的大小差异分离蛋白质
【参考答案】A
2.已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子对金钱的看法,分子大小、电荷的性质和数量
情况如图所示bios设置硬盘模式,下列有关蛋白质分离的叙述正确的是
3
A.若将样品以2000r/min的速度离心10min,分子戊在沉淀中,则丙也一定在沉淀
中
B.若用凝胶色谱法分离样品中的蛋白质妹哥快见,则分子甲移动速度最快
C.将样品装入透析袋中透析12h,若分子丙保留在袋内冬季奥运会如何计算届次,则乙也一定保留在袋内
D.若用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质,则分子甲和分子丁形成的电泳
带相距最远
【答案】A
考向二蛋白质提取与分离的实验操作
3.红细胞中含有大量血红蛋白知足常乐的作文,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验
来提取和分离血红蛋白。下列对血红蛋白提取和分离的叙述,错误的是
A.血红蛋白提取和分离一般按照“样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定”的顺序进行
B.纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液
C.样品处理过程中用蒸馏水的目的是使红细胞吸水涨破释放出血红蛋白
D.可经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定
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【参考答案】B
【试题解析】血红蛋白提取和分离一般按照“样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定”的
顺序进行,A正确;纯化过程中要用缓冲溶液充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液曹操杀华佗,B错误;
样品处理过程中用蒸馏水的目的是使红细胞吸水涨破释放出血红蛋白,C正确;可经
SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定,D正确lol冠军勋章令。
易错警示
1.红细胞的洗涤:洗涤次数不能过少;低速、短时离心凤仙。
2.色谱柱的装填:装填尽量紧密到货通知书,降低颗粒间隙;无气泡;洗脱液不能断流。
3.凝胶的预处理:沸水浴法时间短,还能除去微生物和气泡初一地理上册知识点。
4.色谱柱成功标志:红色区带均匀一致地移动一口咬定打一字。
4.血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分波伏娃,负责血液中O2或CO2的运输特朗普赞美母亲。请
根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题政教处主任述职报告。
(1)将实验流程补充完整:A为________ido电影,B为________。凝胶色谱法是根据____________
而达到蛋白质分离的有效方法。
(2)洗涤红细胞的目的是去除_________,洗涤次数过少dnf怎么净化装备,无法除去_________;离心速
度过高和时间过长会使_______一同沉淀修改路由器密码,达不到分离的效果奶茶52一杯是什么梗。洗涤干净的标志是
__________。释放血红蛋白的过程中起作用的是______________。
(3)在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是
__________帮忙的反义词是什么呢。如果红色区带____________,说明色谱柱制作成功雨的诉说。
【答案】(1)血红蛋白的释放样品的加入和洗脱相对分子质量的大小
(2)杂蛋白(血浆蛋白)血浆蛋白白细胞和淋巴细胞离心后的上清液中没有黄色
蒸馏水和甲苯
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(3)准确模拟生物体内的生理环境,保持体外的pH和体内一致均匀一致地移动
【解析】(1)血红蛋的提取与分离的实验步骤主要有①样品处理:红细胞的洗涤→血红
蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透析;②粗分离;③纯化:凝胶色谱柱的制作→凝胶
色谱柱的装填→样品的加入和洗脱;④纯度鉴定——聚丙烯酰胺胶电泳兔子怎么养。所以A表示血
红蛋白的释放,B表示样品的加入和洗脱宠爱之名。凝胶色谱法的原理是分子量大的分子通过多
孔凝胶颗粒的间隙yudao,路程短,流动快;分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部宋史文天祥传,路程长提高语言表达能力,
流动慢公司简介ppt。所以凝胶色谱法是根据相对分子质量大小而达到蛋白质分离的有效
1.蛋白质的分离与提纯技术是蛋白质研究的重要技术失落的爱情,下列有关叙述不正确的
A.根据蛋白质分子不能通过半透膜的特性踢毽子作文,可将样品中各种不同蛋白质分离
B.根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小莫言作品生死疲劳,可通过电泳分离蛋白质
C.根据蛋白质相对分子质量的大小独坐敬亭山教学设计,可通过凝胶色谱法分离蛋白质
D.根据蛋白质的分子大小、密度不同,可通过离心沉降法分离蛋白质
2.蛋白质提取过程中有关透析的叙述,错误的是
A.用于透析的薄膜要具有选择透过性
B.透析膜一般是用硝酸纤维素制成的
C.透析能使小分子自由出入,而将大分子保留在袋内
D.透析可用于更换样品的缓冲液
3.下列关于凝胶色谱法的原理及操作不正确的是
A.是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法
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B.在洗脱过程中,大分子不能进入凝胶内部而最先流出公牛牌插座,而小分子可以进入凝胶内部而
流速缓慢10个月宝宝,以致最后流出
C.凝胶内部有很微细的多孔网状结构,其孔隙大小与被分离的物质分子的大小无相应关
系
D.一般情况下清蒸多宝鱼,凝胶对要分离的物质没有吸附作用,因此所有要分离的物质都应该被洗
脱出来
4.将处理破裂后的红细胞混合液以2000r/min的速度离心10min后机械设备维修,离心管中的溶液分
为四层天天向上音乐,从上到下的顺序依次是
A.血红蛋白、甲苯层、脂质物质层、细胞破碎物沉淀层
B.甲苯层、细胞破碎物沉淀层、血红蛋白、脂质物质层
C.脂质物质层、血红蛋白、甲苯层、细胞破碎物沉淀层
D.甲苯层、脂质物质层、血红蛋白、细胞破碎物沉淀层
5.为了提取血红蛋白怎样把pdf转换成word,从学校附近的屠宰场取新鲜的猪血基础会计学课后答案,对猪血处理的正确操作是
A.要在采血容器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠
B.取血回来后,马上进行高速长时间离心
C.将离心后的血细胞加入清水缓慢搅拌
D.重复洗涤直到上清液呈红色为止
6.相对分子质量不同的两种蛋白质在凝胶色谱柱中的行进过程,可表示为图中哪一个
A.B.C.D.
7.下列有关血红蛋白的提取与分离的实验操作的叙述,正确的是
A.分离红细胞时采用低速长时间离心
B.红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水即可
C.分离血红蛋白溶液要低速短时间离心
D.透析时要用20mmol/L的磷酸缓冲液长津湖观后感200字,透析12h
8.镰刀型细胞贫血症是一种由基因突变引起的遗传病搞笑对联,患者的红细胞是弯曲的镰刀状蝎子出装。这
样的红细胞容易破裂药品购销合同,使人患溶血性贫血建党100周年心得体会大学生,严重时会导致死亡。某科学兴趣小组计划从
血红蛋白的成分是否变化来开展研究性学习居里夫人的简介。下列是该小组成员获得纯度很高的血红蛋
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白的实验过程茑萝行,不正确的一项是
A.对红细胞进行洗涤,在加入蒸馏水和甲苯使红细胞破裂释放出血红蛋白后实数,将混合液
静置一段时间后分层获得血红蛋白溶液
B.将血红蛋白溶液装入透析袋中透析,可达到粗分离的目的
C.利用凝胶色谱操作对血红蛋白进行纯化
D.使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定碧生源常润茶效果怎样,以获得纯度很高的血红蛋白
9.如图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置。请据图回答下列问题:
(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,它在红细胞中的作用体现了
蛋白质的______________功能轻浮是什么意思。
(2)甲装置用于____,目的是__________________。用乙装置分离蛋白质的方法叫___
_压抑的近义词是什么,是根据__________分离蛋白质的有效方法独坐敬亭山教案。
(3)甲装置中活动计划,B是血红蛋白溶液中秋节送领导什么好,则A是____;乙装置中初二物理试卷,C溶液的作用是________
__________。
(4)用乙装置分离血红蛋白时弗兰德斯的狗,待___________时地中海建筑风格,用试管收集流出液,每5mL收集一
管,连续收集。
10.红细胞内含有大量血红蛋白法制教育总结,我们可以选用猪、牛、羊或其他哺乳动物的血液进行实验七月半是几月几日,
来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题:
(1)血红蛋白的提取和分离一般可分为四步:________、粗分离、纯化和________发票缴销登记表。
(2)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠论语十则读后感,取血回来,马上
进行处理、离心后本是青灯不归客 却因浊酒留风尘,收集血红蛋白溶液。以上所述的过程即是样品处理新概念英语第一册1,它包括
红细胞的洗涤、____________________、____________________自信的力量。
(3)收集的血红蛋白溶液要进行粗分离贾芸,其方法是________。然后通过________将样
品进一步纯化down是什么意思,最后经________进行纯度鉴定。
(4)如图是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品加入和洗脱示意图冬至作文。请据图回答下列问题。
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①在加样品示意图中,正确的顺序是___________________五一黑板报内容。
②用吸管加样品时吃什么补钙最好,应注意正确操作莲花出淤泥而不染,分别是______________、______________、
________________。
③待________________时,才加入缓冲溶液dnf控偶师快速升级。
④待________接近色谱柱底端时动车票可以提前几天买,用试管收集流出液地下城为什么进不去,每________mL收集一管,
连续收集。
1.【答案】A
【解析】蛋白质分子不能通过半透膜,但溶液中的小分子物质则可以透过半透膜,因此
可以将蛋白质和溶液中的小分子物质分离,A项错误。电泳是指带电粒子在电场的作用
下发生迁移的过程360抢票,根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小,可通过电泳使带电分
子产生不同的迁移速度,从而实现蛋白质分子的分离降头术是真的吗,B项正确。凝胶色谱法的原理是:
分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短该走的都走吧,流动快,而分子量小的分子穿过多
孔凝胶颗粒内部agull吉他,路程长三角形内角和,流动慢怎么用手机赚钱,所以可以根据蛋白质相对分子质量的大小qq透明图片,通过凝
胶色谱法使大分子的蛋白质先洗脱出来家庭养殖致富项目,小分子的蛋白质后洗脱出来,从而实现蛋白质
分子的分离,C项正确双子座女生和什么座最配。根据蛋白质的分子大小、密度不同,可通过离心沉降法使不同
密度的蛋白质分子位于不同层次的离心液中小说封面图片,从而实现蛋白质的分离小雨点,D项正确。
2.【答案】A
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3.【答案】C
【解析】凝胶内部有很微细的多孔网状结构,其孔隙大小决定了被分离的物质分子的运
输路径,从而实现了物质的分离惠氏奶粉怎么看真假,C错误。
4.【答案】D
【解析】将处理破裂后的红细胞混合液以2000r/min的速度离心10min后,离心管中
的溶液分为四层,从上到下的顺序依次是甲苯层、脂质物质层、血红蛋白、细胞破碎物
沉淀层走月亮仿写第六段小练笔,D正确。
5.【答案】A
【解析】为了防止血液凝固多幸运,要在采血容器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠思念是我手中的线,A正确;取
血后,应进行低速短时间离心怎么去痣最好,B错误;离心后的血细胞加入蒸馏水和40%体积的甲苯牛肉咖喱饭的做法,
置于磁力搅拌器上充分搅拌,使红细胞破裂,C错误;红细胞重复洗涤直到上清液不再
呈现黄色为止土豪是什么意思,D错误经典群名称。
6.【答案】B
【解析】相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程长,移动的速度慢临西一中,
相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道永定土楼旅游攻略,路程短,移动的速度快dnf刷疲劳,B正确。
7.【答案】D
【解析】分离红细胞应采用低速短时间离心爱是永恒的,防止白细胞与红细胞一同沉淀共产党宣言,A错误;
红细胞释放血红蛋白,需加入蒸馏水和40%体积的甲苯完美生活歌词,再在磁力搅拌器上充分搅拌10
min糖尿病预防,B错误;分离血红蛋白要高速长时间离心环保发言稿,C错误;透析时要用20mmol/L的磷酸
缓冲液浮想联翩意思,透析12h,D正确。
8.【答案】A
9.【答案】(1)运输
(2)透析(粗分离)去除样品中相对分子质量较小的杂质凝胶色谱法相对
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分子质量的大小
(3)磷酸缓冲溶液洗脱血红蛋白
(4)红色的蛋白质接近色谱柱的底端
【解析】(1)血红蛋白具有运输O2的作用情感故事口述,体现了蛋白质的运输功能。(2)甲是透析
装置化妆的一定会扣分,用于透析,其目的是去除样品中相对分子质量较少的杂质绿袖子幻想曲,使大分子蛋白质保留
在袋中坚守底线。乙是利用凝胶色谱法分离蛋白质的装置,是根据相对分子质量的大小分离蛋白
质的有效方法一本与二本的区别。(3)甲所示的透析装置中,透析袋内的B是血红蛋白溶液天门蒸菜,则透析袋外
的A是磷酸缓冲溶液。乙装置中的C为缓冲溶液tl wr541g,其作用是洗脱血红蛋白喜剧电影全集。(4)由于血
红蛋白带有红色,当红色的蛋白质接近色谱柱的底端时形容烟花的词语,用试管收集血红蛋白,每5mL
收集一管小屁孩日记,连续收集。
10.【答案】(1)样品处理纯度鉴定
(2)血红蛋白的释放分离血红蛋白溶液
(3)透析凝胶色谱法SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
(4)①④→①→②→③②不能破坏凝胶面贴着管壁加样使吸管管口沿管壁
环绕移动③样品完全进入凝胶层③红色的蛋白质5
【解析】(1)血红蛋白的提取和分离一般分为四步:样品处理、粗分离、纯化和纯度
鉴定。(2)样品处理包括红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液和透析四步关于人生之路的作文。
(3)收集的血红蛋白溶液要通过透析的方法进行粗分离;样品的纯化是通过凝胶色谱
法将相对分子质量大的杂质蛋白除去,最后
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本文发布于:2022-09-12 09:29:59,感谢您对本站的认可!
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